No.2治疗小鼠免疫性不孕症的实验研究

一、免不2号治疗小鼠免疫性不育症的实验研究（论文文献综述）

杨凯^[1]（2020）在《曾庆琪教授辨治男性不育症的学术思想及润精汤治疗少弱精子症的临床和实验研究》文中研究表明目的本文首先对曾庆琪教授治疗男性不育症的学术思想和临证经验进行分析总结;在前期理论的基础上采用单盲、随机、阳性对照药物的临床研究方法初步探讨润精汤对特发性少弱精子症患者的临床有效性和安全性;然后在运用奥硝唑诱导建立的少弱精子症SD雄性大鼠模型的基础上,通过观察润精汤对少弱精子症模型大鼠精液质量、性激素水平、大鼠睾丸组织病理形态变化、睾丸组织细胞凋亡、睾丸波形蛋白表达和ERK信号通路表达的变化,初步探讨润精汤治疗少弱精子症的作用靶点和作用机制,为润精汤治疗特发性少弱精子症的临床应用提供科学依据。方法1.经验总结:对曾庆琪教授治疗男性不育症的学术思想和临证经验进行分析总结,从病因病机、辨病论治、诊断治法、方药配伍、优生助孕和预防调护等方面进行了详细论述。2.临床研究:采用单盲、随机、阳性对照药物的临床研究方法,将符合诊断标准和纳入标准的72例特发性少弱精子症患者随机分为试验组（润精汤）和对照组（还少胶囊）,每组36例,分别治疗3个月,记录两组患者治疗前后的精液质量（精液量、精子浓度、精子总数、精子前向运动百分率、精子总活动力）、性激素水平、中医症状评分、安全性指标和不良反应情况,评价润精汤的临床有效性和安全性。3.实验研究:将32只SD雄性大鼠采用单纯随机抽样方法分成四组,每组8只,分别为空白组、模型组、低剂量组和高剂量组。空白组予以生理盐水灌胃;模型组予以奥硝唑ORN（400mg/kg·d）灌胃;低剂量组予以润精汤（14g/kg）+奥硝唑ORN（400mg/kg·d）灌胃;高剂量组予以润精汤（56g/kg）+奥硝唑ORN（400mg/kg·d）灌胃,疗程四周。实验结束后,检测大鼠血清性激素指标（FSH、LH和T）、大鼠精液质量（精子浓度、精子前向运动百分率、精子总活动力和精子畸形率）,采用Western Blot和免疫组织化学法测定大鼠睾丸波形蛋白表达和睾丸ERK信号通路表达,采用TUNEL法检测大鼠睾丸组织细胞凋亡情况。结果1.临床研究:①试验组（润精汤）和对照组（还少胶囊）均能提高精液质量（精液量、精子浓度、精子总数、精子前向运动百分率、精子总活动力）、调节性激素水平和改善中医临床症状,从而提高患者配偶妊娠率和临床有效率,且试验组（润精汤）改善更为明显。②润精汤未见明显毒副作用及不良反应。2.实验研究:①精液质量:模型组大鼠精子浓度、精子总活动力、精子前向运动百分率低于空白组（P<0.05）,精子畸形率高于空白组（P<0.05）;低剂量组、高剂量组的精子总活动力高于模型组（P<0.05）,精子畸形率低于模型组（P<0.05）;低剂量组的浓度和精子前向运动百分率轻度高于模型组（P>0.05）;高剂量组的浓度和精子前向运动百分率高于模型组（P<0.05）。②性激素:各组黄体生成素（LH）无明显变化（P>0.05）;模型组卵泡刺激素（FSH）高于空白组（P<0.05）,低剂量组和高剂量组低于模型组（P<0.05）;模型组睾酮（T）低于空白组（P<0.05）,低剂量组和高剂量组高于模型组（P<0.05）。③睾丸组织病理形态变化:空白组大鼠睾丸组织中各曲细精管生精上皮形态规则、排列整齐和结构完整,生精小管管腔内可见各级分裂活跃、形态规则、排列整齐和结构完整的生精细胞和大量形态正常且成熟的精子。模型组大鼠睾丸组织中各曲细精管生精上皮形态紊乱、排列不整齐和结构松散,生精小管管腔内各级生精细胞排列紊乱,且大量减少,甚至脱落,精子和生精细胞数量明显减少,且形态明显异常,生精上皮部分变性可见大量空泡。低剂量组大鼠睾丸组织中各曲细精管生精上皮形态的规则性、排列的整齐性和结构的完整性较模型组有所改善,生精小管管腔内正常生精细胞数和形态正常且成熟的精子数较模型组也有所增加,脱落生精细胞数量有所减少。高剂量组大鼠睾丸组织病理形态结构较低剂量组进一步有所改善,接近于空白组。④睾丸组织细胞凋亡的变化:模型组生精小管管腔内可见大量生殖细胞凋亡,大鼠睾丸组织凋亡阳性细胞率明显高于空白组（P<0.01）。低剂量组和高剂量组生精小管管腔内可少量生殖细胞凋亡,低剂量组大鼠睾丸组织凋亡阳性细胞率明显低于模型组（P<0.05）,高剂量组大鼠睾丸组织凋亡阳性细胞率明显低于模型组（P<0.01）。⑤睾丸组织波形蛋白表达的变化:空白组睾丸组织波形蛋白主要分布于睾丸支持细胞的核周围,并且从基底区域向近腔小室延伸。模型组睾丸组织波形蛋白信号和分布范围与空白组比较明显减弱,波形蛋白表达量明显降低（P<0.001）。低剂量组和高剂量组的睾丸组织波形蛋白的主要分布从睾丸支持细胞的核周围区域向内腔延伸,并且波形蛋白在两组间分布也趋于正常,波形蛋白表达量明显高于模型组（P<0.01）。⑥睾丸组织ERK信号通路的变化:模型组大鼠睾丸组织p-ERK蛋白表达量明显高于空白组（P<0.001）;低剂量组和高剂量组大鼠的睾丸组织p-ERK蛋白表达量明显低于模型组（P<0.001）。结论1.润精汤是曾庆琪教授基于“精室理论”,根据精室的功能特点,总结出“通补并用”为核心的治疗法则,创制而成的治疗少弱精子症的经验方,药物组成有菟丝子、黄精、山药、枸杞、仙灵脾、水蛭、刺五加、红景天、陈皮、川牛膝,诸药具有“肝脾肾三脏兼顾、气血阴阳平调、补而不腻、通而不损”的特点,全方以补肾健脾为主,兼有补血养肝、活血通络、行气利湿的作用,本方治法较单补肾填精法或补肾活血法更为全面,更加符合当今大多数男性不育症的临床实际情况,尤其是对江南地区的患者更为适宜。2.润精汤和还少胶囊均能提高精液质量（精液量、精子浓度、精子总数、精子前向运动百分率、精子总活动力）、调节性激素水平和改善中医临床症状,从而提高患者配偶妊娠率和临床有效率,且润精汤改善更为明显。所以说润精汤是安全和有效的,且未见明显不良反应,有一定的临床推广价值。3.润精汤可以改善奥硝唑诱导的少弱精子症大鼠的精液质量、血清性激素和睾丸组织病理形态学变化,初步猜测可能与润精汤调控下丘脑-垂体-睾丸性腺轴,调节生殖内分泌激素的水平,改善睾丸微循环和精子生成的局部微环境有关;此外润精汤可上调睾丸波形蛋白的表达和下降p-ERK的表达,提高生殖细胞结构的稳定性和抑制大鼠生殖细胞的凋亡,促进生殖细胞增殖等,其作用机理可能与抗氧化应激有关。

邓宇飞^[2]（2019）在《针药结合治疗肾虚血瘀型男性不育症临床疗效观察》文中进行了进一步梳理目的:观察针药结合、益肾活血方、针刺对肾虚血瘀型男性不育症患者精液参数、性激素水平的影响,探讨针药结合、针刺、益肾活血方治疗男性不育的疗效及疗效差异。方法:本研究共收集肾虚血瘀型不育症患者60例,病例均来自广州中医药大学第一附属医院生殖医学科、男科门诊,就诊时间为2018年04月起至2019年01月。将60例患者随机分为三组:中药组、针刺组、针药组,各20人。中药组口服益肾活血方;针刺组予针刺,刺激量以中等强度患者耐受为宜,留针20分钟,1周1次;针药组同时口服益肾活血方,并配合针刺治疗,方案参照中药组、针刺组,共治疗90天。其中拒绝治疗者共10例,中药组1例,针刺组5例,针药组4例。最后中药组19例,针刺组15例,针药组16例,共50例纳入统计分析。观察治疗前、治疗3月后三组精液参数、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）的变化。结果:1.治疗前三组基线比较:三组治疗前年龄、病程、禁欲天数、精子浓度、精子总数、正常形态精子百分率、前向运动精子百分率（PR）、非前向运动精子百分率（NP）、不动精子百分率（IM）、FSH水平、LH水平、T水平比较均无显着性差异（p>0.05）。2.有效率:组间比较差异无统计学意义（p>0.05）。3.精液参数组内比较:中药组、针药组治疗3个月后精子浓度、精子总数、精子活力（前向运动精子百分率PR）、正常形态精子百分率均较治疗前明显升高,差异有统计学意义（p<0.05）;针刺组治疗3个月后精子活力PR较治疗前显着升高,差异有统计学意义（p<0.05）,针刺组精子浓度、总数、正常形态精子百分率较治疗前有升高趋势,但差异无统计学意义（p>0.05）。三组精子活力（IM）治疗后较治疗前明显下降,差异有统计学意义（p<0.05）,精子活力（NP）前后变化差异无统计学意义（p>0.05）。组间比较:针药组与中药组,针药组与针刺组,精子活力PR、IM变化幅度比较,差异均有统计学意义（p<0.05）;三组间精子浓度、精子总数、NP、正常形态精子百分率变化幅度比较,差异无统计学意义（p>0.05）。4.性激素水平组内比较:中药组、针刺组、针药组治疗后FSH、LH、T有升高趋势,前后比较差异无统计学意义（p>0.05）。组间比较:三组FSH、LH、T变化幅度比较无统计学意义（p>0.05）。5.安全性评价:研究期间,无患者发生不良反应。结论:针药结合在提高前向运动精子百分率（PR）、降低不动精子百分率（IM）方面优于单纯的针刺或中药治疗。针药结合、益肾活血方可以改善肾虚血瘀型不育症患者的精子浓度、精子活力（PR）、正常形态精子百分率,针刺可以改善精子活力（PR）,针药结合、益肾活血方、针刺治疗有效率之间差异无统计学意义。

盛文^[3]（2018）在《益肾健脾方治疗男性少弱精子症的实验和临床研究》文中认为第一部分益肾健脾方治疗少弱精子症的实验研究目的:本研究是利用具有生殖毒性的雷公藤多苷制备的少弱精子症小鼠模型为观察对象,治疗组予以益肾健脾方进行造模后干预治疗,而对照组（东维力组或称左卡尼汀组）予以目前较为公认的西药左卡尼汀口服液治疗,通过对治疗后实验小鼠精液常规、线粒体膜电位以及线粒体通透性转换孔等指标的检测,从不同的层次以及不同的角度来观察益肾健脾方对雷公藤多苷制备的小鼠少弱精子症的改善效果,运用现代科研理念来证实益肾健脾方对男性少弱精子症的改善效果,在实验数据上支持益肾健脾方对少弱精子症的治疗效果,为中医“益肾健脾法”治疗男性少弱精子症提供事实依据,为未来男性少弱精子症的治疗提供新的思路与方法,也为进一步的研究提供前期基础。方法:50只雄性白色BALB/c种属正常小鼠,每只小鼠体重约18-20g,适应性喂养5天后,随机分为5组,分别为正常组、模型组、对照组（东维力组或称左卡尼汀组）、中药低剂量组以及中药高剂量组。动物模型的制备:用去离子水配置后的雷公藤多苷悬浊液以8ml/kg/d量灌胃,每lml雷公藤多苷悬浊液中含雷公藤多苷5mg,约相当于人体用量的40倍,模型组、对照组（东维力组或称左卡尼汀组）、中药低剂量组以及中药高剂量组每只小鼠每天10时给予8ml/kg/d的雷公藤多苷悬浊液灌胃,为期30天;模型制备后,正常组:每日10时给予8ml/kg/d的去离子水灌胃,为期30天;模型组:每日10时给予8ml/kg/d的去离子水灌胃,为期30天;对照组（东维力组或称左卡尼汀组）:每日10时给予8ml/kg/d的左卡尼汀口服液灌胃,为期30天;中药低剂量组:每日10时给予1.35g/kg/d的益肾健脾方中药灌胃,为期30天;中药高剂量组:每日10时给予2.70g/kg/d的益肾健脾方中药灌胃,为期30天。本实验期间,每周对小鼠进行1次称重,然后根据小鼠体重的增加来调整每组小鼠的给药剂量,给药量按药理实验方法学计算。30天的药物干预过程结束后处死实验小鼠,采集实验小鼠的精液,应用精液活力测试仪器检测小鼠精液活力;应用流式细胞仪以及荧光染色法检测小鼠精子线粒体膜电位的变化;应用流式细胞仪和荧光染色法检测小鼠精子线粒体通透性转换孔变化。结果:1小鼠的精液质量对照组（东维力组或称左卡尼汀组）、中药低剂量组以及中药高剂量组的A级精子百分率、A+B级精子百分率、精子总活力百分率以及精子浓度（叁×106/ml）较正常组有一定的差异,且差异具有统计学意义（P<0.05）;对照组（东维力组或称左卡尼汀组）、中药低剂量组以及中药高剂量组对比模型组,A级精子百分率、A+B级精子百分率、精子总活力百分率以及精子浓度（×106/ml）有明显升高,差异明显,具有统计学意义（P<0.05）;中药低剂量组以及中药高剂量组对比对照组（东维力组或称左卡尼汀组）,A级精子百分率、A+B级精子百分率、精子总活力百分率以及精子浓度（×106/ml）有明显升高,差异明显,具有统计学意义（P<0.05）;中药低剂量组对比中药高剂量组,差异不明显。2小鼠精子线粒体膜电位对照组（东维力组或称左卡尼汀组）、中药低剂量组以及中药高剂量组的小鼠精子线粒体膜电位较正常组有明显下降,差异明显,具有统计学意义（P<0.05）;对照组（东维力组或称左卡尼汀组）、中药低剂量组以及中药高剂量组的小鼠精子线粒体膜电位较模型组有明显升高,差异明显,具有统计学意义（P<0.05）;中药高剂量组以及中药低剂量组的小鼠精子线粒体膜电位较对照组（东维力组或称左卡尼汀组）有明显升高,差异明显,具有统计学意义（P<0.05）;中药高剂量组的小鼠精子线粒体膜电位对比中药低剂量组小鼠精子线粒体膜电位有明显升高,差异明显,具有统计学意义（P<0.05）。3小鼠精子线粒体通透性转换孔对照组（东维力组或称左卡尼汀组）、中药低剂量组以及中药高剂量组的小鼠精子线粒体通透性转换孔较正常组有明显下降,差异明显,具有统计学意义（P<0.05）;中药高剂量组、中药低剂量组、对照组（东维力组或称左卡尼汀组）的小鼠精子线粒体通透性转换孔较模型组有明显升高,差异明显,具有统计学意义（P<0.05）;中药高剂量组以及中药低剂量组的小鼠精子线粒体通透性转换孔较对照组（东维力组或称左卡尼汀组）有明显升高,差异明显,具有统计学意义（P<0.05）;中药高剂量组的小鼠精子线粒体通透性转换孔较中药低剂量组有明显升高,差异明显,具有统计学意义（P<0.05）。结论:1益肾健脾方能降低雷公藤多苷对小鼠精子线粒体膜电位损害,从而提高小鼠精子线粒体膜电位水平;2益肾健脾方能降低雷公藤多苷对小鼠精子线粒体通透性转换孔的损害,从而改善小鼠精子线粒体通透性转换孔通透性;3益肾健脾方能降低雷公藤多苷对小鼠精液活力的损害,从而提升小鼠精液的质量。第二部分益肾健脾方治疗少弱精子症的临床研究目的:本临床研究是以临床男性少弱精子症患者为研究对象,通过检测治疗前后精液常规的各个指标的改善效果,来观察益肾健脾方对男性少弱精子症的治疗效果。从临床的角度来观察益肾健脾方的治疗效果,与实验研究相结合,为将来少弱精子证型男性不育症的治疗提供新的思路。方法:本临床研究采用前后自身对照研究,观察周期为90天,病例观察数为32例,服用药物为东直门医院国际部药房提供的益肾健脾方颗粒药物,在治疗前后对患者各自进行一次精液常规检测,统计分析精液常规中A级精子活力、（A+B）级精子活力、精子总活力以及精子浓度等指标。每30天对所有患者进行一次随访,并询问患者配偶的怀孕情况,对临床疗效做出评价。结果:经治疗后,对所有参加研究的32例患者精液常规进行检测,经分析,治疗后患者的A级精子活力、（A+B）级精子活力、精子总活力以及精子浓度较治疗前有明显的提高,差异具有统计学意义（P值<0.01）;本研究中共收集有效病例32例,根据临床疗效评价标准,治愈5例（15.6%）,显效8例（25.0%）,有效13例（40.6%）,无效6例（18.8%）,总有效率为（81.3%）。结论:益肾健脾方能明显改善脾肾亏虚型少弱精子症患者的精液质量。

刘茜,武松,王望九,鲍鑫,杜华荣^[4]（2012）在《免疫性不育阴虚证小鼠模型造模方法研究》文中研究说明目的:建立免疫性不育阴虚证小鼠模型。方法:昆明小鼠90只,雌雄各半,于第1、15、29、36、43、50天先后注射精子-完全佐剂,精子-不完全佐剂。第1、2次注射精子密度130×106/mL,以后每次注射精子密度为50×106/mL,注射部位分别为前后足掌、背部正中、背部多点、左右腹股沟。第1、2次注射0.3mL,以后每次注射0.2mL。第4450天给小鼠按照320mg/（kg.d）灌胃甲状腺片混悬液,连续灌胃7天。结果:有84只昆明小鼠出现明显的怕热、多汗、神经过敏、急躁、震颤、皮毛光泽度差、饮水量减少等阴虚的现象。而其中有79个样本经检测AsAb吸光度/正常对照组≥2.1,即为AsAb（+）。说明在90只昆明小鼠中,有79只进行免疫性不育阴虚证造模成功。结论:免疫性不育阴虚证小鼠模型的成功制备对临床研究和中医药治疗免疫性不育症疾病等起到了重要的作用。

李国锋,侯进,宾彬^[5]（2009）在《男性不育中医药治疗的实验研究概述》文中研究表明就近10年的文献资料,综述了中医药治疗男性不育症的实验研究概况。文献主要从生精障碍、精液质量异常,精子形态结构改变和内分泌失调等方面的动物实验,探讨了中医药治疗男性不育症的机理,为临床用药提供了动物实验依据,但同时表明,由于男性不育症的病因病理复杂,动物模型的建立较为困难,人与动物的种属差异等因素,我们要完全认识和治疗本病,尚需深入开展动物实验研究和临床基础研究。

金冠羽,卢太坤^[6]（2005）在《中医药治疗男性免疫性不育症的临床与实验研究述略》文中研究指明

王望九,产美英,李笑梅,陈永华,汤明礼,孔梅,胡德宝,戴宁,黄震,李唯^[7]（2004）在《免疫方治疗免疫性不育小鼠的实验研究》文中研究说明目的:研究中药免不方治疗抗精子抗体引起的免疫性不育症作用机理。方法:用精子抗原免疫昆明种小鼠、大鼠,建立免疫性不育动物模型,从分子,细胞,组织学,整体水平观察中药复方免不1号,免不2号治疗免疫性不育症的机理和疗效。结果:免疫性不育症鼠血清、精囊液、宫颈粘液抗精子抗体高,免不方能明显降低鼠血清、精囊液、和宫颈粘液抗精子抗体,且停药后抗体反跳幅度小。免不方能明显清除睾丸、副睾、卵巢抗原抗体复合物的沉积,较西药组疗效明显;免不方能明显提高小鼠睾丸每曲细精管精子细胞数,疗效优于西药组（P<0.05,P<0.01）。免不方明显提高动物的妊娠率,每胎仔数明显高于模型组及西药组（P<0.01）。结论:免不方通过调节全身免疫系统,吸收,清除循环和局部抗精子抗体,免疫复合物,降低和修复组织损伤,从而提高鼠的妊娠。

骆庆峰^[8]（2003）在《生殖免疫的方药调节研究》文中进行了进一步梳理本课题总结过敏康II号胶囊临床治疗男性免疫性不育病例，分析过敏康II号胶囊对精子运动参数的影响，通过建立男性免疫性不育的动物模型，并观察过敏康II号胶囊对模型的治疗作用，初步探讨过敏康II号胶囊治疗男性免疫性不育的作用机理。本论文分为文献综述、临床实验室研究和实验研究三个部分。1 文献综述1.1 男性免疫性不育研究概况1.1.1 西医研究本病的发病原因是：由于各种原因，体内产生了针对精子的抗体，从而影响精子的正常功能，导致男性不育。临床诊断以不育男性的血清和（或）精浆中发现抗精子抗体（AsAb）为准。抗精子抗体主要有三种：IgA，IgG，IgM。AsAb导致不育的原因：1)AsAb具有凝集作用，影响精子的运动能力；2)AsAb具有细胞毒效应，影响精子的存活；3)AsAb干扰精子的代谢活动；4)AsAb影响精子获能和顶体反应；5)AsAb封闭顶体膜上的抗原位点，抑制精子对透明带的附着与穿透；6)AsAb对精子膜脂流动性的影响；7)AsAb影响胚胎发育。西医治疗主要采用免疫抑制治疗和辅助生殖技术。1.1. 2祖国医学对男性免疫性不育的认识 男性免疫性不育是一种自身免疫性疾病，在中医古文献中无相似的病名记载，现多数学者将其归属中医“不育”范畴。病因病机多因先天禀赋不足，或后天失调，湿热蕴结，精室受扰，影响生殖之精，故致不育。中医发挥自身优势在治疗男性免疫性不育方面做了大量的研究，也取得了很好的疗效。临床治疗方案中，既有辨证施治，亦有专病专方和其他疗法等。2 临床临床实验室研究采用过敏康II号胶囊治疗42例AsAb阳性患者，其中痊愈14例（33.33%），好转21例，无效7例，总有效率83.33 %。精子的活跃运动是精子独有的生物学特征，以前评估男性生育力的实验室参数主要依据精液常规检查，在分析精子功能和受精潜能方面提供的信息有限。本次观察采用计算机辅助精液分析技术对精液进行详尽分析，在中医药治疗本病的疗效观察中，尚属首次。在对精液分析的12个参数治疗前后值进行统计学对比时发现，治疗前，患者平均精液量、液化时间及精子密度属于正常，表明患者生精功能正常，而精子活率、精子活力以及精子多项运动参数降低，显示精子本身的功能状态下降，妨碍了受精过程的发生，由此，推测AsAb导致不育的主要机制之一可能为降低精子的活动能力，影响正常的精卵结合。过敏康II号胶囊可明显增加患者的精子密度（P＜0.05）、精子活率（P＜0.01）、精子活力（P＜0.01）；同时过敏康II号胶囊亦可显着改善精子运动参数，提高精子直线速度（P＜0.01）、曲线速度（P＜0.01）、平均路径速度（P＜0.05）、精子直线运动率（P＜0.05）、直线运动精子活率（P＜0.01）、前向性（P＜0.05）、侧摆幅度（P＜0.05）；结果表明，过敏康II号胶囊可消除由抗精子抗体所引起的精子凝集现象，减少抗精子抗体对生殖活动的不良影响；改善精子数量、质量，提高精子运动能力，进而达到患者治疗不育症的目的。<WP=4>3 实验研究3.1对正常动物免疫功能的影响取NIH雄鼠，按体重随机分为5组，正常组、对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组，每组各12只。每日通过灌胃给药，持续10天，于末次灌药后次日摘眼球放血处死。本实验主要观察过敏康II号胶囊对正常小鼠体重及免疫器官影响，于处死前称量小鼠体重，将小鼠摘眼球放血处死后，摘取小鼠的胸腺、脾脏，称重，计算胸腺指数和脾指数。与正常组相比，中药及西药用药组动物胸腺指数、脾指数均低于正常组，由此推测过敏康II号胶囊可抑制正常小鼠免疫器官的生长，妨碍正常免疫器官功能，进而缓解过敏性疾病的症状。而醋酸泼尼松免疫抑制效果虽然不错，但其副作用很大，动物灌服醋酸泼尼松能明显降低动物的体重，显示醋酸泼尼松可抑制动物的正常生长发育。3.2 对免疫性不育动物模型的影响免疫性不育模型建立本实验造模方法参照赖安妮、宋济范等方法进行。取常规检查正常的人精液40份，2000转离心30min，弃精浆，精子用生理盐水洗涤5次，然后加入0.5％NP-40，震摇2h，15000转离心20分钟，取上清液加生理盐水，4°C透析，适当浓缩后，行考马斯亮蓝法测定蛋白浓度。用上述提取的精子膜抗原伴Freund完全佐剂，对小鼠进行腹腔免疫，每只小鼠注射抗原量为100μg，2周后用不完全Freund佐剂抗原加强免疫1次，每只小鼠注射抗原量为150μg，隔1周后以精子生理盐水抗原再加强免疫1次，每只小鼠注射抗原量为150μg。过敏康对免疫性不育模型鼠的治疗作用及其机理的初步探讨：分组与给药3.2.1 分组取NIH雄鼠，分为7组（正常组、佐剂组、模型组、对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组）造模第一天开始灌胃给药，每天一次，直至第30天。所有雄性小鼠与正常雌性小鼠按1︰2比例合笼2周，雌性小鼠再饲养5天后处死，剖腹观察雌鼠子宫着床点数，计算孕鼠平均着床点数。雄鼠于合笼2周后处死，进行实验。对照组所给药物为醋酸泼尼松片，高剂量组、中剂量组、低剂量组：所给药物为过敏康II号胶囊；3.2.3 检测指标；1)血清特异性抗体的测定2)对小鼠免疫器官影响3)孕鼠平均着床点数观察4)小鼠行为学观察5)?

丘勇超^[9]（2002）在《中医药治疗男性免疫性不育症的临床与实验研究述评》文中研究表明 免疫性不育分两大类,即男性产生的抗精子自身免疫/或由女性产生抗精子同种免疫引起的不育。在减数分裂后期精子会表达表面抗原,而机体内的免疫细胞将它们视为外来抗原,并启动自身免疫反应。机体通过Sertoli细胞形成的血睾屏障和其它免疫调节机制来阻止此类反应的发生。如果血睾屏障的完整性受到破坏（如感染、创伤等）,就会产生抗精子抗体（AsAb）。AsAb可以减弱精子的活动,

王望九,产美英,黄震,汤明礼,李笑梅,陈永华,胡德宝,戴宁,梁文珍,孔梅^[10]（2002）在《免不1号对雌性小鼠免疫性不孕症的实验研究》文中认为目的 :为了研究中药免不 1号治疗免疫性不孕症作用机理。方法 :用精子抗原免疫昆明种雌小鼠 ,建立免疫不孕症动物模型 ,饲喂中药复方免不 1号 ,观察抗精子抗体指标、组织学指标、免疫细胞化学指标和妊娠指标。结果 :免不 1号能降低卵巢免疫复合物沉积 ;免不 1号能明显降低小白鼠血清抗精子抗体 ,且停药后抗体反跳幅度小 ;免不 1号明显提高动物的妊娠 ,每胎仔数明显高于模型组 （P <0 0 5 ）及西药组 （P <0 0 5或P <0 0 1）。结论 :免不 1号可能通过清除卵巢免疫复合物沉积 ,降低免疫复合物对组织的损伤 ,并降低血清 ,宫颈黏液AsAb ,有利于提高小鼠的妊娠。

二、免不2号治疗小鼠免疫性不育症的实验研究（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、免不2号治疗小鼠免疫性不育症的实验研究（论文提纲范文）

（1）曾庆琪教授辨治男性不育症的学术思想及润精汤治疗少弱精子症的临床和实验研究（论文提纲范文）

（2）针药结合治疗肾虚血瘀型男性不育症临床疗效观察（论文提纲范文）

（3）益肾健脾方治疗男性少弱精子症的实验和临床研究（论文提纲范文）

（4）免疫性不育阴虚证小鼠模型造模方法研究（论文提纲范文）

（5）男性不育中医药治疗的实验研究概述（论文提纲范文）

（6）中医药治疗男性免疫性不育症的临床与实验研究述略（论文提纲范文）

（8）生殖免疫的方药调节研究（论文提纲范文）

（10）免不1号对雌性小鼠免疫性不孕症的实验研究（论文提纲范文）

四、免不2号治疗小鼠免疫性不育症的实验研究（论文参考文献）

• [1]曾庆琪教授辨治男性不育症的学术思想及润精汤治疗少弱精子症的临床和实验研究[D]. 杨凯. 南京中医药大学, 2020
• [2]针药结合治疗肾虚血瘀型男性不育症临床疗效观察[D]. 邓宇飞. 广州中医药大学, 2019(03)
• [3]益肾健脾方治疗男性少弱精子症的实验和临床研究[D]. 盛文. 北京中医药大学, 2018(10)
• [4]免疫性不育阴虚证小鼠模型造模方法研究[J]. 刘茜,武松,王望九,鲍鑫,杜华荣. 辽宁中医药大学学报, 2012(04)
• [5]男性不育中医药治疗的实验研究概述[J]. 李国锋,侯进,宾彬. 辽宁中医药大学学报, 2009(04)
• [6]中医药治疗男性免疫性不育症的临床与实验研究述略[J]. 金冠羽,卢太坤. 实用中西医结合临床, 2005(05)
• [7]免疫方治疗免疫性不育小鼠的实验研究[A]. 王望九,产美英,李笑梅,陈永华,汤明礼,孔梅,胡德宝,戴宁,黄震,李唯. 全国中西医结合基础理论学术研讨会论文集, 2004
• [8]生殖免疫的方药调节研究[D]. 骆庆峰. 北京中医药大学, 2003(02)
• [9]中医药治疗男性免疫性不育症的临床与实验研究述评[J]. 丘勇超. 中医药通报, 2002(06)
• [10]免不1号对雌性小鼠免疫性不孕症的实验研究[J]. 王望九,产美英,黄震,汤明礼,李笑梅,陈永华,胡德宝,戴宁,梁文珍,孔梅. 中国中医基础医学杂志, 2002(09)

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