一、灵芝颗粒剂的药效学研究(论文文献综述)
郑一泳[1](2018)在《中西医结合治疗儿童注意力缺陷障碍伴多动症文献研究及Meta分析》文中研究表明注意力缺陷多动障碍(ADHD)是一种行为表现与其年龄不相适应的、以注意障碍、多动和冲动行为为特征的心理行为疾病。ADHD常合并其他疾病,如对立违抗障碍、品行障碍、人格障碍、焦虑障碍、心境障碍和物质依赖等。该疾病易于导致患儿学习困难、成绩差,与家庭成员和同龄儿童关系紧张、缺少自尊,患儿长到成年人后容易有低职业、低收入、物质滥用、反社会等人格特点。目前,全球ADHD患病率为1.2%—7.3%,男女比例约3—9:1。我国7项调查荟萃分析结果表明,学龄前儿童ADHD患病率为4.31%—5.83%,估计全国有儿童ADHD 患者 1461—1979 万。注意力缺陷多动障碍(ADHD)是儿童时期常见的一种行为障碍性疾病.ADHD不仅对儿童生长发育及心理健康带来不良影响,也给家庭和社会带来伤害[1]。治疗方面有药物治疗、行动治疗、心理治疗、父母培训等多样疗法。ADHD的病因和发病机制至今未明。目前大多数学者认为,该病并非由某单一因素引起,而是一组由于生物学性因素、心理因素及社会因素等多重综合作用引起的综合征,具体的发病原因较为复杂。西医治疗方式可分为两个大类,即药物治疗和非药物治疗。其中药物治疗大致有中枢兴奋性药物(Methylphenidate)系列和非中枢兴奋剂(Atomoxetine)系列;非药物治疗则大致分为心理治疗和神经医学治疗。心理治疗有多样的方法,比如,父母训练、美术治疗、音乐治疗、认知行为治疗、运动治疗等;还有神经医学方面的治疗有生物反馈(biofeedback)发展过程中形成的神经反馈(neurofeedback)治疗。而中医治疗法当中,中医药治疗、针灸治疗、推拿治疗作为其代表,此外还有靠着中国固有的长处和特点来可治ADHD的疗法有药膳疗法(饮食治疗)、音乐治疗(五音疗法)、美术治疗(书法疗法)、运动疗法(太极拳)等。其中最普遍的疗法为西医的药物治疗[2],现在ADHD患者大部分使用西医的药物治疗。西药治疗ADHD虽然反应快、疗效明显,但是其疗效不是在每个患儿都表明出来的,且还会带来失眠、头疼、胃疼等副作用[3]。而中医药治疗ADHD相对于西药治疗有较好的疗效,并且副作用也不多。随着中国经济的成熟与发展,中国医学的发展速度也越来越快。同时,世界对中医东方医学的关心也越来越多。中医是滥觞于阴阳哲学的学问,同时基于数千年临床经验成立的,在此可以考虑运用中医辨证论来治疗ADHD的优点。中医对辨证论治神经疾病方面已有明显的疗效。比如,ADHD、健忘症、多发性抽动症、失眠症等。系统评价中药治疗注意力缺陷多动障碍(ADHD)的临床疗效和安全性。方法:检索中国知网(CNKI)、中国科技期刊数据库(VIP)、万方学位及会议论文数据库、SinoMed、PubMed、Cochrane图书馆等数据库,检索截止日期到2018年2月,由两名评价者独立提取资料并参照Cochrane系统评价手册进行方法学质量评价,采用RevMan 5.3软件进行数据分析。结果:共纳入30个RCTs。研究结果显示中药与西药在临床总有效率方面比较,差异具有统计学意义(RR 1.27,95%CI 1.20,1.34,I2=60%,n=24),在Conners多动指数变化方面尚没有统计学差异。中药联合西药与西药比较,临床总有效率差异具有统计学意义(RR 1.18,95%CI1.09,1.28,I2=53%,n=6),同时可促进Conners多动指数降低,疗效的评分差异有统计学意义(MD-6.78,95%CI,-8.67,-4.89,n=2)。发表偏倚分析提示纳入研究的文献存在发表偏倚风险的可能,纳入文献整体研究质量偏低。结论:中药治疗ADHD在临床总有效率、多动指数评分方面具有特色和优势,治疗的临床辨证分型整体可归纳为以“肝肾阴虚、肝阳偏旺为主。整体用药以滋阴清热、平肝益肾及滋阴潜阳为法,关于中药治疗ADHD的疗效和安全性评价有待开展设计严格、结局指标报告规范的大样本临床试验进一步验证。近年来中医对ADHD方面研究更加深入。因此,本论文通过中医治疗法和西医治疗法的比较研究,兼取中西医治疗两者的优点的同时,取其精华,去其糟柏,同时研究中医固有的ADHD治疗法而ADHD患儿和家人能够享受优质治疗法的未来。
庞淑婉[2](2016)在《黄丹兰颗粒剂毒性、抗癌作用及制剂质量控制研究》文中指出目的:通过黄丹兰颗粒剂对小鼠的急性毒性和大鼠的长期毒性试验研究,考察对试验动物有无毒性;建立小鼠Hca-F肝癌模型,观察黄丹兰颗粒剂对Hca-F荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用;采用高效液相色谱法测定黄丹兰颗粒剂中苦参碱和氧化苦参碱含量,以建立黄丹兰颗粒剂的质量控制方法。方法:1.小鼠急性毒性试验即将黄丹兰颗粒剂配成混悬液,以每毫升相当于0.4g颗粒剂的剂量通过灌注的方式送到小鼠胃中,持续一个星期的观察,同时记录小鼠体重的波动情况,评价试验小鼠的精神、食欲、肤色、分泌物、眼、呼吸、肌肉运动等方面变化。2.大鼠长期毒性试验是将黄丹兰颗粒剂溶于水中,配置成三种不同浓度:0.4g/(kg·d)、1.04 g/(kg·d)、2.83 g/(kg·d)的混悬液,并依次标明为低剂量、中剂量以及高剂量,并通过灌注的方式将其送到大鼠胃内,按照1次/天的标准持续灌注一个月,在此期间检查和统计大鼠的血液学指标,比如凝血时间、红细胞数量、白细胞数量、血小板数量、血红蛋白含量、白细胞分类等,除此之外还要观察和统计尿常规、血液生化指标、各脏器、睾丸或子宫的情况,采用病理学方法对这些组织进行检测。3.该药物对实验性肝癌Hca-F荷瘤小鼠模型的影响通过小鼠肝癌Hca-F小鼠细胞株注射造模,观察黄丹兰颗粒剂对肝癌Hca-F荷瘤小鼠抑瘤率、对荷瘤小鼠免疫器官指数的影响以及Hca-F荷瘤小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验作为观察指标,探讨黄丹兰颗粒剂对Hca-F荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用及机制;通过对荷瘤小鼠血清中IL-2和VEGF表达水平的测定考察黄丹兰颗粒剂对荷瘤小鼠免疫功能的影响以及黄丹兰颗粒剂抗癌作用的有效性。4.采用TIANHE?Kromasil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为磷酸盐缓冲液(pH=3.0)-甲醇(93:7),流速为0.8 ml·min-1,柱温为35℃,检测波长为220 nm的HPLC法测定黄丹兰颗粒剂中苦参碱和氧化苦参碱含量。结果:1.小鼠急性毒性试验结果表明,实施药物治疗后,小鼠的普通行为、反射行为、对食物和水的需求、大小便等都没有出现任何异常。2.大鼠长期毒性试验结果表明,服用不同剂量的黄丹兰颗粒剂后,大鼠体重上升幅度以及行为均保持正常,并且各项针对血液、尿液、器官组织的检查结果也表明基本和对照组一致。组织病理学检查结果表明,接受药物治疗的大鼠的脏器都没有出现毒性病理改变。3.黄丹兰颗粒剂对小鼠Hca-F肝癌模型的影响的试验结果显示,黄丹兰颗粒剂能抑制肝癌Hca-F荷瘤小鼠肿瘤的生长,以高剂量更明显;并且黄丹兰颗粒剂在一定程度上能够提高荷瘤小鼠的免疫功能。4.苦参碱进样浓度在2.5μg/ml25.0μg/ml范围内呈良好线性关系,平均加样回收率为99.99%,RSD=0.0577%(n=6);氧化苦参碱进样浓度在2.0μg/ml20.0μg/ml范围内呈线性关系,加样回收率的平均值为99.78%,RSD=0.4432%(n=6)。结论:1.黄丹兰颗粒剂安全无毒性。2.黄丹兰颗粒剂能够抑制小鼠Hca-F肝癌模型的肿瘤的生长,提高荷瘤小鼠免疫功能。3.HPLC法简便、准确,可作为黄丹兰颗粒剂的质量控制方法。
巩丽[3](2015)在《外源茉莉酸甲酯通过ROS影响灵芝菌丝生长、次级代谢和NO信号途径的机理研究》文中提出灵芝(Ganoderma lucidum)是着名的大型药用真菌,具有极高的营养价值和保健价值,在我国和东南亚国家有着悠久的应用历史。灵芝三萜类化合物是灵芝的主要药用成分之一,具有抗氧化、抗病毒、降血压和抗肿瘤等活性。灵芝三萜含量的多少是目前衡量灵芝质量高低的重要指标。茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)被认为是一种信号分子,能诱导许多植物的生理反应。近几年研究发现茉莉酸甲酯能够诱导灵芝中灵芝三萜(ganodericacid)的合成。然而,由于灵芝的生理特殊性及其遗传操作体系尚未完善等因素,导致有关如何诱导灵芝三萜生物合成的机理研究较少。本研究中我们发现MeJA不仅能够提高灵芝三萜含量,同时也能够影响菌丝生长,使菌丝分叉之间的距离提高1.2倍。进一步研究发现,MeJA能够显着提高胞内ROS(reactive oxygen species)以及NO含量,同时由于MeJA的添加而导致的灵芝三萜含量、菌丝生长以及菌丝分叉的变化会随着ROS清除剂的添加回复到对照水平甚至更低,基于该现象的基础,推测MeJA对灵芝三萜、菌丝生长以及菌丝分叉的调节很可能通过ROS信号途径。进一步的研究发现NADPH氧化酶(Nox)作为产生ROS的主要酶类,在MeJA诱导ROS积累过程中起重要作用,该结果证实了 Nox在MeJA信号与ROS信号之间发挥重要作用。本研究为探讨真菌中ROS信号网络与MeJA信号之间的关系提供一个较好的依据,也证实了真菌与植物一样共同拥有保守的信号交换机制。此外,本实验研究也发现外源添加MeJA能够诱导胞内NO积累,初步推测了灵芝中NO的合成途径,也初步探讨了 MeJA诱导产生的ROS信号和NO信号途径之间存在怎样复杂的相互关系。
杜芃[4](2014)在《丹杞茸颗粒剂毒性、药效学及制剂质量控制研究》文中认为目的:通过丹杞茸颗粒剂对小鼠的急性毒性和大鼠的长期毒性试验研究,考察对试验动物有无毒性;通过试验动物急性肾损伤模型,观察丹杞茸颗粒剂对肾损伤的预防与治疗作用;采用分光光度法测定丹杞茸颗粒剂中甜菜碱含量,以建立丹杞茸颗粒剂的质量控制方法。方法:小鼠急性毒性试验即将丹杞茸颗粒剂原粉配成混悬液,以相当于0.5g/mL生药的剂量给予小鼠一天3次灌胃后,观察1周,在此期间内记录小鼠体重,观察摄食、饮水及排便情况;大鼠长期毒性试验即将丹杞茸颗粒剂原粉配成混悬液,分别以低剂量[0.6g/(kg·d)],和高剂量[3g/(kg-d)]给予大鼠灌胃,每周7天,连续3个月,观察大鼠的血液学指标(包括凝血时间、红细胞、白细胞、血小板计数、白细胞分类和血红蛋白含量),尿常规,血液生化指标(AST、ALT、UREA、肌酐、总胆固醇)及各脏器(心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、睾丸或卵巢)情况并进行组织病理学检查;丹杞茸颗粒剂对急性试验性大鼠肾损伤模型的影响即用大剂量皮下注射庆大霉素导致大鼠急性肾损伤造成的肾损伤大鼠,观察各组血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)的变化;另观察各组尿蛋白、葡萄糖、酮体的变化及肾组织的病理改变。采用U3310紫外可见分光光度计,测定丹杞茸颗粒剂中甜菜碱含量。结果:小鼠急性毒性试验结果显示,给药后小鼠的外表行动,反射活动,饮水量,大、小便情况均正常。大鼠长期毒性试验结果显示,与空白对照组相比,高低剂量丹杞茸颗粒剂对大鼠体重增长和一般行为活动无明显影响;两组大鼠的血液学、尿常规及血液生化学等指标无明显变化。给药组大鼠各主要脏器指数均与对照组动物无明显差异。组织病理学检查结果显示各组动物主要脏器均无毒性病理性改变。丹杞茸颗粒剂对急性试验性大鼠肾损伤模型的影响的试验结果显示,所建立的急性肾损伤模型血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量较空白对照组同指标相比有显着性差异(P<0.05或P<0.01);尿中尿蛋白、葡萄糖、酮体含量较空白对照组同指标相比有显着性差异(P<0.05或P<0.01)。丹杞茸颗粒剂组的相同指标与空白对照组均无显着差异(P>0.05)。丹杞茸颗粒剂能明显降低庆大霉素诱发急性肾损伤大鼠的肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、尿蛋白、葡萄糖、酮体含量,还能明显增加血清总蛋白和白蛋白含量。减轻了由GM导致的肾脏病理损伤。采用分光光度法测定丹杞茸颗粒剂中甜菜碱含量时,甜菜碱在0.1~1.2 mg/mL范围内有良好的线性关系,80%、100%、120%的量甜菜碱的加样回收率分别为100.09%、101.16%和99.87;RSD分别为 1.15%、1.28%和 0.92%。结论:灌胃给药无法测出丹杞茸颗粒剂的半数致死量(LD50),提示该药使用安全。丹杞茸颗粒剂以相当于临床用量50倍的剂量给予大鼠口服灌胃3个月,未产生明显毒性反应,而且具有良好改善大鼠急性肾损伤模型的肾脏损害和血液流变状态的作用。使用分光光度法测法定丹杞茸颗粒剂中甜菜碱含量,该方法简便、准确,可作为丹杞茸颗粒剂的质量控制方法。
李宏[5](2014)在《芪杞参颗粒剂毒性、药效学及制剂质量控制研究》文中指出目的:通过芪杞参颗粒剂对小鼠的急性毒性和大鼠的长期毒性实验研究,考(?)其对实验动物有无毒性;通过研究芪杞参颗粒剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、NK细胞活性以及脏器系数的影响等,观察芪杞参颗粒剂对小鼠细胞免疫和体液免疫功能的影响;采用高效液相色谱法测定芪杞参颗粒剂中人参皂苷Rb1含量,以建立芪杞参颗粒剂的质量控制方法。方法:小鼠急性毒性实验即将芪杞参颗粒剂原粉配成混悬液,以相当于0.5g/mL生药的剂量给予小鼠灌胃一次,连续观察1周,在此期间内记录小鼠一般情况,包括体重、摄食、饮水及排便等情况;大鼠长期毒性实验即将芪杞参颗粒剂原粉配成混悬液,分别以低剂量[0.5g/(kg·d)],中剂量[1.32g/(kg·d)]和高剂量[2.36g/(kg·d)]给予大鼠灌胃,每周7天,连续1个月,观察大鼠的血液学指标(包括凝血时间、红细胞、白细胞、血小板计数、白细胞分类和血红蛋白含量),尿常规,血液生化指标(AST、ALT、UREA、肌酐、总胆固醇)及各脏器(心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、睾丸或卵巢)情况并进行组织病理学检查;芪杞参颗粒剂对小鼠细胞免疫和体液免疫功能的影响即用6周龄昆明种小鼠分空白对照组、芪杞参颗粒剂高、中、低剂量组,小鼠腹腔注射鸡红细胞混悬液,观察芪杞参颗粒剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;制备绵羊红细胞(SRBC),观察血球凝集程度,测定血清溶血素;以靶细胞(YAC-1细胞)与脾细胞(效应细胞)的反应检测芪杞参颗粒剂对小鼠自然杀伤(NK)细胞活性的影响;采用淋巴细胞转化法观察芪杞参颗粒剂对细胞免疫功能的影响;计算小鼠胸腺质量/体质量及脾脏质量/体质量为脏器系数,观察芪杞参颗粒剂对小鼠免疫脏器重量的影响。采用KromasilC18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈与水的比例为30:70,柱温:40℃,流速:1.0mL/min,检测波长:203 nm,灵敏度:0.01AUFS,进样量20μL。结果:小鼠急性毒性实验结果显示,给药后小鼠的外表行动,反射活动,饮水量,大、小便情况均未见异常。大鼠长期毒性实验结果显示,与空白对照组相比,3个剂量芪杞参颗粒剂对大鼠体重增长和一般行为活动均无明显影响;3组大鼠的血液学、尿常规及血液生化学等指标亦无明显变化。给药组大鼠各主要脏器指数均与对照组动物无明显差异。组织病理学检查结果显示各组动物主要脏器均无病理形态学改变。与对照组比较,芪杞参颗粒剂显着增加小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能(P<0.05);对小鼠体液免疫功能有一定的增强作用;可增强小鼠NK细胞活性(P<0.05);对刀豆蛋白(Con)A诱导下的小鼠淋巴细胞转化有增强作用(P<0.01);对脏器系数没有显着的影响。人参皂苷Rb1在2.5~25mg/L范围内呈现良好的线性关系,80%、100%、120%的量人参皂苷Rbl的加样回收率分别为 100.41%、100.33%和 99.59%;RSD 分别为 0.32%、0.20%和 0.18%。结论:灌胃给药无法测出芪杞参颗粒剂的半数致死量(LD50),提示该药使用安全。芪杞参颗粒剂以相当于临床用量50倍的剂量给予大鼠口服灌胃1个月,未产生明显毒性反应,而且芪杞参颗粒剂具有明显的免疫上调作用,预示有良好的应用前景。采用HPLC法测定芪杞参颗粒剂中人参皂苷Rb1含量,方法简便、准确,可作为芪杞参颗粒剂的质量控制方法。
芦志伟[6](2012)在《肾康宁胶囊毒性、药效学及质量控制研究》文中研究说明目的:观察肾康宁胶囊对小鼠急性和对大鼠长期毒性作用。探讨肾康宁胶囊对庆大霉素(GM)致大鼠肾脏损伤时肾功能以及血、尿中相关指标的影响。采用高效液相色谱法测定肾康宁胶囊中黄芪甲苷的含量,以建立肾康宁胶囊的质量控制方法。方法:1.小鼠急性毒性试验:将肾康宁胶囊制成0.25g/mL的混悬液,每次按0.4ml/10g体重给小鼠灌服,一日内给药3次,每次间隔6h,按3次服用总量计算最大耐受量。给药后连续观察7d,记录动物反应情况和体重;大鼠长期毒性试验:将肾康宁胶囊配成浓度分别为1.6g/(kg.d)和5g/(kg.d)溶液,给予大鼠灌胃2mL/100g体重,3次/日,连续3个月,观察大鼠的血液学指标,包括(凝血时间,红细胞,白细胞,血小板计数和白细胞分类,血红蛋白含量)、尿常规、血液生化学,包括AST,ALT,BUN,肌酐,葡萄糖,总胆固醇含量等指标的变化,并观察各脏器(心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、睾丸或卵巢)情况及进行组织病理学检查。2.药效学方面则采用100mg/kg皮下注射庆大霉素导致大鼠急性肾损伤模型,给予肾康宁胶囊高(324g/L)、低(108g/L)剂量混悬液灌胃,3次/日,设模型组和空白对照组共为4组。治疗28d,观察各组大鼠血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)的变化;另观察各组尿蛋白、葡萄糖、酮体的变化及肾组织的病理学改变。3.采用HPLC法测定肾康宁胶囊中黄芪甲苷的含量,色谱柱:TIANHE(?)C18柱(200mm×4.6mm,5u m);流动相:流动相:甲醇:四氢呋喃:0.2%三乙胺水溶液(90:4:6);流速0.8mL·min-1;检测波长230nm;柱温30℃;进样量20μL结果:小鼠急性毒性试验结果显示,给药后第一天小鼠行走时间和举前足次数减少,其它方面未见异常,第二天后小鼠自主活动,进食等均正常,无一死亡,计算最大耐受量相当于人用剂量(按每日服用量12g计算)的125倍。大鼠长期毒性试验结果显示,与空白对照组相比,灌服肾康宁胶囊1.6和5g/(kg.d)的两高剂量组大鼠行为活动及体重增长正常,血液学、血液生化学、主要脏器重量、尿常规等各项指标均无显着性差异。各组动物器官组织均未见明显毒性病理性变化。药效学方面,高、低剂量的肾康宁胶囊均能显着降低由庆大霉素导致的急性肾损伤大鼠尿中蛋白总量、尿糖及酮体,恢复尿液pH,与对照组比较无显着差异(P>0.05);显着降低肾损伤模型大鼠BUN、Cr含量,与对照组比较无显着差异(P>0.05);显着提高肾损伤模型大鼠血清总蛋白、白蛋白总量(P<0.05)。同时低剂量组对大鼠肾损伤时脏器外观出现的肥大以及不同程度的渗出血,皮质与髓质间出现红斑等症状有所改善,而高剂量组几乎看不到上述现象。黄芪甲苷在0.1031~1.2372mg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.99983),线性方程:Y=521559.44C-1356.36,平均回收率(n=9)为99.82%,RSD=0.29%,样品平均含量0.3524mg/粒,RSD=0.96%。结论:肾康宁胶囊1.6和5g/(kg.d)连续口服灌胃3个月,对大鼠体重、尿常规、血液学指标、血液生化指标及组织病理学无明显影响;给予相当于临床剂量125倍的肾康宁胶囊对小鼠未产生急性毒性反应,说明肾康宁胶囊基本无毒性。在药效上,肾康宁胶囊能有效减少庆大霉素致急性肾损伤大鼠的Cr、BUN水平,从而抑制高尿酸血症的形成,减少尿酸盐对肾脏的损害。肾康宁胶囊还可减少肾损伤大鼠肾小球对蛋白、血糖的滤过性,减少肾小球的高灌注,修复受损组织,使血浆蛋白水平趋于正常。本文所采用的HPLC检测方法是先将黄芪甲苷进行苯甲酰化反应,然后以TIANHE(?) Kromasil C18柱(4.6×250mm,51μm)为固定相;甲醇:四氢呋喃:0.2%三乙胺水溶液(90:4:6)为流动相,在230nm波长处检测黄芪甲苷含量。该方法简便、准确,可作为肾康宁胶囊的质量控制方法。
魏晓霞[7](2011)在《灵芝三萜组分GLA的抗肿瘤及对急性肝损伤保护作用的研究》文中研究指明目的通过体内外实验,评价灵芝三萜组分GLA的抗肿瘤活性,研究其对酒精和四氯化碳引起的急性肝损伤模型的保护作用,探讨其可能的作用机制,为进一步筛选研究灵芝中抗肿瘤及保肝的有效成分提供有效的依据。方法(1)采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法体外检测GLA对多种肿瘤细胞株的生长抑制作用。(2)采用AO-EB染色法观察GLA对HL60细胞凋亡的影响。(3)建立小鼠H22肝癌移植瘤模型、小鼠S180肉瘤移植瘤模型和人结肠癌Colon26裸小鼠移植瘤模型,评价GLA的体内抗肿瘤活性。(4)应用Western blot法检测GLA对HL60细胞中相关蛋白表达的影响。(5)建立由H2O2诱导人正常肝细胞(L02)损伤,检测肝细胞上清液ALT,AST水平。(6)建立由酒精和CCl4引起的小鼠急性肝损伤模型,取血清测定其中ALT,AST和取肝匀浆测定SOD,MDA水平,并通过HE染色对其肝脏组织进行病理观察。结果(1) GLA对人肝癌细胞株SMMC-7721、人早幼粒白血病细胞株HL60和人Burkitt淋巴瘤细胞株CA46有较强抑制作用,IC50分别为为0.50 mg/ml,0.52 mg/ml,0.53 mg/ml,对人肝癌细胞株HepG2、人结肠癌细胞株SW480、人慢性粒细胞白血病细胞株K562和人胃癌细胞株SGC-7901也有一定的抑制作用,IC50分别为0.70 mg/ml,0.82 mg/ml,0.85 mg/ml和0.97mg/ml,对人肺腺癌细胞株SPCA-1和人恶性神经母细胞瘤株SH-SY5Y基本无抑制作用。(2)AO/EB染色法表明GLA可诱导HL60细胞凋亡。(3)体内实验表明,GLA在高剂量2 g/kg下对小鼠H22肝癌细胞、小鼠S180肉瘤细胞及裸小鼠Colon26结肠癌细胞生长有一定抑制作用,其抑瘤率分别为65.6%,50.1%和46.5%。(4) GLA导致HL60细胞中的Hsp70蛋白表达降低,而且随着药物浓度的升高,蛋白表达逐渐减弱;Akt蛋白表达量降低,且随着药物作用浓度的增高,蛋白表达逐渐减弱。(5)与模型组比较,不同浓度的GLA对H2O2致L02细胞损伤有一定的保护作用,高浓度和中浓度GLA呈显着性差异。(6)在由酒精引起的小鼠急性酒精性肝损伤模型实验中,模型组与空白对照组比较血清ALT,AST活性显着升高,肝组织SOD含量明显降低及丙二醛含量明显增高,表明酒精性急性肝损伤模型复制成功。与模型组相比,GLA各剂量组血清ALT、AST水平均有降低趋势,且高剂量组具有显着性差异,肝组织MDA明显降低,而SOD明显增高,且呈剂量依赖关系,说明GLA具有一定的抗氧化作用;而在由CCl4引起的小鼠急性化学性肝损伤模型实验中,模型组与空白对照组比较,血清ALT及AST均明显增高、肝组织SOD含量明显降低及丙二醛含量明显增高,表明小鼠急性肝损伤实验动物模型建立成功。GLA高、中剂量组与模型组相比,血清ALT、AST明显降低,GLA可明显降低肝损伤小鼠肝组织丙二醛含量,提高肝组织SOD的活性。通过病理观察,与模型组相比较各给药组病理变化显着改善。结论体内外试验均表明灵芝三萜组分GLA有较强的抗肿瘤作用,并对急性肝损伤有一定的保护作用。
滕宝松[8](2012)在《灵芝有效降糖组分的筛选及降血糖机理研究》文中指出[目的]传统中医即以灵芝为重要配伍组份用于内分泌、代谢紊乱相关疾病的治疗。本文以蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)为靶点从灵芝子实体中筛选具有有效降血糖效果的PTP1B抑制剂,并对该抑制剂进行理化性质及降血糖机理的研究。[方法]利用醇提、水提和碱提等手段结合醇沉、凝胶柱层析等技术从灵芝子实体中筛选有效降血糖组分;利用高效液相色谱,红外光谱,核磁共振光谱对提取物进行纯度和组成表征;利用分析单糖组成、氨基酸组成、多糖含量、蛋白含量等,建立这些参数与对PTP1B抑制能力的相关性,并研究对PTP1B抑制的动力学;利用链脲霉素(STZ)诱导2型糖尿病小鼠及大鼠,db/db基因型2型糖尿病小鼠对有效降糖提取物进行药效学研究,并与现用临床一线西药二甲双胍及罗格列酮相对照;同时进行了有效提取物的初步急性安全性试验;利用western blotting技术,免疫沉淀技术分析STZ致糖尿病大鼠及基因糖尿病小鼠给药前后肝和骨骼肌组织中PTP1B表达水平和活性的变化及胰岛素受体p亚基(IRβ)磷酸化水平的变化,从而分析有效降糖提取物在体内的降血糖机理;另外,用酶标仪、荧光光谱等研究提取物对a-葡萄糖苷酶、a-淀粉酶、自由基等抑制能力和动力学;此外,用试剂盒分析与糖尿病有关的代谢性疾病的体内血液生化指标。[结果]从灵芝中筛选出7种对PTP1B有抑制效果的组分,其中抑制最有效的组分IC50=5.12±0.05μm/mL,将该组分命名为FYGL;对FYGL组成分析表明,FYGL为分子量2.6×105的蛋白多糖,其中蛋白与多糖含量比为17:77。多糖部分主要由葡聚糖组成,蛋白部分含有19种常见氨基酸;对PTP1B抑制动力学分析表明,FYGL对PTP1B的抑制呈竞争性抑制,即与PTP1B的底物竞争相同的活性位点。动物药效学试验证明,FYGL能显着降低STZ致2型糖尿病模型小鼠及大鼠的血糖,并呈剂量和时间依赖性,且与二甲双胍及罗格列酮相当;同样,db/db基因型糖尿病小鼠药效学实验证明,FYGL亦显着降低小鼠血糖,且与临床一线西药相当;初步急性安全性试验表明,小鼠半致死量LD50=6g/kg,安全性很高;药理学试验证明,对于STZ致糖尿病大鼠,FYGL能降低骨骼肌PTP1B的表达水平和活性,进而调控IRp亚基的磷酸化水平;对于db/db基因型糖尿病小鼠,FYGL能显着降低肝脏和骨骼肌PTP1B的表达水平,降低骨骼肌PTP1B的活性,增加肝脏和骨骼肌IRp亚基的磷酸化水平。此外,STZ致糖尿病大鼠试验表明,FYGL不仅能显着降低血糖,而且能增加血清胰岛素浓度,降低胰岛素抵抗指数,增加胰岛素分泌指数,提示FYGL可能有修复胰岛细胞的功能;FYGL亦能降低db/db小鼠胰岛素抵抗指数,但不能促进胰岛素的分泌。另外,FYGL对a-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶、自由基等亦有抑制能力,对α-葡萄糖苷酶亦呈竞争性抑制机理,提示FYGL可能具有多靶点降糖作用功能。同时,FYGL能有效改善STZ致2型糖尿病大鼠及db/db小鼠中与代谢紊乱综合症相关的血脂生化指标,如自由脂肪酸(FFA)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。[结论]FYGL有显着降低血糖能力,与临床一线西药二甲双胍及罗格列酮相当,且安全性高,其降血糖机理是通过降低体内肝脏和骨骼肌PTP1B表达水平,降低骨骼肌PTP1B活性,进而调控胰岛素受体p亚基的磷酸化水平,同时降低胰岛素抵抗指数。另外,FYGL可能具有多靶点降糖作用功能,同时改善与糖尿病代谢紊乱综合症相关的血脂生化指标。FYGL是一种新型胰岛素增敏剂,有望成为糖尿病治疗的候选新药。
温远珍[9](2011)在《基于标准汤剂指纹图谱评价的肝脂消颗粒剂药学研究》文中指出肝脂消颗粒是由绵茵陈、山楂、黄精、灵芝、丹参、法半夏等10味中药组成的复方制剂,具有降脂、护肝的功效,主要用于治疗脂肪肝,在临床已使用多年,经数千例患者使用,药效得到充分肯定。本论文在对文献资料研究的基础上,根据各药味中所含有效成分和标准汤剂指纹图谱研究的情况,参考相同药物在其他中成药制剂中的提取工艺,分别提取各味药物的有效成分,并对各部分药物提取的最佳工艺条件进行优化,从而确定科学合理的提取、制备工艺。采用TLC和HPLC等现代分析技术,建立了制剂的质量标准考察方法,拟定了制剂的质量标准,为今后的新药研究提供实验依据。在提取工艺方面,考察了各药味采用不同提取方法对标准汤剂指纹图谱的影响,从而确定了醇提与水提两部分,并分别采用L9(34)正交试验优选肝脂消颗粒的提取工艺。结果优选的最佳醇提工艺为:丹参、灵芝、决明子加8倍量70%乙醇,加热回流提取3次,每次1.5h;得到醇提液的指纹图谱色谱峰,基本都是标准汤剂的特征峰。最佳水提工艺为:滤渣与其余绵茵陈等七味加8倍量水加热回流提取两次,每次1.5h;得到水提液的指纹图谱与标准汤剂指纹图谱相似。在浓缩、干燥工艺方面,分别考察不同浓缩温度对醇提液与水提液指标成分的含量和指纹图谱的影响。结果醇提液在60℃下浓缩,含量与浓缩前相比保留率较高,且指纹图谱浓缩前后基本一致;水提液在在80℃下浓缩,含量与浓缩前相比保留率较高,且指纹图谱浓缩前后基本一致。采用了减压干燥与微波干燥两种方式对指标成分的含量和指纹图谱的影响,结果采用微波干燥成分保留率较高,且指纹图谱与标准汤剂相似。在成型工艺方面,考察了辅料的种类和用量、润湿剂的种类,并对成品的休止角、水分、溶解性、临界相对湿度进行测定,并对成品指标成分的含量和指纹图谱进行测定。结果优选的辅料为:可溶性淀粉:微晶纤维素=2:3;用90%乙醇作润湿剂;测得休止角为24.78°;水分、溶解性、临界相对湿度符合规定;指标成分的含量为;指纹图谱与标准煎剂相似。在质量标准方面,采用薄层层析法(TLC),对制剂中的绵茵陈、灵芝2味药材进行了薄层鉴别,斑点清晰,专属性强;采用HPLC法对制剂中君药绵茵陈、山楂中所含绿原酸、臣药丹参中的丹酚酸B为指标,测定样品中绿原酸和丹酚酸B的含量,以甲醇-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱)为流动相;柱温:30℃;检测波长:丹酚酸B为286nm、绿原酸为327nm;流速:1.0mL.min-1:进样量:10μL。结果绿原酸的线性回归方程为Y=3433582.99X-3105.54,r=0.9999,表明:绿原酸在0.0226~0.4520μg范围内进样量与峰面积有良好的线性关系,平均加样回收率为97.5%,RSD为2.5%。丹酚酸B的线性回归方程为Y=930920.90X-12208.93,r=0.9999,表明:丹酚酸B在0.0943~1.8857μg范围内进样量与峰面积有良好的线性关系,平均加样回收率为97.0%,RSD为1.5%。建立了制剂中绿原酸、丹酚酸B的含量测定方法,测定了3批样品中绿原酸、丹酚酸B的含量范围,每袋(10g)绿原酸、丹酚酸B的含量分别在10.48~10.60mg.94.92~96.68mg之间。建立了肝脂消颗粒HPLC指纹图谱分析方法,采用RP-HPLC法,色谱柱为Phenomenex Synergi 4μm Hydro-RP 80A;流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱);检测波长为280nm;流速1.0mL/min:柱温为30℃。结果肝脂消颗粒共标出17个共有峰。研究结果表明:该制剂制备工艺合理可行,质量标准可控。
高森[10](2010)在《参花通脉胶囊毒性、药效学及制剂质量控制研究》文中指出目的:通过参花通脉胶囊对小鼠的急性毒性和大鼠的长期毒性试验研究,考察对试验动物有无毒性;通过试验动物急性血瘀模型,观察参花通脉胶囊对微循环障碍的预防与治疗作用;采用高效液相色谱法测定参花通脉胶囊中丹参素钠含量,以建立参花通脉胶囊的质量控制方法。方法:小鼠急性毒性试验即将参花通脉胶囊原粉配成混悬液,以相当于0.333g/mL生药的剂量给予小鼠灌胃,连续1周,在此期间内记录小鼠体重,观察摄食、饮水及排便情况;大鼠长期毒性试验即将参花通脉胶囊原粉配成混悬液,分别以低剂量[0.33g/(kg-d)],中剂量[0.87g/(kg·d)]和高剂量[2.36g/(kg·d)]给予大鼠灌胃,每周7天,连续1个月,观察大鼠的血液学指标(包括凝血时间、红细胞、白细胞、血小板计数、白细胞分类和血红蛋白含量),尿常规,血液生化指标(AST、 ALT、UREA、肌酐、总胆固醇)及各脏器(心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、睾丸或卵巢)情况并进行组织病理学检查;参花通脉胶囊对急性试验性大鼠血瘀模型的影响即用肾上腺素+冰水应激造成的血瘀大鼠,观察参花通脉胶囊对耳廓血流灌注量、脑顶血流灌注量和肠系膜血流灌注量等微循环变化指标;对全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、纤维蛋白原的影响,分析全血还原粘度以及红细胞聚集指数、红细胞变形指数、红细胞刚性指数、红细胞电泳指数等指标。采用TIANHE C18(200mm X4.6,5u m)色谱柱;甲醇-0.15%冰醋酸溶液(10:90)为流动相;流速0.8mL·min-1;检测波长280nm,柱温为室温。结果:小鼠急性毒性试验结果显示,给药后小鼠的外表行动,反射活动,饮水量,大、小便情况均正常。大鼠长期毒性试验结果显示,与空白对照组相比,三剂量参花通脉胶囊对大鼠体重增长和一般行为活动无明显影响;三组大鼠的血液学、尿常规及血液生化学等指标无明显变化。给药组大鼠各主要脏器指数均与对照组动物无明显差异。组织病理学检查结果显示各组动物主要脏器均无毒性病理性改变。参花通脉胶囊对急性试验性大鼠血瘀模型的影响的试验结果显示,所建立的急性血瘀模型对耳廓血流灌注量、脑顶血流灌注量和肠系膜血流灌注量等微循环指标均明显升高(P<0.01);所建立的急性血瘀模型的全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、纤维蛋白原等指标均明显升高(P<0.01)。参花通脉胶囊能改善这种血瘀模型所致的耳廓血流灌注量、脑顶血流灌注量和肠系膜血流灌注量等微循环变化指标明显得到改善,以高剂量更明显;全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、纤维蛋白原增高等情况,以高剂量更明显。丹参素钠进样量在2.5-25mg/L范围内呈现良好的线性关系,平均加样回收率为99.71%,RSD为0.81%(n=6)。结论:灌胃给药无法测出参花通脉胶囊的半数致死量(LDso),提示该药使用安全。参花通脉胶囊以相当于临床用量50倍的剂量给予大鼠口服灌胃1个月,未产生明显毒性反应,而且具有良好改善大鼠急性血瘀模型的微循环和血液流变状态的作用,该HPLC法简便、准确,可作为参花通脉胶囊的质量控制方法。
二、灵芝颗粒剂的药效学研究(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、灵芝颗粒剂的药效学研究(论文提纲范文)
(1)中西医结合治疗儿童注意力缺陷障碍伴多动症文献研究及Meta分析(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
前言 |
第一部分 儿童注意力缺陷多动症的文献综述 |
1 ADHD研究现况 |
1.1 ADHD定义 |
1.2 ADHD研究演变 |
1.3 ADHD临床表现 |
1.4 诊断标准 |
2 ADHD的病因病机研究 |
2.1 现代病因病机 |
2.2 中医病因病机 |
3 ADHD的治疗方法 |
3.1 药物治疗ADHD |
3.2 非药物治疗ADHD |
3.3 中医治疗ADHD |
参考文献 |
第二部分 中药治疗注意力缺陷多动障碍的系统评价与META分析 |
1 研究方法 |
1.1 文献检索 |
1.2 纳入标准 |
1.3 文献筛选及资料提取 |
1.4 RCT方法学质量评价 |
1.5 数据分析 |
2 结果 |
2.1 文献检索与筛选 |
2.2 纳入研究的基本特征 |
2.3 纳入文献质量评价 |
2.4 疗效及安全性分析结果 |
3 讨论 |
4 结论 |
参考文献 |
附件 |
附件1: 西医诊断标准(DSM-5) |
附件2: 中医诊断标准(中医儿科常见病诊疗指南·注意力缺陷多动障碍) |
附件3: 中医证候评分表 |
附件4: 行为量表 |
附件5: 综合疗效评价 |
致谢 |
个人简介 |
(2)黄丹兰颗粒剂毒性、抗癌作用及制剂质量控制研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
缩略语 |
前言 |
研究现状、成果 |
研究目的、方法 |
一、黄丹兰颗粒剂的毒性实验研究 |
1.1 黄丹兰颗粒剂对试验动物的急性毒性试验研究 |
1.1.1 对象和方法 |
1.1.2 结果 |
1.1.3 讨论 |
1.1.4 小结 |
1.2 黄丹兰颗粒剂对大鼠的长期毒性试验研究 |
1.2.1 对象和方法 |
1.2.2 结果 |
1.2.3 讨论 |
1.2.4 小结 |
二、黄丹兰颗粒剂抗癌作用研究 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 动物和试剂 |
2.1.2 小鼠体内抑瘤实验 |
2.1.3 小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力活性检测 |
2.1.4 小鼠血清IL-2水平测定 |
2.1.5 免疫组织化学技术检测 |
2.1.6 数据统计处理 |
2.2 结果 |
2.2.1 黄丹兰颗粒剂对小鼠肿瘤生长的抑制作用 |
2.2.2 黄丹兰颗粒剂对肝癌Hca-F荷瘤小鼠免疫器官指数的影响 |
2.2.3 Hca-F荷瘤小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验结果 |
2.2.4 黄丹兰颗粒剂对荷瘤小鼠血清中IL-2 和VEGF表达水平的影响 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
三、HPLC法测定黄丹兰颗粒剂中苦参碱和氧化苦参碱含量 |
3.1 材料 |
3.1.1 仪器 |
3.1.2 药品与试剂 |
3.1.3 色谱条件与系统适用性试验 |
3.1.4 溶液的制备 |
3.2 结果 |
3.2.1 专属性试验 |
3.2.2 线性关系考察.. |
3.2.3 稳定性试验 |
3.2.4 精密度试验 |
3.2.5 重复性试验 |
3.2.6 回收率试验 |
3.2.7 样品测定 |
3.3 讨论 |
3.3.1 流动相的选择 |
3.3.2 供试品提取纯化条件的选择 |
3.4 小结 |
结论 |
参考文献 |
发表论文和参加科研情况说明 |
附录 |
综述 肝纤维化的研究进展 |
综述参考文献 |
致谢 |
个人简历 |
(3)外源茉莉酸甲酯通过ROS影响灵芝菌丝生长、次级代谢和NO信号途径的机理研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
符号和缩略语说明 |
第一章 文献综述 |
第一节 灵芝及灵芝三萜研究进展 |
1.1 灵芝分类特征 |
1.2 灵芝的化学成分 |
1.3 灵芝三萜的药用价值 |
1.4 灵芝三萜的生物合成研究 |
1.5 影响灵芝三萜含量的因素 |
1.6 灵芝基因组学及分子生物学研究进展 |
第二节 茉莉酸甲酯对生长发育、次生代谢的影响 |
2.1 茉莉酸甲酯的生理特性研究 |
2.2 茉莉酸类能诱导目标次生代谢产物的增加 |
第三节 茉莉酸甲酯对胞内信号通路的影响 |
3.1 茉莉酸甲酯对胞内ROS信号途径的影响 |
3.2 MeJA对胞内NO信号途径的影响 |
3.3 MeJA对胞内钙信号影响 |
3.4 NO与ROS在信号调控过程中的相互作用研究进展 |
3.5 ROS与MAPK在信号调控过程中的相互作用研究进展 |
第四节 本论文的研究意义及主要内容 |
4.1 研究意义 |
4.2 研究内容 |
第二章 外源MeJA诱导胞内ROS积累影响灵芝生长发育和次生代谢含量 |
前言 |
第一节 外源MeJA对胞内ROS水平的影响 |
1 实验材料 |
1.1 菌株、试剂 |
1.2 主要仪器 |
2 实验方法 |
2.1 液体培养方法 |
2.2 MeJA诱导条件 |
2.3 ROS清除剂添加条件 |
2.4 酶联免疫吸附法(ELISA)测定胞内MeJA含量 |
2.5 硝基蓝四唑(nitro blue tetrazoliumj NBT)染色 |
2.6 荧光探针法检测ROS |
2.7 钼酸铵法测定胞内H_2O_2含量 |
2.8 过氧化氢酶(CAT)活性测定 |
2.9 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 |
2.10 抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性测定 |
2.11 灵芝总RNA的提取及cDNA制备 |
2.12 实时荧光定量PCR |
3 实验结果 |
3.1 胞内MeJA检测结果分析 |
3.2 外源MeJA处理能够诱导菌丝胞内ROS的积累 |
3.3 外源MeJA处理对胞内抗氧化酶活性的影响 |
3.4 外源MeJA处理对胞内ROS信号以及MAPK信号基因表达的影响 |
4 讨论 |
第二节 MeJA诱导ROS积累调控灵芝三萜含量和菌丝分叉 |
1 实验材料 |
1.1 菌株、试剂 |
1.2 主要仪器 |
2 实验方法 |
2.1 菌丝生长实验 |
2.2 菌丝分叉检测 |
2.3 灵芝三萜含量测定方法 |
2.4 鲨烯和羊毛甾醇UPLC定量分析 |
3 实验结果 |
3.1 MeJA对灵芝菌丝生长的影响 |
3.2 外源MeJA处理对菌丝分叉的影响 |
3.3 外源MeJA诱导胞内ROS水平变化对灵芝三萜含量影响 |
4 讨论 |
第三章 MeJA通过NADPH氧化酶影响灵芝生长发育以及次生代谢含量 |
前言 |
第一节 NADPH氧化酶在MeJA诱导ROS中起重要作用 |
1 实验材料 |
1.1 菌株、试剂 |
1.2 主要仪器 |
2 实验方法 |
2.1 液体培养方法和MeJA诱导条件 |
2.2 硝基蓝四唑(NBT)染色和ROS荧光检测方法 |
2.3 H_2O_2含量测定 |
2.4 过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 |
2.5 胞内APX酶活测定 |
2.6 灵芝总RNA的提取及cDNA制备 |
2.7 实时荧光定量PCR |
2.8 菌丝生长实验 |
2.9 菌丝分叉检测 |
2.10 灵芝三萜含量测定方法 |
2.11 鲨烯和羊毛甾醇UPLC定量分析 |
3 实验结果 |
3.1 NADPH氧化酶在MeJA诱导胞内ROS积累过程中起重要作用 |
3.2 NADPH氧化酶在MeJA诱导抗氧化酶活水平中起重要作用 |
3.3 NADPH氧化酶在MeJA诱导的氧化还原基因表达中起重要作用 |
3.4 NADPH氧化酶在MeJA调节灵芝三萜生物合成和菌丝分叉中起重要作用 |
4 讨论 |
第四章 外源MeJA对胞内一氧化氮水平的影响 |
前言 |
1 实验材料 |
1.1 菌株、试剂 |
1.2 主要仪器 |
2 实验方法 |
2.1 胞内NO检测 |
2.1.1 NO荧光探针检测灵芝胞内NO含量 |
2.1.2 硝酸还原酶法检测胞内NO含量 |
2.2 灵芝总RNA的提取及cDNA的制备 |
2.3 Real-time PCR检测基因转录水平表达 |
3 实验结果 |
3.1 外源MeJA处理对灵芝胞内NO含量的影响 |
3.2 MeJA诱导胞内NO含量积累的合成途径研究 |
3.3 外源MeJA诱导胞内NO和ROS相互作用关系研究 |
4 讨论 |
全文总结 |
参考文献 |
文章发表情况 |
致谢 |
(4)丹杞茸颗粒剂毒性、药效学及制剂质量控制研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
缩略语 |
前言 |
研究现状、成果 |
研究目的、方法 |
一、丹杞茸颗粒剂对试验动物的急性毒性试验和长期毒性试验研究 |
1.1 丹杞茸颗粒剂对试验动物的急性毒性试验研究 |
1.1.1 对象和方法 |
1.1.2 结果 |
1.1.3 讨论 |
1.1.4 小结 |
1.2 丹杞茸颗粒剂对试验大鼠的长期毒性试验研究 |
1.2.1 对象和方法 |
1.2.2 结果 |
1.2.3 讨论 |
1.2.4 小结 |
二、丹杞茸颗粒剂对庆大霉素诱发大鼠急性肾损伤保护作用试验研究 |
2.1 材料和方法 |
2.1.1 材料 |
2.1.2 方法 |
2.2 结果 |
2.2.1 丹杞茸颗粒剂对尿液生化指标的影响 |
2.2.2 丹杞茸颗粒剂对血清生化指标的影响 |
2.2.3 丹杞茸颗粒剂对肾脏器官影响的外观检查 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
三、分光光度法测定丹杞茸颗粒剂中甜菜碱含量的研究 |
3.1 材料 |
3.1.1 仪器与设备 |
3.1.2 材料与试剂 |
3.2 方法与结果 |
3.2.1 方法 |
3.2.2 结果 |
3.2.2.1 线性关系考察 |
3.2.2.2 精密度试验 |
3.2.2.3 稳定性试验 |
3.2.2.4 重复性实验 |
3.2.2.5 加样回收率实验 |
3.2.2.6 样品含量测定 |
3.3 讨论 |
3.3.1 测定方法的选择 |
3.3.2 称样量的确定 |
3.3.3 活性炭量的确定 |
3.3.4 脱色时间的确定 |
3.4 小结 |
结论 |
参考文献 |
发表论文和参加科研情况说明 |
附录 |
综述 中医药治疗糖尿病肾病的研究探讨 |
综述参考文献 |
致谢 |
(5)芪杞参颗粒剂毒性、药效学及制剂质量控制研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
缩略语 |
前言 |
研究现状、成果 |
研究目的、方法 |
一、芪杞参颗粒剂对实验动物的急性毒性实验和长期毒性实验研究 |
1.1 芪杞参颗粒剂对小鼠急性毒性实验研究 |
1.1.1 对象和方法 |
1.1.2 结果 |
1.1.3 讨论 |
1.1.4 小结 |
1.2 芪杞参颗粒剂对大鼠长期毒性实验研究 |
1.2.1 对象和方法 |
1.2.2 结果 |
1.2.3 讨论 |
1.2.4 小结 |
二、芪杞参颗粒剂对小鼠细胞免疫和体液免疫功能的影响 |
2.1 材料和方法 |
2.1.1 材料 |
2.1.2 方法 |
2.2 结果 |
2.2.1 芪杞参颗粒剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 |
2.2.2 芪杞参颗粒剂对血清溶血、NK细胞活性及淋巴细胞增殖能力的影响 |
2.2.3 芪杞参颗粒剂对小鼠免疫脏器重量的影响 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
三、HPLC法测定芪杞参颗粒剂中人参皂苷Rb1含量 |
3.1 对象和方法 |
3.1.1 对象 |
3.1.2 方法 |
3.2 结果 |
3.2.1 HPLC测定 |
3.2.2 线性关系考察 |
3.2.3 精密度试验 |
3.2.4 稳定性试验 |
3.2.5 重复性试验 |
3.2.6 加样回收率试验 |
3.2.7 样品含量测定 |
3.3 讨论 |
3.3.1 人参皂苷Rb1为质控标准的依据 |
3.3.2 供试品溶液制备方法的考察 |
3.3.3 色谱柱的选择 |
3.3.4 流动相的选择 |
3.4 小结 |
结论 |
参考文献 |
发表论文和参加科研情况说明 |
附录 |
综述 中药在免疫调节方面的研究进展 |
综述参考文献 |
致谢 |
(6)肾康宁胶囊毒性、药效学及质量控制研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
缩略语 |
前言 |
研究现状、成果 |
研究目的、方法 |
一 肾康宁胶囊对小鼠的急性毒性试验和大鼠的长期毒性试验研究 |
1.1 肾康宁胶囊对小鼠的急性毒性试验研究 |
1.1.1 材料和方法 |
1.1.1.1 材料 |
1.1.1.2 方法 |
1.1.2 结果与结论 |
1.1.3 讨论 |
1.2 肾康宁胶囊对小鼠的长期毒性试验研究 |
1.2.1 材料和方法 |
1.2.1.1 材料 |
1.2.1.2 方法 |
1.2.2 结果 |
1.2.2.1 一般情况 |
1.2.2.2 临床检查 |
1.2.3 讨论 |
1.2.4 小结 |
二 肾康宁胶囊对庆大霉素诱发大鼠急性肾损伤保护作用的实验研究 |
2.1 材料和方法 |
2.1.1. 材料 |
2.1.2 方法 |
2.2 结果 |
2.2.1 对尿液生化指标的影响 |
2.2.2 对血清生化指标的影响 |
2.2.3 对大鼠肾脏器官影响的外观检查 |
2.3 讨论 |
三 HPLC法测定肾康宁胶囊中黄芪甲苷的含量 |
3.1 材料和方法 |
3.1.1 仪器与试药 |
3.1.2 方法 |
3.2 结果 |
3.2.1 HPLC测定 |
3.2.2 线性关系考察 |
3.2.3 精密度试验 |
3.2.4 重复性试验 |
3.2.5 稳定性试验 |
3.2.6 加样回收率实验 |
3.2.7 样品含量测定 |
3.3 讨论 |
3.3.1 柱前衍生化法 |
3.3.2 不同提取方法的比较 |
3.3.3 待测样品的精制 |
结论 |
参考文献 |
发表论文和参加科研情况说明 |
综述 |
综述参考文献 |
致谢 |
(7)灵芝三萜组分GLA的抗肿瘤及对急性肝损伤保护作用的研究(论文提纲范文)
英文缩略词表 |
中文摘要 |
ABSTRACT |
前言 |
第一部分 灵芝三萜组分GLA 体内外抗肿瘤作用 |
1 GLA 对各种肿瘤细胞的抑制作用 |
1.1 材料与方法 |
1.1.1 药物与试剂 |
1.1.2 实验仪器 |
1.1.3 主要试剂的配制 |
1.1.4 细胞株及培养条件 |
1.1.5 方法 |
1.1.5.1 样品溶液的制备 |
1.1.5.2 GLA 对肿瘤细胞增殖的影响 |
1.1.5.3 GLA 诱导HL60 细胞凋亡的检测 |
1.2 结果 |
1.2.1 GLA 体外对多种肿瘤细胞增殖抑制的MTT 检测结果 |
1.2.2 AO/EB 荧光染色观察结果 |
1.3 讨论 |
1.4 小结 |
2 GLA 对小鼠移植瘤的抗肿瘤作用 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 药物 |
2.1.2 实验动物和瘤源 |
2.1.3 方法 |
2.1.3.1 药品配制 |
2.1.3.2 GLA 对小鼠移植瘤肝癌H22 生长的影响 |
2.1.3.3 GLA 对小鼠移植瘤肉瘤S180 生长的影响 |
2.1.3.4 GLA 对人结肠癌Colon26 裸鼠移植瘤生长的影响 |
2.1.3.5 统计学处理 |
2.2 结果 |
2.2.1 GLA 对小鼠移植瘤肝癌H22 生长的影响 |
2.2.2 GLA 对小鼠移植瘤肉瘤S180 生长的影响 |
2.2.3 GLA 对人结肠癌Colon26 裸鼠移植瘤生长的影响 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
3 检测GLA 对HL60 细胞相关蛋白表达的影响 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 实验材料 |
3.1.2 主要仪器 |
3.1.3 主要试剂的配制 |
3.1.4 方法 |
3.2 结果 |
3.3 讨论 |
3.4 小结 |
第二部分 灵芝三萜组分GLA 体内外抗急性肝损伤的保护作用 |
1 GLA 对H_20_2 致人正常肝细胞(L02)损伤的保护作用研究 |
1.1 材料与方法 |
1.1.1 药物与试剂 |
1.1.2 实验仪器 |
1.1.3 主要试剂的配制 |
1.1.4 细胞株及培养条件 |
1.1.5 方法 |
1.1.5.1 样品溶液的制备 |
1.1.5.2 GLA 对H_20_2 致L02 细胞损伤中ALT、AST 的影响 |
1.2 结果 |
1.3 讨论 |
1.4 小结 |
2 GLA 对小鼠急性肝损作伤的保护作用 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 实验材料 |
2.1.2 仪器设备 |
2.1.3 实验动物 |
2.1.4 实验方法 |
2.1.4.1 GLA 对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用 |
2.1.4.2 GLA 对小鼠急性四氯化碳肝损伤的保护作用 |
2.1.4.3 统计学处理 |
2.2 结果 |
2.2.1 GLA 对小鼠急性酒精肝损伤的保护作用 |
2.2.2 GLA 对小鼠急性四氯化碳肝损伤的保护作用 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
总结和展望 |
参考文献 |
致谢 |
文献综述 |
参考文献 |
(8)灵芝有效降糖组分的筛选及降血糖机理研究(论文提纲范文)
目录 |
缩略词表 |
中文摘要 |
ABSTRACT |
第一章 前言 |
第一节 灵芝的研究概述 |
1.1 灵芝的化学成分研究 |
1.2 灵芝的药理作用 |
第二节 蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP) |
2.1 PTP家族概述 |
2.2 PTP1B简介 |
2.3 PTP1B与胰岛素信号传导 |
第三节 课题的立题依据与主要研究内容 |
第二章 灵芝子实体有效降糖组分的筛选及其理化性质研究 |
第一节 材料和方法 |
1.1 材料 |
1.2 实验方法 |
1.2.1 灵芝中PTP1B抑制剂的筛选及提取物的纯化 |
1.2.2 提取物对PTP1B的抑制能力分析 |
1.2.3 提取物纯度检测 |
1.2.4 提取物元素组成分析 |
1.2.5 提取物单糖组成分析 |
1.2.6 提取物氨基酸组成分析 |
1.2.7 提取物多糖含量的苯酚-硫酸法分析 |
1.2.8 提取物蛋白含量的Lowry法分析 |
1.2.9 提取物组成表征 |
1.2.10 提取物分子量测定 |
1.2.11 提取物抑制PTP1B活性的动力学 |
1.2.12 统计学分析 |
第二节 结果与分析 |
2.1 提取物的分离纯化及对PTP1B的抑制 |
2.2 FYGL的元素组成 |
2.3 FYGL的单糖组成 |
2.4 FYGL氨基酸组成 |
2.5 FYGL多糖和蛋白含量 |
2.6 FYGL组成的红外光谱表征 |
2.7 FYGL组成的核磁共振波谱表征 |
2.8 FYGL分子量测定 |
2.9 FYGL抑制PTP1B活性的动力学 |
第三节 讨论 |
3.1 PTP1B抑制剂 |
3.2 灵芝有效降糖组分的筛选及有效成分的类型 |
3.3 FYGL对PTP1B的抑制动力学 |
第三章 灵芝子实体有效降糖组分的体内药效学及毒性检测 |
第一节 材料和方法 |
1.1 材料 |
1.2 试验方法 |
1.2.1 主要溶液的配制 |
1.2.2 糖尿病模型鼠的构建 |
1.2.3 FYGL对血清胰岛素浓度、抵抗指数及分泌指数的影响 |
1.2.4 急性毒性实验 |
1.2.5 统计学处理 |
第二节 结果与分析 |
2.1 动物模型一般观察 |
2.2 FYGL对血清葡萄糖水平的影响 |
2.3 FYGL对血清胰岛素浓度、抵抗指数及分泌指数的影响 |
2.4 FYGL急性毒性 |
第三节 讨论 |
3.1 胰岛素抵抗与STZ造模 |
3.2 FYGL对STZ诱导与db/db基因模型鼠试验结果的比较 |
第四章 灵芝子实体有效降糖组分的动物药理学检测 |
第一节 材料和方法 |
1.1 材料 |
1.2 试验方法 |
1.2.1 糖尿病模型的构建(同第三章) |
1.2.2 肝脏和骨骼肌组织的取材 |
1.2.3 FYGL对肝脏和骨豁肌组织中PTP1B表达水平的影响 |
1.2.4 FYGL对肝脏和骨骼肌组织中PTP1B活性的影响 |
1.2.5. FYGL对肝脏和骨骼肌组织中胰IRβ亚基磷酸化水平的影响 |
1.2.6 统计学处理 |
第二节 结果与分析 |
2.1 FYGL对肝脏和骨骼肌组织中PTP1B表达水平的影响 |
2.2 FYGL对肝脏和骨骼肌组织中PTP1B活性的影响 |
2.3 FYGL对肝脏和骨骼肌组织中IRβ磷酸化水平的影响 |
第三节 讨论 |
3.1 FYGL对PTP1B表达水平和活性的影响 |
3.2 FYGL对IRβ亚基磷酸化水平的影响 |
第五章 灵芝子实体有效降糖组分其它生物活性的检测 |
第一节 材料和方法 |
1.1 材料 |
1.2 实验方法 |
1.2.1 酶标仪检测FYGL对α-葡萄糖苷酶的抑制 |
1.2.2 FYGL抑制α-葡萄糖苷酶活性的动力学 |
1.2.3 荧光光谱检测FYGL对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制 |
1.2.4 FYGL对小肠葡萄糖苷酶活性的影响 |
1.2.5 UV分析FYGL对DPPH自由基活性的抑制 |
1.2.6. 邻苯三酚自氧化法检测FYGL对氧负离子自由基抑制能力 |
1.2.7 统计学处理 |
第二节 结果与分析 |
2.1 酶标仪检测FYGL对α-葡萄糖苷酶活性的抑制 |
2.2 FYGL对α-葡萄糖苷酶抑制动力学的分析 |
2.3 内源荧光法检测FYGL对α-葡萄糖苷酶活性的抑制 |
2.4 内源荧光光谱检测FYGL对α-淀粉酶活性的抑制 |
2.5 FYGL对小肠葡萄糖昔酶活性的影响 |
2.6 FYGL对DPPH自由基活性的抑制 |
2.7 FYGL对氧负离子自由基活性的抑制 |
第三节 讨论 |
3.1 α-糖苷酶抑制剂 |
3.2 FYGL体内对小肠α-葡萄糖苷酶活性的影响 |
3.3 FYGL抗氧化活性 |
第六章 灵芝子实体有效降糖组分对代谢相关生化指标的影响 |
第一节 材料和方法 |
1.1 材料 |
1.2 试验方法 |
1.2.1 FYGL对血清自由脂肪酸的影响 |
1.2.2 FYGL对血清甘油三酯的影响 |
1.2.3 FYGL对血清总胆固醇的影响 |
1.2.4 FYGL对血清低密度脂蛋白胆固醇的影响 |
1.2.5 FYGL对血清高密度脂蛋白胆固醇影响 |
1.2.6 统计学处理 |
第二节 结果与分析 |
2.1 FYGL对STZ致糖尿病大鼠血脂的影响 |
2.2 FYGL对db/db2型糖尿病小鼠血脂的影响 |
第三节 讨论 |
第七章 结论 |
第八章 待开展工作 |
8.1 FYGL结构解析及与PTP1B相互作用的方式 |
8.2 FYGL对小肠黏膜转运葡萄糖及餐后2h血糖的影响 |
8.3 FYGL对糖化血红蛋白的影响 |
8.4 FYGL的药代动力学 |
参考文献 |
攻读博士期间发表和待发表的论文及专利 |
致谢 |
个人简历 |
(9)基于标准汤剂指纹图谱评价的肝脂消颗粒剂药学研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
目录 |
引言 |
第一部分 相关文献研究 |
1 脂肪肝的现代研究 |
1.1 现代医学研究 |
1.2 中医药研究 |
2 方中药味化学成分及药理作用研究 |
2.1 绵茵陈 |
2.2 山楂 |
2.3 郁金 |
2.4 黄精 |
2.5 灵芝 |
2.6 丹参 |
2.7 泽泻 |
2.8 法半夏 |
2.9 决明子 |
2.10 鸡内金 |
3 标准汤剂及其相关研究 |
3.1 全方标准汤剂的制备 |
3.2 标准汤剂含量测定方法研究 |
3.3 标准汤剂指纹图谱研究 |
第二部分 肝脂消颗粒剂的制备工艺研究 |
1 处方组成 |
2 剂型选择 |
3 制备工艺设计的理论依据 |
4 提取工艺的筛选 |
4.1 丹参醇提与水提指纹分析比较 |
4.2 灵芝醇提与水提指纹分析比较 |
4.3 决明子醇提与水提指纹分析比较 |
4.4 山楂醇提与水提指纹分析比较 |
4.5 绵茵陈醇提与水提指纹分析比较 |
4.6 广郁金醇提与水提指纹分析比较 |
4.7 泽泻醇提与水提指纹分析比较 |
5 醇提工艺考察 |
5.1 考察指标的确定 |
5.2 考察指标的测定方法 |
5.3 丹参药材中丹酚酸B的含量测定 |
5.4 正交实验法优选提取工艺 |
5.5 醇提正交提取工艺验证试验 |
5.6 醇提液与标准汤剂指纹图谱的比较分析 |
5.7 讨论 |
6 水提工艺考察 |
6.1 考察指标的确定 |
6.2 考察指标的测定方法 |
6.3 正交实验法优选提取工艺 |
6.4 水提正交工艺验证实验 |
6.5 水提液与标准汤剂指纹图谱比较分析 |
6.6 讨论 |
7 浓缩工艺考察 |
7.1 醇提液浓缩工艺考察 |
7.2 醇提液湿热稳定性试验 |
7.3 讨论 |
8 水提液浓缩工艺考察 |
8.1 水提液浓缩工艺含量测定结果 |
8.2 水提液浓缩工艺指纹图谱分析结果 |
8.3 讨论 |
9 干燥工艺研究 |
9.1 不同干燥方式的筛选 |
9.2 不同干燥方式对指纹图谱的影响 |
9.3 讨论 |
10 成型工艺研究 |
10.1 提取物的制备 |
10.2 肝脂消颗粒辅料的筛选 |
10.3 润湿剂考察 |
10.4 成品质量检查 |
10.5 制法 |
10.6 工艺流程图 |
第三部分 初步质量标准研究 |
1 仪器与试药 |
1.1 仪器 |
1.2 试药 |
2 药品原料(药材及辅料)的来源及质量标准 |
2.1 药材来源及质量标准 |
2.2 辅料来源及质量标准 |
3 成品的质量标准研究 |
3.1 性状 |
3.2 鉴别 |
3.3 检查 |
3.4 丹酚酸B、绿原酸的含量测定 |
3.5 成品指纹图谱研究 |
3.6 功能主治 |
3.7 用法与用量 |
3.8 规格 |
3.9 贮藏 |
3.10 成品与标准汤剂含量和指纹图谱的分析比较 |
结语 |
一 结论与意义 |
1 剂型的选择 |
2 提取工艺 |
3 浓缩工艺 |
4 干燥工艺 |
5 成型工艺 |
6 初步质量标准研究 |
二 问题与展望 |
1 存在的问题 |
2 展望 |
参考文献 |
附录一 硕士研究生在读期间发表的论文 |
致谢 |
(10)参花通脉胶囊毒性、药效学及制剂质量控制研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
缩略语 |
前言 |
研究现状、成果 |
研究目的、方法 |
一、参花通脉胶囊对试验动物的急性毒性试验和长期毒性试验研究 |
1.1 参花通脉胶囊对试验动物的急性毒性试验研究 |
1.1.1 对象和方法 |
1.1.2 结果 |
1.1.3 讨论 |
1.1.4 小结 |
1.2 参花通脉胶囊对试验大鼠的长期毒性试验研究 |
1.2.1 对象和方法 |
1.2.2 结果 |
1.2.3 讨论 |
1.2.4 小结 |
二、参花通脉胶囊对大鼠血瘀模型微循环及血液流变学影响的试验研究 |
2.1 对象和方法 |
2.1.1 对象 |
2.1.2 方法 |
2.2 结果 |
2.2.1 物理指标 |
2.2.2 参花通脉胶囊对血瘀模型大鼠微循环的影响 |
2.2.3 参花通脉胶囊对大鼠急性血瘀模型的血液流变性影响 |
2.3 讨论 |
2.4 小结 |
三、HPLC法测定参花通脉胶囊中丹参素钠的含量 |
3.1 对象和方法 |
3.1.1 对象 |
3.1.2 方法 |
3.2 结果 |
3.2.1 HPLC测定 |
3.2.2 线性关系考察 |
3.2.3 精密度试验 |
3.2.4 稳定性试验 |
3.2.5 重复性试验 |
3.2.6 精密度实验 |
3.2.7 加样回收率实验 |
3.2.8 样品含量测定 |
3.3 讨论 |
3.3.1 丹参中成分复杂 |
3.3.2 供试品溶液制备方法的考察 |
3.3.3 色谱柱的选择 |
3.3.4 流动相的选择 |
3.4 小结 |
结论 |
参考文献 |
发表论文和参加科研情况说明 |
附录 |
综述 |
综述参考文献 |
致谢 |
四、灵芝颗粒剂的药效学研究(论文参考文献)
- [1]中西医结合治疗儿童注意力缺陷障碍伴多动症文献研究及Meta分析[D]. 郑一泳. 北京中医药大学, 2018(08)
- [2]黄丹兰颗粒剂毒性、抗癌作用及制剂质量控制研究[D]. 庞淑婉. 天津医科大学, 2016(03)
- [3]外源茉莉酸甲酯通过ROS影响灵芝菌丝生长、次级代谢和NO信号途径的机理研究[D]. 巩丽. 南京农业大学, 2015(05)
- [4]丹杞茸颗粒剂毒性、药效学及制剂质量控制研究[D]. 杜芃. 天津医科大学, 2014(01)
- [5]芪杞参颗粒剂毒性、药效学及制剂质量控制研究[D]. 李宏. 天津医科大学, 2014(01)
- [6]肾康宁胶囊毒性、药效学及质量控制研究[D]. 芦志伟. 天津医科大学, 2012(03)
- [7]灵芝三萜组分GLA的抗肿瘤及对急性肝损伤保护作用的研究[D]. 魏晓霞. 福建医科大学, 2011(11)
- [8]灵芝有效降糖组分的筛选及降血糖机理研究[D]. 滕宝松. 复旦大学, 2012(07)
- [9]基于标准汤剂指纹图谱评价的肝脂消颗粒剂药学研究[D]. 温远珍. 广州中医药大学, 2011(05)
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