一、药用水蛭的人工养殖技术（论文文献综述）
柴晓昕,甘奇超,赵瑞亭,史景彦,郭平牯,袁渊,马莉[1]（2022）在《基于三代高通量测序技术的不同养殖环境下日本医蛭微生物多样性研究》文中提出目的:研究不同水源养殖的日本医蛭Hirudo nipponica Whitman肌肉、肠道组织样本的细菌群落结构,分析除氯自来水养殖的可行性及日本医蛭相关的重要有益微生物。方法:分别在地下水和除氯自来水的循环养殖系统中进行日本医蛭养殖,采用PacBio三代高通量测序技术对不同水源养殖水蛭的肌肉和肠道组织样品进行菌种初步分类鉴定及微生物群落组成分析。结果:与地下水养殖的水蛭相比,除氯自来水养殖的水蛭样本表现出更简单的微生物群落结构,且黏液菌属（Mucinivorans）、梭杆菌属（Fusobacterium）、拟杆菌属（Bacteroides）等有潜在致病风险的菌属相对丰度明显低于地下水养殖组。结论:采用除氯自来水开展水蛭养殖工作是可行的。与日本医蛭相关的共生菌（Aeromonas和Rikenella）及有益微生物在水蛭的生长发育过程中起着重要的作用,提示可以利用环境或饵料中的有益微生物来提高日本医蛭的产量。
陈琛,戚敏,杨秀娟[2]（2021）在《菲牛蛭体成分和养殖技术的研究进展》文中研究表明菲牛蛭含有水蛭素、菲牛蛭素等多种活性成分,具有抗凝血、抗肿瘤、抗炎、降血脂等作用,在医学上有着广阔的应用前景。菲牛蛭作为一种药用动物,其主要抗凝血功能在单位质量上均优于其他几种水蛭,在经济效益上优于其他水蛭,其有效成分研究和人工养殖技术也在不断地发展与完善。文章就菲牛蛭的体成分以及养殖技术研究进展进行综述,为菲牛蛭的养殖和开发提供参考。
余米,周梦,曹敏,封孝兰,曾德军,吴佳勇[3]（2021）在《药用水蛭研究进展》文中提出梳理了关于药用水蛭的相关报道,对药用水蛭资源、抗凝血物质、人工养殖研究等进行了详细的综述,剖析了当前水蛭养殖存在的主要问题,以期为药用水蛭的规范化养殖与推广提供基础资料与理论依据。
郑利,覃川杰[4]（2020）在《宽体金线蛭研究进展》文中提出宽体金线蛭是一味中药材,具有活血化瘀、抗血栓、抗肿瘤及抗早孕等重要作用,其唾液腺中存在着能减缓血液凝固、抑制血栓形成的水蛭素。目前,宽体金线蛭体内的活性成分是治疗心血管疾病重要药物之一,因此宽体金线蛭在药业市场的需求量大。近十几年来,宽体金线蛭养殖技术和水蛭素药用价值深受研究者关注。主要归纳和总结了宽体金线蛭的生物学特性、养殖技术,水蛭素的提取方法、药理作用等方面的研究进展,以期为宽体金线蛭的养殖和开发提供参考。
孙德祥,郑高峰[5]（2020）在《人工养殖水蛭技术及市场前景、社会经济效益浅析》文中指出笔者通过大量的市场调查、企业走访、资料查阅等方式,对水蛭的生物学特性、人工养殖前景以及社会经济效益进行了研究分析,研判了水蛭人工养殖前景,并对水蛭人工养殖基本技术要点进行了简要阐述,以期为开展水蛭人工养殖的企业和个人提供借鉴。水蛭是一种具有较高药用价值和经济价值的生物,在消肿破淤、散结通经、消胀除积、消炎解毒等多个方面具有一定的药效。其干燥全体作为
李明玥[6]（2020）在《宽体金线蛭种蛭筛选、麻醉方法和饥饿胁迫的初步研究》文中认为水蛭在我国用药历史悠久,常用于治疗多种淤血所致心脑血管疾病。水蛭的主要药用品种为宽体金线蛭,多数中成药也以宽体金线蛭进行投料。近年来,宽体金线蛭的野生资源逐年减少,价格不断攀升,养殖研究需求增加。宽体金线蛭具有巨大的经济价值和科研价值,成为了我国新兴的经济物种。1.宽体金线蛭的群体考察、种蛭筛选与产茧后药材质量评价微山湖是我国宽体金线蛭的传统产区,许多人工养殖的种蛭来自于微山湖地区渔民的野外捕捞作业。本研究通过体重和生殖环带发育等特征对微山湖宽体金线蛭的群体进行考察,发现微山湖地区宽体金线蛭野生种群的体重普遍较小,宽体金线蛭生殖环带的颜色和面积随体重的变化而变化;观察并总结了宽体金线蛭胚胎发育的规律,便于选择合适的发育时相进行出苗数的考察,也为后续深入胚胎发育研究奠定基础;将种蛭分为10、15和20 g三个试验组,通过产茧数、茧体积、出苗数等指标考察体重对宽体金线蛭繁殖性能的影响,发现宽体金线蛭的繁殖性能随种蛭体重的增加而显着提高,但结合野生种群的体重分布范围,建议使用15g及以上的种蛭进行繁殖生产作业,20g及以上的种蛭用于良种繁育研究;最后,依照2015版《中华人民共和国药典》对产茧前后水蛭药材的性状和抗凝血酶活性进行质量评价,发现产茧后药材厚度变薄、腥味散失严重、脆度下降,产茧前后抗凝血酶活性变化不大,这表明产茧后药材的商品规格和等级较低,不适宜作为饮片直接用于临床。2.宽体金线蛭麻醉方法的初步构建目前宽体金线蛭的研究尚缺乏合适的麻醉方法,不利于后续宽体金线蛭研究工作的展开。本研究基于宽体金线蛭的生长繁殖习性初步建立了宽体金线蛭的实验室管理方法,为后续所用宽体金线蛭的实验管理奠定基础;通过观察宽体金线蛭对麻醉剂Tricaine的反应,初步将麻醉划分为4个阶段:镇静期、失衡期、麻醉期、深度麻醉期;深度麻醉后在清水中复苏24 h,宽体金线蛭的存活率为100%,安全度高,麻醉前后的平均产茧数分别为4.10和3.38,对繁殖性能的影响较小;建议选择2 g·L-1的Tricaine用于镇静和运输等常规操作,选择4 g·L-1及以上的Tricaine用于进行实验室处理等精细操作。此外,我们通过RNA-seq技术对麻醉前后宽体金线蛭的基因表达差异进行研究,一方面考察麻醉对基因表达影响的范围以判断麻醉是否适合与基因表达相关的取样操作,另外一方面尝试探讨宽体金线蛭麻醉的机制;研究发现Tricaine麻醉对大多数基因的表达没有显着影响,一共有29个基因显着差异表达;显着富集的GO term和KEGG pathway多与离子结合功能有关,包括7个钙结合相关基因,其中6个上调,1个下调。这表明Tricaine麻醉可以用于后续深入生化分析实验中,不会对实验结果造成显着影响;Tricaine麻醉宽体金线蛭可能是几个基因的综合作用,可能通过影响信号传导、影响神经递质的释放、改变Na+浓度等功能最终实现麻醉的作用。3.宽体金线蛭饥饿胁迫的高抗逆性研究在自然环境或人工养殖中,宽体金线蛭常被迫经历饥饿胁迫,如越冬、繁殖产茧等过程。对饥饿胁迫的高抗逆性将有助于提高宽体金线蛭的养殖成活率。本研究利用RNA-seq技术对经过不同时长饥饿胁迫的宽体金线蛭进行转录组分析,在不同饥饿组中找到了 136个共有显着差异表达的基因,其中65个上调基因、71个下调基因;共有的GO term一共199个,其中189个上调GO term、10个下调GO term;共有的KEGG pathway一共42条,其中22条上调通路,20条下调通路。在长期饥饿胁迫下,宽体金线蛭的差异基因主要在糖酵解与糖异生、脂肪酸降解与代谢、多种氨基酸的降解与代谢、柠檬酸循环、溶酶体、谷胱甘肽的代谢等多个生物过程中表达。这表明宽体金线蛭可能是通过调控多个代谢通路,进行糖类、脂肪酸、氨基酸等重要物质的代谢转化,实现机体能量的供给,同时基因Lysoz和Gpx7、Gstp、Ptgds的表达上调可能分别有助于提高机体的免疫能力与抗氧化能力,最终达到提高机体在饥饿胁迫下的抗逆性的目的。这为后续探索饥饿胁迫的高抗逆性的机制研究指明方向,同时为后续人工育种提高宽体金线蛭抗逆性的研究奠定基础。
罗雪梅[7]（2020）在《铅污染对水蛭及其抗凝血作用影响的代谢组学研究》文中进行了进一步梳理研究目的水蛭防治心脑血管疾病的疗效显着,以水蛭为原料药的中成药逐渐增多。蚂蟥Whitmania pigra Whitman作为水蛭的主要来源之一,用量也越来越大。野生蚂蟥资源匮乏,人工养殖蚂蟥的出现解决了这一燃眉之急。但蚂蟥养殖环境的污染问题日益严重,致使蚂蟥体内铅（Pb）含量超标,严重影响水蛭药材的安全性与有效性。本课题旨在揭示铅污染对水蛭代谢及其抗凝血作用的影响,从代谢水平探究其影响机制,为保障水蛭药材的安全性与有效性提供理论基础。研究方法1.铅污染水蛭的养殖及其代谢组学研究:利用硝酸铅对养殖土壤进行不同浓度污染（高、中、低污染组）,在水族箱内模仿蚂蟥养殖环境对其进行为期50天的饲养,以获得被铅污染的水蛭药材。2.铅污染水蛭对凝血功能和血液流变的影响:（1）利用全自动凝血分析仪测定加入不同处理组水蛭提取液的兔血浆的APTT值和PT值,研究铅污染水蛭在体外对血浆凝血功能的影响。（2）使用皮下注射肾上腺素加冰水浴的方法建立大鼠急性血瘀模型,然后提取不同处理组水蛭药材,灌胃给药血瘀模型大鼠,通过采集大鼠血液进行凝血功能和血液流变学检测,研究铅污染对水蛭干预血瘀大鼠血液流变与凝血功能的影响。（3）利用全自动凝血分析仪测定空白大鼠和给药PbNO3大鼠的凝血功能,研究铅自身对大鼠凝血功能的影响。3.利用UPLC-Q/TOF-MS测定来自不同铅污染环境的水蛭组织样品,通过比较各组代谢物的差异,探究铅污染对水蛭的影响。4.基于代谢组学研究铅污染对水蛭抗凝血作用的影响:利用UPLC-Orbitrap-MS测定不同处理组SD大鼠的血浆,通过比较各组大鼠血浆代谢物的差异,探究铅污染对水蛭干预血瘀大鼠的影响。实验结果1.成功获得不同处理组水蛭样品:空白组（铅残留量:2.05 mg.kg-1）;铅低残留组（铅残留量:3.185 mg·kg-1）;铅中残留组（6.46 mg·kg-1）;铅高残留组（10.66 mg·kg-1）。2.不同处理组水蛭提取液对兔血浆APTT值和PT值影响的结果显示:与生理盐水组相比,水蛭提取液在体外能显着（P<0.05）延长兔血浆的APTT值;但是加入铅污染水蛭提取液的兔血浆的APTT值均比加入空白水蛭提取液的低,其中铅高残留组的APTT值与空白水蛭组存在显着性差异（P<0.05）;不同处理组水蛭提取液在体外对兔血浆的PT值无明显影响。利用全自动凝血分析仪测定各组大鼠的凝血功能的结果显示:血瘀模型组的APTT、PT和TT值均比空白对照组低,而FIB值较空白对照组高,其中PT值和FIB值在统计学上存在显着性差异（P<0.05）。无污染水蛭组和空白水蛭组的APTT值无显着性差异,而铅污染水蛭组与水蛭组的APTT值存在显着性差异。血瘀模型组与铅污染水蛭组的FIB值无显着性差异,无污染水蛭组与铅污染水蛭组的FIB值存在显着性差异。利用全自动血液流变测试仪测定各组大鼠的血液流变情况,结果显示:血瘀模型组和空白对照组的WBV200、WBV30和WBV3在统计学上存在显着性差异（P<0.05）;无污染水蛭组和空白对照组的WBV200、WBV30、WBV3和PV无显着性差异;铅污染水蛭组的WBV200、WBV30、WBV3和PV与血瘀模型在统计学上无显着性差异;无污染水蛭组与铅污染水蛭组的WBV200和WBV30存在显着性差异（P<0.05）。利用全自动凝血分析仪测定空白大鼠和给药Pb大鼠的凝血功能,结果显示空白大鼠和给药Pb大鼠的APTT、PT、TT以及FIB值均无显着性差异。3.水蛭组织代谢组学研究结果显示:空白水蛭组和铅污染水蛭组样本点完全分开,而且分开趋势呈剂量依赖性变化。总共寻找到24种差异代谢物,其中13种差异代谢物在铅低、中、高残留组中的变化存在剂量依赖性。代谢物大致分为磷脂、甘油三酸酯、核苷酸、二肽等类别,主要涉及能量代谢、脂质代谢、核酸代谢,蛋白质分解等。4.利用代谢组学技术检测各组大鼠血浆,并对各组大鼠血浆样本数据进行模式识别分析,结果显示:空白对照组和血瘀模型组样本点完全分开,无污染水蛭组和与血瘀模型组分离,有向空白组靠近的趋势;铅污染水蛭组与血瘀模型组样本点混合在一起,无法分离。在血浆样本中筛选出与血瘀证相关的差异代谢物25个,主要涉及苯丙氨酸,酪氨酸和色氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢,花生四烯酸代谢,组氨酸代谢等代谢通路。采用水蛭干预后,一半以上的代谢物表现出向对照组回调的趋势,而铅污染水蛭组没有出现上述回调趋势。结论水蛭能通过增强凝血功能、改善血液流动不畅发挥抗凝血作用。与之相反,铅污染水蛭即不能增强凝血功能,也不能改善血液流动性,因而无法发挥抗凝血作用。铅自身不会对大鼠的凝血功能产生影响。水蛭组织代谢物与其抗凝血作用密切相关。铅污染会导致水蛭的脂质过氧化、基因损伤和蛋白质分解,水蛭的自我保护作用是促进细胞膜的修复和DNA及RNA的修复,并激活抗氧化剂水平。水蛭通过调节血瘀证大鼠的花生四烯酸代谢、苯丙氨酸的合成与代谢、组氨酸代谢、谷氨酰胺代谢等代谢途径,改善血瘀证大鼠的能量代谢、增强其免疫力,产生抗炎作用,缓解和治疗血瘀证。与之相反,铅污染水蛭不能调节上述代谢物与代谢通路,无法缓解及治疗血瘀证。创新点首次利用代谢组学研究铅污染对水蛭组织代谢物的影响。首次利用代谢组学研究铅污染对水蛭干预血瘀大鼠的影响。
覃善恩,吕忠坚[8]（2018）在《宽体金线蛭庭院生态养殖的初步试验》文中指出水蛭俗称蚂蟥,具有消肿清淤等功效,是中国传统特种药用水生动物。因人为大量捕捉、农药化肥的广泛应用等原因,野生药用水蛭数量明显减少。随着水蛭药用价值深度开发,市场需求量增大,人工养殖水蛭已成为当今药用水蛭主要来源[1]。宽体金线蛭（Whitmania pigra）体大、药用价值高,是目前药用水蛭养殖的主要品种之一[2],其养殖方式有池塘养殖、网箱养殖、水泥池养殖、庭院
李月丹,曾芸,谢德明,陶飞,李军[9]（2018）在《一株蜡样芽孢杆菌对小鼠的致病力与抵抗力试验》文中研究说明为了对某益生菌产品中分离到的一株优势生长细菌的特性进行系统研究。利用通过形态学观察、16S rRNA鉴定结果该株细菌为蜡样芽孢杆菌;致病力试验通过以菌浓度1×106CFU/mL,按0.1mL/10g腹腔注射小鼠,结果 24h内小鼠无异常表现。从24小时后至第8天,剖杀的小鼠均能从肺、脑等不同的组织器官中分离到该株蜡样芽孢杆菌。药物敏感性试验通过滤纸片扩散法,结果表明该细菌对苯唑西林钠、庆大霉素、土霉素、多西环素、泰乐菌素、替米考星、氟苯尼考、克林霉素、恩诺沙星、诺氟沙星高度敏感,对头孢哌酮钠舒巴坦钠、头孢拉定钠、链霉素、卡那霉素中度敏感,对阿莫西林、氨苄西林、阿米卡星、林可霉素、粘菌素、磺胺嘧啶钠不敏感。细菌对消毒剂耐受性试验采用定性法,试验结果 11种防腐消毒药中仅2%氢氧化钠和3%双氧水对该菌有杀灭作用,其余9种防腐消毒药2%苯酚、2%戊二醛、1%漂白粉、0.5%过氧乙酸、75%酒精、0.1%高锰酸钾、10%鞣酸对该菌无杀灭作用。结论,从益生菌产品中分离获得的这株蜡样芽孢杆菌有一定的致病力,使用该产品有潜在的风险。
丁钊[10]（2018）在《冻干日本医蛭及日本医蛭种苗的质量标准研究》文中研究表明目的:冻干日本医蛭是一种经低温干燥得到的新型炮制品。本研究通过考察其质量、稳定性和安全性,研究其毒理和药效学,最终建立冻干日本医蛭质量标准,保证其质量和安全。同时,通过对日本医蛭卵茧和种苗进行研究,建立日本医蛭卵茧质量分级标准和种苗质量标准,有利于发展日本医蛭的生产,保证冻干日本医蛭具有可靠的资源供应,对中药材水蛭的长远发展具有深刻的意义。方法:1)通过一系列的适用性实验来建立冻干日本医蛭的微生物检测方法。2)通过考察温度、湿度和强光照射对冻干日本医蛭的影响,以及加速试验来确定包装和贮藏条件。3)通过最大耐受量试验（MTD）来考察用量的安全性,通过对小鼠出血时间和凝血时间的影响及大鼠急性血瘀模型来考察药效。4)通过性状和薄层色谱法鉴别,通过对水分、总灰分、酸不溶性灰分、酸碱度、重金属及有害元素、黄曲霉素、微生物进行限量来控制和抗凝血酶活性测定控制冻干日本医蛭质量,建立质量标准。5)通过对日本医蛭卵茧重量、长宽、出苗率、孵化率进行研究,确立卵茧质量分级标准。6)通过对各周龄日本医蛭种苗的形态、重量、长短、活力进行研究,起草种苗质量标准。结果:1)冻干日本医蛭基本无抑菌作用,接种5种阳性实验菌株的回收比值均在0.52.0之间,因此可采用平皿法（常规法,每皿1mL）进行微生物计数。2)冻干日本医蛭在高温、高湿、强光等条件下,抗凝血酶活性均明显下降;在加速试验中,冻干日本医蛭的抗凝血酶活性呈缓慢下降趋势,第6个月抗凝血酶活性仍高于200U/g。3)最大耐受量试验剂量为26.4g生药/kg,是药典规定最大用量的58倍,小鼠未出现死亡及不良反应;冻干日本医蛭可明显延长小鼠的BT和CT,延长急性血瘀证大鼠的PT、TT、APTT,有较强的抗凝血作用;可抑制大鼠血小板聚集,降低大鼠全血黏度;但对Fibg和血浆黏度无明显作用。4)冻干日本医蛭的性状能反应日本医蛭的动物鉴别特征;供试品薄层色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的紫红色斑点,紫外光灯（365nm）下显相同的橙红色荧光斑点;增加了微生物检测项,含量、水分、总灰分、酸不溶性灰分、酸碱度、黄曲霉素等限量均在药典的基础上高。5)选择重量作为日本医蛭卵茧分级的依据,一级卵茧重量在0.08g0.16g之间,孵化率为90%,出苗率6.78尾/枚。6)规定了各周龄日本医蛭种苗的形态特征和在体长、重量、活力等方面存在的差异,其中实线苗比虚线苗生长缓慢。结论:日本医蛭具有较高的抗凝血酶活性,但传统的晒、烫等加工炮制方法会破坏日其有效成分水蛭素;此外,水蛭药材没有包装、随意放置,容易感染黄曲霉菌和其它微生物。与传统加工炮制品相比,冻干日本医蛭的抗凝血酶活性有极大提高。因此,建立冻干日本医蛭的质量标准,在确保其真实性和抗凝血活性的同时,在冷藏条件下,采用药用低密度聚乙烯袋作为直接接触药材的内包装材料,外套药用包装用聚酯/铝/聚乙烯复合膜袋,小剂量密封包装的方法可以杜绝在流通和储存环节污染黄曲霉素和其它微生物的可能性,既提高了水蛭药材的生物效价又提高了药材商品的安全性。本研究通过对日本医蛭卵茧重量、出苗率、孵化率进行研究,制定了卵茧质量分级标准;通过对各周龄日本医蛭种苗的形态、长度、重量、活力进行研究,起草了日本医蛭种苗质量标准。日本医蛭卵茧质量分级标准可以保证卵茧质量,日本医蛭种苗质量标准可以保证种苗质量,这对提供可靠种苗,大力发展日本医蛭的人工养殖,缓解水蛭药材市场资源紧缺有着重大意义。
二、药用水蛭的人工养殖技术（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、药用水蛭的人工养殖技术（论文提纲范文）
（1）基于三代高通量测序技术的不同养殖环境下日本医蛭微生物多样性研究（论文提纲范文）
| 1 材料 |
| 1.1 样品 |
| 1.2 试剂与仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 样本采集及处理方法 |
| 2.2 微生物总DNA提取及聚合酶链式反应（PCR）扩增 |
| 2.3 数据优化及统计分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 微生物群落多样性分析 |
| 3.2 日本医蛭肌肉及肠道样本的细菌群落结构 |
| 4 讨论 |
（2）菲牛蛭体成分和养殖技术的研究进展（论文提纲范文）
| 1 菲牛蛭体营养成分 |
| 2 菲牛蛭的活性成分 |
| 2.1 水蛭素和菲牛蛭素 |
| 2.2 其他活性成分 |
| 3 菲牛蛭生长发育以及繁殖特性 |
| 3.1 菲牛蛭的生长发育特性 |
| 3.2 菲牛蛭的繁殖特性 |
| 4 菲牛蛭的人工养殖模式 |
| 5 菲牛蛭的养殖环境 |
| 6 菲牛蛭的饲养管理 |
| 7 菲牛蛭的人工饲料 |
| 7.1 人工饲料与动物血液 |
| 7.2 人工饲料与饲料原料 |
| 7.3 人工饲料与氨基酸添加 |
| 8 小结 |
（3）药用水蛭研究进展（论文提纲范文）
| 1 药用水蛭资源 |
| 2 药用水蛭的抗凝血活性物质 |
| 3 药用水蛭人工养殖研究 |
| 3.1 国内药用水蛭养殖状况 |
| 3.2 药用水蛭繁殖性能 |
| 3.3 药用水蛭人工养殖研究 |
| 4 建议 |
| 4.1 增加潜在的药用水蛭品种 |
| 4.2 饵料的研究 |
| 4.3 养殖技术的规范化与推广 |
| 5 结语 |
（4）宽体金线蛭研究进展（论文提纲范文）
| 1 宽体金线蛭的生物学特性 |
| 1.1 形态学特征 |
| 1.2 生活习性 |
| 1.3 繁殖习性 |
| 2 宽体金线蛭养殖技术 |
| 2.1 养殖模式 |
| 2.1.1 池塘养殖。 |
| 2.1.2 网箱养殖。 |
| 2.1.3 生态养殖。 |
| 2.2 养殖技术路线 |
| 2.2.1 宽体金线蛭的选择与放养。 |
| 2.2.2 日常管理。 |
| 2.2.2.1 投喂饵料。 |
| 2.2.2.2 防治疾病。 |
| 2.2.3 宽体金线蛭产卵孵化。 |
| 2.2.4 捕获宽体金线蛭。 |
| 2.2.5 宽体金线蛭加工方法。 |
| 3 水蛭素的分离与纯化 |
| 4 水蛭素活性测定 |
| 5 水蛭素的药理作用 |
| 5.1 抗凝、抗血栓 |
| 5.2 抗癌、抗肿瘤 |
| 5.3 抗细胞程序性死亡、保护眼 |
| 5.4 减轻脑出血、保护脑 |
| 5.5 抑制皮肤性瘢痕增生 |
| 5.6 其他作用 |
| 6 展望 |
（5）人工养殖水蛭技术及市场前景、社会经济效益浅析（论文提纲范文）
| 一、水蛭的生物学特性 |
| 二、水蛭养殖前景 |
| （一）市场分析 |
| （二）价格走向 |
| （三）社会经济效益 |
| 1. 促进水产业增效、农民增收 |
| 2. 推动中医药事业发展 |
| 3. 发展现代农业，增加农产品多样化 |
| 三、水蛭养殖模式技术 |
| （一）土地选择 |
| （二）养殖池建造 |
| 1. 挖沟 |
| 2. 筑埂 |
| （三）苗种 |
| 1. 苗种来源 |
| 2. 放苗 |
| （四）投饵及管理 |
| 1. 投饵 |
| 2. 日常管理 |
| （五）移栽水生植物和投放底栖动物 |
| 四、注意事项 |
| （一）选址 |
| （二）控温 |
（6）宽体金线蛭种蛭筛选、麻醉方法和饥饿胁迫的初步研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 水蛭药用品种的文献考察 |
| 2 水蛭的化学成分及药理活性 |
| 3 水蛭的人工养殖 |
| 3.1 水蛭的越冬研究 |
| 3.2 种蛭的选择与繁殖 |
| 3.3 幼蛭抚育 |
| 3.4 其他 |
| 4 水蛭与麻醉 |
| 4.1 常用的动物麻醉剂 |
| 4.2 实验动物麻醉的原则 |
| 4.3 水蛭的麻醉 |
| 5 水蛭与饥饿胁迫 |
| 6 本课题的研究内容和研究意义 |
| 参考文献 |
| 第二章 宽体金线蛭的群体考察、种蛭筛选与产茧后药材质量评价 |
| 1 前言 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要实验试剂和仪器 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 群体特征考察 |
| 3.2 宽体金线蛭的胚胎发育 |
| 3.3 种蛭筛选 |
| 3.4 水蛭药材质量评价 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 宽体金线蛭野生种群特征考察 |
| 4.2 宽体金线蛭的胚胎发育 |
| 4.3 体重对宽体金线蛭繁殖性能的影响 |
| 4.4 宽体金线蛭产茧前后药材的质量评价 |
| 5 实验讨论 |
| 5.1 宽体金线蛭种群考察与胚胎发育 |
| 5.2 宽体金线蛭的种蛭筛选原则 |
| 5.3 产茧对水蛭药材质量的影响 |
| 6 小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 宽体金线蛭麻醉方法的初步构建 |
| 1 前言 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要试剂和仪器 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 宽体金线蛭的实验室管理 |
| 3.2 Tricaine麻醉对宽体金线蛭的反应 |
| 3.3 不同浓度的Tricaine对宽体金线蛭麻醉的影响 |
| 3.4 不同体重的宽体金线蛭对Tricaine麻醉的影响 |
| 3.5 Tricaine对宽体金线蛭产茧的影响 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 不同浓度的Tricaine对宽体金线蛭麻醉效率的影响 |
| 4.2 体重对宽体金线蛭Tricaine麻醉的影响 |
| 4.3 Tricaine对宽体金线蛭产茧的影响 |
| 5 实验讨论 |
| 5.1 Tricaine对宽体金线蛭麻醉阶段的划分 |
| 5.2 麻醉浓度和体重对宽体金线蛭的影响 |
| 5.3 Tricaine麻醉对宽体金线蛭产茧的影响 |
| 5.4 宽体金线蛭的实验室管理 |
| 6 小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 基于RNA-seq转录组数据解析Tricaine麻醉对宽体金线蛭的影响 |
| 1 前言 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要试剂和仪器 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 样品制备 |
| 3.2 文库的构建、测序及数据处理 |
| 3.3 转录数据分析 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 转录组测序整体结果 |
| 4.2 差异基因表达分析 |
| 4.3 GO富集及KEGG富集分析 |
| 4.4 麻醉对离子通道的影响 |
| 5 实验讨论 |
| 6 小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 基于RNA-Seq转录组数据解析饥饿胁迫对宽体金线蛭的影响 |
| 1 前言 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要实验试剂和仪器 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 转录组测序整体结果 |
| 4.2 差异基因分析 |
| 4.3 GO富集和KEGG富集分析 |
| 4.4 饥饿胁迫过程中差异表达基因 |
| 5 实验讨论 |
| 5.1 显着差异表达基因的功能分析 |
| 5.2 饥饿胁迫下糖类、脂肪酸和氨基酸的互相转化 |
| 5.3 饥饿胁迫对防御因子与谷胱甘肽的影响 |
| 6 小结 |
| 参考文献 |
| 全文总结与展望 |
| 附录 |
| 作者简介及发表论文情况 |
| 致谢 |
（7）铅污染对水蛭及其抗凝血作用影响的代谢组学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 水蛭的养殖现状 |
| 2 水蛭药材重金属污染的研究进展 |
| 3 水蛭抗凝血活性的研究进展 |
| 4 血瘀证的研究进展 |
| 5 代谢组学的研究现状 |
| 6 总结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二章 立题依据与研究内容 |
| 1 立题依据 |
| 2 研究内容 |
| 3 技术路线图 |
| 第三章 铅污染水蛙的养殖 |
| 第一节 概述 |
| 第二节 铅污染水蛭的养殖 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 第三节 小结与讨论 |
| 第四章 铅污染水蛭对凝血功能和血液流变影响的研究 |
| 第一节 概述 |
| 第二节 不同处理组水蛭体外凝血功能实验 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 第三节 不同处理组水蛭对血瘀证大鼠凝血功能与血液流变学的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 第四节 铅对大鼠凝血功能的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 第五节 小结与讨论 |
| 第五章 水蛭组织代谢组学研究 |
| 第一节 概述 |
| 第二节 水蛭组织代谢组学研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 第三节 小结与讨论 |
| 第六章 铅污染水蛭干预急性血瘀模型大鼠血浆的代谢组学研究 |
| 第一节 概述 |
| 第二节 各组大鼠血浆的代谢组学研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 第三节 小结与讨论 |
| 第七章 总结与展望 |
| 1 研究结果 |
| 2 全文总结 |
| 3 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 个人简历 |
（8）宽体金线蛭庭院生态养殖的初步试验（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 养殖池的准备 |
| 1.2 苗种放养 |
| 1.3 养殖管理 |
| 1.3.1 水位调节 |
| 1.3.2 水质的调节 |
| 1.3.3 水温控制 |
| 1.3.4 投饲方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 不同养殖方式的水质变化 |
| 2.2 养殖效果比较 |
| 3 讨论 |
| 3.1 |
| 3.2 |
（9）一株蜡样芽孢杆菌对小鼠的致病力与抵抗力试验（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 细菌的分离与形态学观察 |
| 1.2.2 16S rRNA鉴定 |
| 1.2.3 细菌的致病力试验 |
| 1.2.4 细菌药敏试验 |
| 1.2.5 细菌对消毒剂的抵抗力试验 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 细菌的分离与形态学观察 |
| 2.2 16S rRNA鉴定 |
| 2.3 分离菌的药敏试验 |
| 2.4 细菌对小鼠的致病力 |
| 2.5 细菌对消毒剂的耐受力 |
| 3 讨论 |
（10）冻干日本医蛭及日本医蛭种苗的质量标准研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 冻干日本医蛭的质量标准研究 |
| 第一章 冻干日本医蛭微生物检测方法研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 培养基 |
| 1.3 菌种 |
| 1.4 供试品 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 菌液的制备 |
| 2.2 供试品溶液的制备 |
| 2.3 微生物计数方法适用性实验 |
| 2.4 控制菌检查方法适用性实验 |
| 2.5 样品检测 |
| 3 讨论 |
| 第二章 冻干日本医蛭稳定性研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 材料 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 高温试验 |
| 2.2 高湿试验 |
| 2.3 强光照射试验 |
| 2.4 加速试验 |
| 3 讨论 |
| 第三章 冻干日本医蛭急性毒性和药效学研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 1.1 受试物及对照品 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 试剂 |
| 1.4 仪器 |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 急性毒性实验 |
| 2.2 冻干日本医蛭药效学研究 |
| 3 讨论 |
| 第四章 冻干日本医蛭质量标准研究 |
| 1 仪器与材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 材料 |
| 2 来源与鉴别 |
| 2.1 来源 |
| 2.2 性状 |
| 2.3 鉴别 |
| 3 检查 |
| 3.1 水分限量标准的制定 |
| 3.2 灰分限量标准的制定 |
| 3.3 酸碱度限量标准的制定 |
| 3.4 重金属及有害元素限量标准的制定 |
| 3.5 黄曲霉毒素限量标准的制定 |
| 3.6 微生物限量标准的制定 |
| 4 含量测定 |
| 5 其它 |
| 6 小结 |
| 7 标准草案 |
| 第二部分 日本医蛭卵茧和种苗(人工繁育)的质量标准研究 |
| 第五章 日本医蛭卵茧(人工繁育)质量标准研究 |
| 1 范围 |
| 2 规范性引用文件 |
| 3 定义 |
| 3.1 中药材水蛭 |
| 3.2 日本医蛭 |
| 3.3 日本医蛭卵茧 |
| 3.4 卵茧批 |
| 4 来源 |
| 5 卵茧质量标准 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.2 重量 |
| 5.3 孵化率、出苗率 |
| 6 卵茧质量分级 |
| 7 分级方法及检验 |
| 8 标准草案 |
| 第六章 日本医蛭种苗(人工繁育)质量标准研究 |
| 1 范围 |
| 2 规范性引用文件 |
| 3 定义 |
| 3.1 中药材水蛭 |
| 3.2 日本医蛭 |
| 3.3 日本医蛭种苗 |
| 3.4 种苗批 |
| 3.5 青年蛭 |
| 4 来源 |
| 5 种苗质量标准 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.2 外观 |
| 5.3 可数指标 |
| 5.4 可量指标 |
| 6 常见病及诊断方法 |
| 6.1 白点病 |
| 6.2 肠胃病 |
| 6.3 干枯病 |
| 7 标准草案 |
| 附录A |
| 第七章 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 1 文献综述 |
| 参考文献 |
| 2 附图 |
| 3 研究生期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
四、药用水蛭的人工养殖技术（论文参考文献）
- [1]基于三代高通量测序技术的不同养殖环境下日本医蛭微生物多样性研究[J]. 柴晓昕,甘奇超,赵瑞亭,史景彦,郭平牯,袁渊,马莉. 中国现代中药, 2022(01)
- [2]菲牛蛭体成分和养殖技术的研究进展[J]. 陈琛,戚敏,杨秀娟. 饲料工业, 2021(20)
- [3]药用水蛭研究进展[J]. 余米,周梦,曹敏,封孝兰,曾德军,吴佳勇. 水产养殖, 2021(06)
- [4]宽体金线蛭研究进展[J]. 郑利,覃川杰. 安徽农业科学, 2020(20)
- [5]人工养殖水蛭技术及市场前景、社会经济效益浅析[J]. 孙德祥,郑高峰. 中国水产, 2020(07)
- [6]宽体金线蛭种蛭筛选、麻醉方法和饥饿胁迫的初步研究[D]. 李明玥. 北京协和医学院, 2020(05)
- [7]铅污染对水蛭及其抗凝血作用影响的代谢组学研究[D]. 罗雪梅. 北京中医药大学, 2020(04)
- [8]宽体金线蛭庭院生态养殖的初步试验[J]. 覃善恩,吕忠坚. 广西畜牧兽医, 2018(04)
- [9]一株蜡样芽孢杆菌对小鼠的致病力与抵抗力试验[J]. 李月丹,曾芸,谢德明,陶飞,李军. 广西畜牧兽医, 2018(04)
- [10]冻干日本医蛭及日本医蛭种苗的质量标准研究[D]. 丁钊. 湖北中医药大学, 2018(11)
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