一、鸡新城疫、鸡传染性法氏囊病二联活疫苗的研究(论文文献综述)
王申锋[1](2020)在《“固元颗粒”免疫增强剂研制及其在鸡疫苗免疫中的应用》文中研究表明中药具有很好的增强免疫力的作用,成为当前替代饲料中抗生素添加的一个重要方向。“固元颗粒”原方出自《新药转正标准》,由黄芪和生晒参芦头配方而成,其功效是益气固本。如果直接将其应用于兽医临床,提高动物的免疫功能,成本偏高,很难在养殖业中推广。但是,人用中药加工过程中产生的一些附属提取物,以及在非贵重药材中提取到的一些有效成分,成本相对较低,具有开发兽医临床用药的潜力。为此,我们以黄芪多糖(Astragalus Polysaccharides,APS)和人参茎叶皂苷(Ginseng Stem-leaf Saponins,GSLS)代替“固元颗粒”配方中的黄芪和生晒参芦头,大幅降低成本,配伍组方,制成可溶性颗粒,称为兽用“固元颗粒”,用于增强动物抗病能力和疫苗免疫效果。本论文研究该制剂工艺、质量标准,并评估其对鸡的安全性、有效性和最适添加量。检测该制剂对免疫抑制条件下鸡和小鼠的免疫调节作用,初步揭示其对蛋鸡淋巴细胞TLR4信号通路的激活及相关细胞因子的分泌机制,并在蛋鸡鸡群进行应用试验,为预防禽病毒性疾病提供新方法。主要结果总结如下:1.优化并确定了“固元颗粒”的制剂工艺。通过制剂成型工艺预实验、辅料选择、润湿剂筛选和验证试验确定了最佳成型工艺。配方为:APS 110 g、GSLS100 g、蔗糖590 g和糊精200 g。制备工艺为:将上述原材料混合均匀,采用75%乙醇为润湿剂,制软材,制粒,60℃烘干,整粒。所得颗粒易成型,颗粒完整,细粉较少。3个试验批次所得颗粒质量一致,该工艺稳定可行。2.建立了“固元颗粒”中人参皂苷Rg1、Re、Rd含量的高效液相色谱测定方法。通过精密度试验、重复性试验、稳定性试验及回收率试验证实,RSD<2%,测定三批“固元颗粒”,每1 g颗粒中Rg1+Re+Rd总量均在30 mg以上。该方法操作简便,测量准确,可作为对该制剂质量控制的内容记入质量标准。3.“固元颗粒”具有良好的安全性和有效性。对鸡按推荐量的1、3、5、10倍(0.05、0.15、0.25和0.5 g/kg体重)剂量混饮,连续7 d,停药后继续饲养2周。记录鸡行为、体重的变化,检测血常规和血液生化指标以及脏器指数,结果均未见异常,表明该制剂对鸡临床用药具有较高的安全性。另外,不同剂量的“固元颗粒”均可有效提高蛋鸡的抗体效价水平、红细胞花环率和生产性能指标,其中50 mg/kg为最适应用剂量。“固元颗粒”对注射新城疫(ND)疫苗的鸡群具有免疫增强作用。使用50mg/kg该颗粒对鸡进行免疫调节试验,测定脏器指数、新城疫抗体效价和脾淋巴细胞转化指数,证实用药2-3周后其体内NDV抗体效价显着高于对照组(P<0.05)。“固元颗粒”对免疫抑制鸡具有免疫调理作用。对经环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)导致的免疫抑制鸡使用“固元颗粒”后,可使其免疫抑制现象得到显着缓解(P<0.05)。另外,在疫苗免疫后7、14和21d,上述4个给药处理组的脾淋巴细胞经刀豆蛋白A(ConA)和LPS诱导,淋巴细胞刺激指数均显着高于CTX组(P<0.05)。“固元颗粒”对免疫抑制小鼠亦有免疫调节作用。“固元颗粒”中、高剂量组可显着提高免疫抑制小鼠的脾脏指数和胸腺指数(P<0.05)。给药15 d后,免疫抑制小鼠IL-2和IFN-γ含量接近正常小鼠水平,其中“固元颗粒”中剂量组(50 mg/kg)效果最为明显。另外,各剂量组的脾淋巴细胞转化率与CTX组相比较极显着提升(P<0.01)。4.“固元颗粒”促进蛋鸡淋巴细胞TLR4信号通路的激活及相关细胞因子的分泌。分离蛋鸡外周血淋巴细胞,与不同浓度的“固元颗粒”(终浓度200、100、50、25、0μg/mL,阳性对照为浓度100μg/mL的APS)分别培养16 h、24h、32 h、48 h,采用RT-PCR方法检测淋巴细胞中TLR4、MyD88、TRAF-6、TRIF、IRF3、IFN-βmRNA表达量。收集培养24 h的淋巴细胞上清液,用ELISA测定cGMP、cAMP、NO、iNOS和Ca2+的含量。结果显示,“固元颗粒”通过TLR4受体激活MyD88依赖性和TRIF依赖性两条信号通路,还可降低鸡外周淋巴细胞培养上清中cAMP的含量,提高cGMP、Ca2+、NO和iNOS的含量,从而调节蛋鸡的免疫功能。5.“固元颗粒”在鸡群中应用可促进疫苗免疫效果。随机选择2栋鸡舍,分为“固元颗粒”+疫苗免疫组和单独疫苗免疫组,各3100只鸡,按剂量50 mg/kg体重饮水进行临床应用试验。结果显示,与单独疫苗对照组相比,“固元颗粒”试验组的疫苗免疫抗体效价显着提高,发病率和死亡率分别下降0.7和0.8个百分点,表明“固元颗粒”在大群临床试验中,能够有效降低发病率和死亡率,增加养殖收益。综上所述,本研究确定了“固元颗粒”稳定的制备工艺并制定了其质量标准,证实制剂安全有效。初步证实该颗粒制剂可通过TLR4受体激活MyD88和TRIF通路,降低cAMP含量,提高cGMP、Ca2+、NO、iNOS含量,从而调节鸡的免疫应答。“固元颗粒”能够明显提高蛋鸡的疫苗免疫后特异性抗体的分泌水平,降低发病率和死亡率,具有较好的应用前景。
沈佳,史爱华,章振华,李林,景小冬,张建伟,郑小兰,姜北宇[2](2019)在《鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病三联灭活疫苗对不同日龄雏鸡的免疫效力研究》文中研究表明为评估鸡新城疫(ND)-传染性支气管炎(IB)-传染性法氏囊病(IBD)三联灭活疫苗对不同日龄和不同水平母源抗体雏鸡的免疫效力和持续期,本试验用该疫苗免疫7、14、21日龄SPF雏鸡和有母源抗体的普通雏鸡,免疫后采血测定ND血凝抑制抗体(HI Ab)、IB血凝抑制抗体(HI Ab)及IBD中和抗体(NA),并用传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒攻击。结果显示,7日龄SPF雏鸡免疫后21 d ND HI抗体、IB HI抗体及IBD中和抗体效价分别为7.9log2、6.9log2和14.1log2,SPF鸡日龄越大,抗体水平越高;28日龄SPF鸡免疫后3个月,0.3 mL免疫剂量组试验鸡ND HI、IB HI及IBD中和抗体效价分别达6.5log2、6.1log2和13.6log2,IBDV攻毒保护率均为100%(10/10);不同日龄普通雏鸡免疫效果与SPF鸡试验一致,抗体水平随鸡日龄增大而升高,IBD攻毒保护率也都达到100%(10/10)。试验结果证实,鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病三联灭活疫苗可使7、14及21日龄SPF雏鸡和普通雏鸡产生良好的免疫力,对雏鸡的免疫期至少为3个月。
汪宏才,温国元,罗青平[3](2018)在《新城疫多联疫苗研究进展》文中进行了进一步梳理新城疫(Newcastle disease,ND)的防控主要通过生物安全和加强免疫进行预防。目前预防新城疫的疫苗主要有弱毒疫苗和灭活疫苗。为了降低成本、减少免疫次数,达到"一针防多病"的目的,国内外很多学者在新城疫单苗的基础上研制出了一系列多联疫苗。通过对中国新城疫多联疫苗的研究进展进行阐述,分析了疫苗的应用效果,为临床应用提供参考。
章振华,李林,景小冬,张建伟,沈佳,史爱华,郑小兰,姜北宇[4](2018)在《鸡新城疫-传染性法氏囊病-禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对雏鸡的免疫效力研究》文中认为为了评估鸡新城疫(ND)-传染性法氏囊病(IBD)-禽流感(AI)(H9亚型)三联灭活疫苗对雏鸡的免疫效力,采用该疫苗分别免疫1、7、10、14、21日龄SPF雏鸡和带有母源抗体的普通雏鸡,免疫后21d28d采血测定ND血凝抑制抗体(HIAb)、IBD中和抗体(NA)及AI(H9)HIAb抗体,并用传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒攻击。结果显示,免疫后各不同日龄免疫组SPF雏鸡的ND HIAb、IBD NA及AI(H9)HIAb滴度分别为7.9log28.3log2、13.9log215.8log2及8.0log28.9log2,IBDV攻毒均100%保护;而普通雏鸡免疫后的ND HIAb、IBD NA及AI(H9)HIAb滴度,1日龄免疫组分别为5.9log2、12.1log2和5.6log2,7、10、14、21日龄免疫组分别为6.1log27.0log2、12.6log214.5log2和6.0log27.5log2;IBDV攻毒,1日龄免疫组普通雏鸡保护率为60%,7、14及21日龄免疫组保护率均为100%;结果证实,SPF雏鸡所产生的免疫效力要高于带有母源抗体的普通雏鸡,1日龄普通雏鸡免疫所产生的免疫效力明显低于其他日龄。根据试验结果,推荐该疫苗对雏鸡的使用日龄为7日龄14日龄。
刘丹,侯力丹,李启红,黄小洁,李俊平,杨承槐[5](2018)在《禽用活疫苗外源病毒污染情况的调查研究》文中研究表明为对禽用活疫苗污染外源病毒的情况进行彻底摸底调查,抽取了目前使用量大、覆盖面广的禽用活疫苗重点品种共8种28批,涉及18家国内生产企业、7家国外企业,疫苗生产用SPF鸡胚来自国内8家企业。按照《中国兽药典》2010年版三部鸡检查法和《欧洲药典》对抽检的禽病活疫苗进行了外源病毒污染和禽腺病毒污染检验。结果显示所抽检的禽用活疫苗均无外源病毒污染和禽腺病毒污染,表明我国禽用活疫苗的质量控制和安全性良好。
星东[6](2017)在《ND-IBD二联灭活苗对商品蛋雏鸡免疫效果及机制研究》文中研究指明传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)与新城疫(Newcastle disease,ND)的防控仍然是国内家禽养殖业面临的两大难题。IBD和ND疫苗在蛋鸡的应用已经取得一定的成效,但是在生产中其免疫效果仍达不到预期效果,而且经常由于苗毒毒力过强造成免疫器官损伤。而ND-IBD二联灭活苗经生产工艺改进,提高了抗原含量,且可以减少免疫次数,能够有效的避免活苗的缺陷。ND-IBD二联灭活苗在商品蛋雏鸡的免疫效果及机体对该疫苗的免疫反应仍然有待进一步的研究。因此,本试验比较了 ND-IBD二联灭活疫苗对1、7日龄商品蛋鸡的免疫效果,并比较了 ND-IBD二联灭活疫苗与IBD活苗对7日龄商品蛋鸡的免疫效果,同时结合实时荧光定量PCR分析了 ND-IBD二联灭活疫苗免疫后免疫因子mRNA表达量的变化情况。研究结果为ND-IBD二联灭活疫苗在蛋鸡生产上的应用提供了重要依据。具体内容如下:方法:1、ND-IBD二联灭活苗对1、7日龄商品蛋雏鸡免疫效果研究。选取体重、日龄相近的健康的1日龄商品蛋雏鸡360只,随机分成A、B和C三个处理组。A组为空白对照组,接种生理盐水;B组为1日龄疫苗免疫组,雏鸡1日龄时颈部皮下注射0.3mlND-IBD二联灭活疫苗;C组为7日龄疫苗免疫组,于雏鸡7日龄时颈部皮下注射0.3mlND-IBD二联灭活疫苗。试验期56d,免疫后每7d采血分离血清,采用血凝抑制试验检测ND抗体水平;并采用中和试验检测IBD抗体水平;同时采集法氏囊和脾脏,采用TRIzol法提取总RNA,反转录出cDNA,用实时荧光定量PCR检测CD4+、CD8+、IL-6、IFN-β的mRNA表达量。然后每7d对各组鸡进行IBDV攻毒保护试验,攻毒剂量0.2ml/羽,并于攻毒后72h剖检,观察法氏囊病变情况,并计算攻毒保护率。2、ND-IBD二联灭活疫苗与IBD活苗对商品蛋鸡免疫效果比较研究。选取体重、日龄相近的健康的1日龄商品蛋雏鸡240只分成3个处理组。A组为空白对照组,接种生理盐水;B组为IBD活苗免疫组,雏鸡7日龄时颈部皮下注射0.3mlIBD活疫苗;C组为ND-IBD二联灭活疫苗免疫组,于雏鸡7日龄时颈部皮下注射0.3mlND-IBD二联灭活疫苗。试验期42d,免疫后每7d采血分离血清,采用中和试验检测IBD抗体水平;同时采集法氏囊和脾脏,采用TRIzol法提取总RNA,反转录出cDNA用实时荧光定量PCR法检测CD4+、CD8+、IL-6、IFN-β的mRNA表达量。然后每7d对各组鸡进行IBDV攻毒保护试验,攻毒剂量0.2ml/羽。攻毒后72h剖检,观察法氏囊病变情况,并计算攻毒保护率。结果:1、ND-IBD二联灭活苗对1、7日龄商品蛋雏鸡免疫效果研究。抗体检测结果表明:在28~56日龄,C组的IBD和ND抗体水平显着高于A组与B组(P<0.05);35日龄前,C组攻毒保护率显着优于A组,且相差10%。实时荧光定量PCR法检测结果表明:在法氏囊与脾脏中,28~56日龄时,C组基因CD4+、CD8+、IL-6、IFN-β的mRNA表达量,相比A组与B组显着升高(P<0.05)。2、ND-IBD二联灭活疫苗与IBD活苗对7日龄商品蛋鸡的免疫效果比较研究。抗体检测结果表明:28~42日龄,C组IBD体水平显着高于B组与A组(P<0.05);35日龄前,C组攻毒保护效果高于B组与A组。实时荧光定量PCR结果表明:21~42日龄时,法氏囊与脾脏中基因CD4+、CD8+、IL-6、IFN-β的mRNA表达量,C组显着高于B组与A组(P<0.05)。结论:1.ND-IBD二联灭活苗免疫7日龄商品蛋雏鸡可显着提高IBD与ND抗体水平和免疫器官中细胞因子的mRNA表达量,增强机体免疫功能。2.ND-IBD二联灭活苗免疫7日龄商品蛋雏鸡,免疫效果优于IBD弱毒苗。
赖隆永[7](2017)在《ND-IBD二联灭活苗对种母鸡的免疫效果及IBDV强弱毒株鉴别诊断研究》文中研究表明传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease,IBD)是由双股核糖核酸病毒科的传染性法氏囊病毒(Infectious Bursal Disease Virus,IBDV)引起的以感染雏鸡为主的免疫抑制性、高度接触性传染病;新城疫(Newcastle Disease,ND)是由副黏病毒科鸡新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)引起鸡的急性、高度接触性和致死性传染病,不同年龄、品种以及性别的鸡均能感染ND,但是幼雏的发病率和死亡率明显更高。研究发现国内对ND-IBD二联灭活苗的研发及其对种母鸡免疫效果研究较少,因此,针对这种情况,对ND-IBD二联灭活苗对种母鸡免疫效果研究仍需要进一步研究;同时在生产临床实践中或者科研试验研究中,血清学方法监测雏鸡抗体水平在一定程度上,都会引起雏鸡应激,影响其生长性能和经济效益。通过从鸡蛋中提取ND和IBD卵黄抗体间接预估ND和IBD血清抗体,获取样品方便,减少雏鸡的反复应激,考虑到ND和IBD卵黄抗体与子代雏鸡ND和IBD血清抗体的关系尚不明确,因此通过测定ND和IBD卵黄抗体与ND和IBD血清抗体,进行ND和IBD卵黄抗体与子代ND和IBD血清抗体的相关性分析;另外,研究表明在临床实践中,机体内存在IBDV野毒和苗毒的感染,引起法氏囊病变和免疫失败,因此建立一种高效简便的IBDV野毒与疫苗毒的鉴别诊断方法具有重要意义。本研究拟对100日龄种母鸡进行皮下注射ND-IBD二联灭活苗,对其ND和IBD抗体水平进行检测,观察种母鸡及其子代的免疫效果,此外,对提取的种母鸡种蛋的ND和IBD卵黄抗体水平与子代雏鸡的ND和IBD血清抗体水平进行相关性分析,最后建立一种高效简便的IBDV野毒与疫苗毒的鉴别诊断方法。本试验的研究内容及结果如下:1.ND-IBD二联灭活苗对100日龄种母鸡的免疫效果研究。本试验通过对100日龄种母鸡进行皮下注射ND-IBD二联灭活苗,分别于免疫前、免疫后每隔15 d采血分离血清,利用血清学方法检测其ND和IBD抗体水平,并对其抗体水平进行分析,结果表明种母鸡接种ND-IBD二联灭活苗之后产生了较高的ND和IBD抗体水平,种母鸡得到了很好的免疫保护,并且其免疫保护力能够持续120d。可见,种母鸡免疫ND-IBD二联灭活苗,不仅可以有效地提高种母鸡的抗体水平,也可以提高子代的母源抗体水平。2.ND和IBD卵黄抗体与子代ND和IBD血清抗体的相关性分析。本试验通过检测种母鸡种蛋的ND和IBD卵黄抗体水平及其子代雏鸡的ND和IBD血清抗体水平,结合SPSS 18.0软件的分析,得到免疫组种蛋ND卵黄抗体与子代ND血清抗体水平关系的最优方程为y=0.923+0.701x;免疫组种蛋IBD卵黄抗体与子代IBD血清抗体水平关系的最优方程为y=2.365+0.7x。3.IBDV强弱毒株鉴别诊断方法的建立。根据NCBI中不同毒株的VP2共保守区段序列比对分析设计两对引物(片段长度为856bp和1356bp)和选择限制性内切酶BamHI和PstI进行RT-PCR扩增,并选择片段长度为856 bp的PCR产物,胶回收其目的基因进行限制性内切酶酶切,最后验证其特异性、敏感性和重复性,建立了IBDV强弱毒株鉴别诊断的RT-PCR-RFLP方法。综上,种母鸡免疫接种ND-IBD二联灭活苗后种母鸡及其子代获得较高抗体水平;此外,分析免疫组种母鸡种蛋的ND和IBD卵黄抗体水平与子代雏鸡的ND和IBD血清抗体水平的相关性,获得了它们之间的最优方程;最后建立了一种高效简便的IBDV野毒与苗毒的鉴别诊断RT-PCR-RFLP方法,为临床和生产实践制定科学的免疫程序提供科学依据和提供高效便利的监测手段;同时,为IBD的流行病学和诊断治疗研究提供了一种新的手段。
丁丽琼[8](2017)在《胚胎免疫传染性法氏囊疫苗在肉鸡生产中的优化及应用》文中研究表明胚胎免疫的目的是降低雏鸡的死亡率、提高家禽的生产性能、降低劳动成本,发挥胚胎免疫的最大生产效益。将该技术应用于肉鸡生产中,对提高肉鸡养殖效益具有积极意义。方法:试验选用罗斯308种蛋入孵化机入孵,分为试验组和对照组。试验组(胚胎免疫)在胚胎孵化至一定胚龄(18-21d)时通过胚胎注射器注射传染性法氏囊疫苗(vHVT-013-16株)0.05 mL/枚(约2000 PFU)入出雏机孵化至21d出雏,对照组(传统免疫)直接落盘后,入出雏机孵化至21d出雏,同时人工注射相同剂量的传染性法氏囊疫苗(vHVT-013-16株)后,试验组和对照组均按照公司免疫程序后,将试验组和对照组白羽肉鸡运输至同一个肉鸡场饲养,按公司原有的免疫程序、饲养管理方法和“全进全出”的模式对试验组和对照组肉鸡进行饲养。试验结果如下:1胚胎免疫与传统免疫的比较在未对胚胎注射器针头、种蛋注射d等相关改进前,肉鸡胚胎免疫法接种氏囊疫苗,通过对比胚胎免疫与传统免疫的效果,可知第1台孵化机胚胎免疫与传统免疫的孵化率分别为86.20%和89.40%;第2台孵化机的胚胎免疫与传统免疫的孵化率分别为为87.10%和88.76%;第3台孵化机胚胎免疫与传统免疫的孵化率分别为87.80%和90.69%,第1台孵化机胚胎免疫与传统免疫的后期死胚率分别为4.46%和1.85%和;第2台孵化机胚胎免疫与传统免疫的后期死胚率分别为3.47%和1.92%;第3台孵化机的胚胎免疫与传统免疫的后期死胚率为3.34%和1.55%;抗体滴度、每周死亡淘汰率、肉鸡体重与传统免疫相近,差异不显着(P>0.05)。2胚胎免疫在生产应用中条件的优化通过对胚胎注射器的参数进行校正,最终确定针头的长度为21.08mm、针头型号为20G。通过对孵化至18.5d、18.75d、19.0d三个落盘(注射)d进行试验,后期死胚率分别为4.99%、2.37%、2.57%;孵化率分别为86.08%、86.52%、89.68%,根据孵化率及后期死胚率,最终确定胚胎免疫的注射d为19.0d。通过对三个不同周期种蛋进行试验,前期种蛋、高峰期种蛋的落盘时间小于20min,后期种蛋的落盘时间大于20min,后期死胚率分别为3.37%、2.94%、4.99%;孵化率分别为88.15%、89.02%、67.59%,因此最适合注射的种蛋生产周龄为产蛋前期和产蛋高峰期种蛋。3胚胎免疫在生产应用中的研究在对注射条件优化后,将胚蛋注射器设备与自动落盘设备对接,投入生产中使用。通过连续3d的自动化落盘注射,可知第1d胚胎免疫前期种蛋的孵化率为91.34%,低于传统免疫,高峰期种蛋的孵化率为90.78%,高于传统免疫,后期种蛋的孵化率为63.90%,高于传统免疫;第2d胚胎免疫前期种蛋的孵化率为89.35%,低于传统免疫,高峰期种蛋的孵化率为89.35%,高于传统免疫,后期种蛋的孵化率为58.89%,低于传统免疫;第3d胚胎免疫前期种蛋的孵化率为89.93%,低于传统免疫、高峰期种蛋的孵化率为89.54%,低于传统免疫,后期种蛋的孵化率均为62.12%,低于传统免疫;抗体滴度、阳性率、每周死亡淘汰率、肉鸡体重与传统免疫相近。以上结果表明胚胎免疫在改进和优化相关参数后,与传统免疫相比对白羽肉鸡肉鸡生产无不良影响,因此胚胎免疫技术可应用与白羽肉鸡肉鸡生产中替代传统人工免疫注射。
江兴华,林晓荣,星东,包松英,吴异健,王全溪[9](2017)在《鸡新城疫、传染性法氏囊病二联灭活疫苗免疫效果研究》文中认为为了观察鸡新城疫(Newcastle disease,ND)、传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)二联灭活疫苗免疫效果,使用鸡新城疫、传染性法氏囊病(HQ株)二联灭活疫苗免疫1日龄SPF鸡与商品蛋鸡,分别于免后第791天,每隔1周采血1次,监测传染性法氏囊病毒中和抗体,同时进行传染性法氏囊病毒强毒攻毒,观察免疫后的法氏囊中和抗体消涨情况及不同日龄的攻毒保护情况。结果表明:SPF鸡组免疫后IBD抗体快速上升,免疫后2周法氏囊抗体达到10 lb左右,免疫后4周达到14 lb以上,抗体维持到免疫后第91天,从免疫后5周开始到7周攻毒保护率达到100%。而商品蛋鸡组IBD母源抗体在免疫后2周下降至10 lb左右,在免疫后4周抗体达到13 lb;免疫5周后攻毒保护率达到80%以上。说明鸡新城疫、传染性法氏囊病二联灭活疫苗免疫要在免后4周才能达到较好的保护效果。
蒋大伟[10](2016)在《鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的可溶性表达及其免疫特性的研究》文中进行了进一步梳理鸡传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Disease virus,IBDV)引起的一种严重危害雏鸡免疫器官,致使雏鸡免疫失败,造成B淋巴细胞严重受损的高发性、高接触性的病毒性传染病。其主要特征是IBDV侵袭雏鸡的中枢免疫器官法氏囊,并在法氏囊B淋巴细胞中大量增殖,对该细胞造成严重杀伤,从而导致严重的免疫抑制,使机体免疫力下降,使疫苗免疫失效,给养禽业的疫病防控带来很大的困难。该病于上世纪八十年代开始在我国广泛流行,给我国的养禽业带来了巨大的经济损失。因此该病的防治防控对养殖业具有重要的价值和意义。VP2位于IBDV基因组中的A节段,是主要免疫保护性抗原,在其高变区含有主要的中和性抗原表位,因此被作为研发预防IBD亚单位疫苗的主要蛋白。目前,科研人员通过不同的表达系统表达VP2蛋白,其中以真核表达系统为主,该系统有很多优势,如表达水平较高,表达产物有翻译后加工修饰,表达产物纯度高利于后期纯化等,但由于真核表达成本高,操作也更繁琐,因此该系统并不利于大量表达VP2蛋白。尽管原核表达系统大肠杆菌表达IBDV VP2蛋白可溶性表达量较低,其主要表达产物是无活性的包涵体,且背景蛋白较多限制了其后期的纯化。但大肠杆菌表达系统的最大优势在于成本低,操作简单,为亚单位疫苗产业化提供了可能。因此,本研究主要利用大肠杆菌表达VP2蛋白,分别构建9种含有不同可溶性标签的表达载体,探讨不同可溶性标签对VP2蛋白的可溶性表达及纯化的影响。此外,本研究从技术方法上优化VP2的可溶性表达条件,明显提高了VP2蛋白的可溶性表达,利用亲和层析、分子筛和蔗糖梯度离心纯化VP2蛋白,并用电镜观察VP2蛋白形成的病毒样颗粒(VLPs)。最后,将表达的VP2蛋白及纯化形成的VLPs制备成亚单位疫苗进行免疫保护试验,结果显示制备的亚单位疫苗具有良好的免疫原性,其免疫保护作用明显高于目前的IBDV商业化疫苗。本研究为研发新型IBDV基因工程亚单位疫苗奠定了坚实基础,提供了高效的亚单位候选疫苗。1、为了解决VP2在原核大肠杆菌中可溶性表达量较低且难以纯化的技术问题,本试验将9种不同可溶性标签插入原核表达载体p ET21b,构建9种可溶性表达载体,并与VP2连接后转化至大肠杆菌进行融合表达,其中Grifin,MBP,SUMO,Thioredoxin,γ-crystallin,Ars C和Ppi B这7种标签可有效改善与VP2的可溶性表达。将这7种融合蛋白进一步通过亲和层析的方法纯化,结果显示,融合蛋白γ-crystallin-VP2的回收率最高,融合蛋白MBP-VP2的纯度最高,可达到90%以上的纯度。为了验证融合VP2蛋白和切除标签后的VP2蛋白是否存在活性,利用琼扩试验(AGP)检测这7种纯化后的融合蛋白。融合VP2蛋白和被切除标签的VP2蛋白都均能与IBDV的阳性血清抗体结合发生沉淀反应,表明含有标签的融合蛋白及被切除标签的VP2蛋白均具有活性。此外,电镜观察结果显示,融合蛋白MBP-VP2切除MBP标签后的VP2蛋白可观察到大小为25~50nm的颗粒,暗示切除标签后的VP2蛋白仍具有形成病毒样颗粒(VLPs)的能力。2、为了研究相关方法对VP2蛋白表达的影响,构建了重组表达菌株大肠杆菌BL21(DE3)p Lys S(p ET28a-VP2),通过优化表达条件,使VP2的可溶性表达有了明显提高,经琼脂扩散试验检测表达VP2含量,琼扩效价可达到1:64。利用亲和层析方法、亲和层析结合分子筛纯化及亲和层析结合蔗糖梯度离心纯化,三种方法均能对VP2起到较好的纯化作用,其中镍柱纯化产物的纯度可达90%。经电镜观察,大肠杆菌表达的VP2蛋白经纯化后可组装成与天然IBDV构象类似的VLPs。亲和层析纯化后形成的VLPs含量高于亲和层析方法结合蔗糖梯度离心纯化后形成的VLPs含量。动态光散射分析,自组装成的VLPs均一度很高,直径为25nm的颗粒。本试验明显改善了VP2可溶性表达量,初步摸索了VP2形成VLPs的条件,为进一步制备基因工程亚单位疫苗奠定了基础。3、为了对上述VP2蛋白及其形成的VLPs进行免疫原性研究,用中等毒力B87株和超强毒力0504株分别制备纯化和未纯化免疫原各6种,按一定比例加油佐剂,共制备了12种不同抗原含量的基因工程亚单位疫苗。按生物制品标准进行理化检验和无菌检验,结果均符合要求。安全试验表明所制疫苗安全性好、无不良反应。用检验合格的疫苗分别免疫SPF鸡群,并设立对照,定期采血测定各组的免疫抗体滴度并进行比较。结果显示各组呈现不同的免疫抗体水平,自制的亚单位疫苗具有良好的免疫原性,可有效提高鸡群的体液免疫水平。免疫攻毒保护试验结果显示,各组均呈现了不同程度的免疫保护作用,自制疫苗可产生良好的免疫保护作用,尤其是B87株和0504株纯化组高含量VLPs和B87株未纯化组的中琼扩效价VP2亚单位疫苗其免疫保护率均可达90%,0504株未纯化组的低琼扩效价VP2亚单位疫苗其免疫保护率高达100%,因此,确定这4种IBDV亚单位油乳剂为候选疫苗。总之,筛选的4种候选疫苗其抗体水平和免疫保护率均显着高于目前商业化基因工程亚单位疫苗和中等毒力活疫苗,且抗体水平略高于商业化的全病毒灭活苗。本研究确定的候选疫苗具有良好的免疫保护作用、安全可靠,能有效地预防鸡传染性法氏囊病的发生,对养禽业的发展具有重要的意义和价值,同时也为制备最佳性价比的亚单位疫苗奠定了坚实的基础。关于候选疫苗的免疫期、保存期及其相关免疫程序的制定等问题,有待今后进一步深入研究。
二、鸡新城疫、鸡传染性法氏囊病二联活疫苗的研究(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、鸡新城疫、鸡传染性法氏囊病二联活疫苗的研究(论文提纲范文)
(1)“固元颗粒”免疫增强剂研制及其在鸡疫苗免疫中的应用(论文提纲范文)
中文摘要 |
ABSTRACT |
英文缩略词表 |
前言 |
第一篇 文献综述 |
第一章 中药免疫增强剂的研究进展 |
1.1 免疫增强剂的分类 |
1.2 中药免疫增强剂概述 |
1.3 中药免疫增强剂的有效成分 |
1.4 中药免疫增强剂的作用机理 |
1.5 人参、黄芪免疫增强作用研究进展 |
1.6 中药免疫增强剂在养禽业中的应用 |
第二章 中药对TOLL样受体和信号传导的研究进展 |
2.1 先天性免疫 |
2.2 ToLL样受体 |
2.3 中药对TLRs信号传导途径的研究 |
2.4 中药对信号转导的影响 |
第二篇 试验研究 |
第一章 “固元颗粒”制剂工艺研究 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
1.3 结果 |
1.4 讨论 |
1.5 小结 |
第二章 “固元颗粒”质量标准研究 |
2.1 材料 |
2.2 方法 |
2.3 结果 |
2.4 讨论 |
2.5 小结 |
第三章 “固元颗粒”的安全性和有效性研究 |
3.1 材料 |
3.2 试验方法 |
3.3 试验结果 |
3.4 讨论 |
3.5 小结 |
第四章 “固元颗粒”对蛋鸡TLR4 信号通路及胞内分子的调节 |
4.1 材料 |
4.2 实验方法 |
4.3 结果 |
4.4 讨论 |
4.5 小结 |
第五章 “固元颗粒”在蛋鸡疫苗免疫中的应用 |
5.1 材料 |
5.2 方法 |
5.3 结果 |
5.4 讨论 |
5.5 小结 |
结论 |
参考文献 |
导师简介 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
致谢 |
(2)鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病三联灭活疫苗对不同日龄雏鸡的免疫效力研究(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 疫苗、抗原及病毒 |
1.1.2 试验动物 |
1.2 方法 |
1.2.1 新支法三联苗免疫不同日龄SPF雏鸡试验 |
1.2.2 新支法三联苗免疫不同日龄普通雏鸡试验 |
1.2.3 新支法三联苗免疫28日龄SPF雏鸡持续期试验 |
1.2.4 抗体效价测定 |
1.2.4.1 ND HI抗体、IB HI抗体效价测定 |
1.2.4.2 血清IBD中和抗体测定 |
2 结 果 |
2.1 新支法三联苗免疫不同日龄SPF雏鸡试验结果 |
2.2 新支法三联苗免疫不同日龄普通雏鸡试验结果 |
2.3 新支法三联苗免疫28日龄SPF雏鸡持续期试验结果 |
2.3.1 ND和IB HI抗体测定结果 |
2.3.2 IBD中和抗体测定结果 |
3 讨 论 |
4 结 论 |
(3)新城疫多联疫苗研究进展(论文提纲范文)
1 以新城疫为基础的病毒类联苗 |
1.1 以新城疫为基础的二联疫苗 |
1.1.1 新城疫与传染性支气管炎联苗 |
1.1.2 新城疫与减蛋综合征联苗 |
1.1.3 新城疫与禽流感联苗 |
1.1.4 新城疫与传染性法氏囊病联苗 |
1.2 以新城疫为基础的三联疫苗 |
1.3 以新城疫为基础的四联疫苗 |
2 新城疫与细菌类联合疫苗 |
3 展望 |
(4)鸡新城疫-传染性法氏囊病-禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对雏鸡的免疫效力研究(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 疫苗 |
1.1.2 抗原 |
1.1.3 攻击用强毒 |
1.1.4 试验用鸡 |
1.1.4. 1 SPF鸡 |
1.1.4. 2 普通鸡 |
1.2 方法 |
1.2.1 1、7日龄雏鸡免疫试验 |
1.2.1. 1 SPF雏鸡免疫试验 |
1.2.1. 2 普通雏鸡免疫试验 |
1.2.2 7、10、14、21日龄雏鸡免疫试验 |
1.2.2. 1 SPF雏鸡免疫试验 |
1.2.2. 2 普通雏鸡免疫试验 |
2 结果 |
2.1 1日龄和7日龄雏鸡免疫试验结果 |
2.1.1 SPF雏鸡免疫试验结果 |
2.1.2 普通雏鸡免疫试验结果 |
2.2 7、10、14、21日龄雏鸡免疫试验结果 |
2.2.1 SPF雏鸡免疫试验结果 |
2.2.2 普通雏鸡免疫试验结果 |
3 讨论 |
(5)禽用活疫苗外源病毒污染情况的调查研究(论文提纲范文)
1材料与方法 |
1.1材料 |
1.1.1疫苗共抽检禽用活疫苗8种28批 (表1) 。 |
1.1.2主要试剂 |
1.2方法 |
1.2.1实验动物准备 |
1.2.2首免 |
1.2.3二免 |
1.2.4分离血清 |
1.2.5ELISA抗体检测 |
1.2.6琼脂抗体检测 |
1.2.7HI检测 |
2检验结果 |
3讨论 |
(6)ND-IBD二联灭活苗对商品蛋雏鸡免疫效果及机制研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩词列表 |
第一章 文献综述 |
1 ND与IBD研究进展 |
2 ND和IBD疫苗的研究进展 |
2.1 ND与IBD活苗的研究进展 |
2.2 ND与IBD灭活苗的研究进展 |
2.3 疫苗佐剂 |
2.4 ND与IBD的疫苗免疫研究进展及注意事项 |
3 ND-IBD二联灭活苗研究进展 |
4 疫苗对免疫因子的影响 |
5 本课题研究的目的与意义 |
第二章 ND-IBD二联灭活疫苗免疫1、7日龄商品蛋鸡的免疫效果研究 |
1 材料与方法 |
1.1 试验动物 |
1.2 毒株 |
1.3 试验用疫苗 |
1.4 试剂及试剂盒 |
1.5 主要试验仪器 |
1.6 试验用饲料 |
1.7 试验基地 |
1.8 试验数据分析相关软件 |
2 试验设计 |
2.1 动物分组 |
2.2 抗体检测 |
2.3 攻毒保护试验 |
2.4 引物的设计与合成 |
2.5 组织RNA抽提 |
2.6 cDNA的合成 |
2.7 实时荧光定量PCR |
3 结果与分析 |
3.1 商品蛋鸡血清IBD抗体水平检测 |
3.2 ND-IBD二联灭活疫苗对商品蛋鸡IBD抗体的影响 |
3.3 ND-IBD二联灭活疫苗对商品蛋鸡ND抗体的影响 |
3.4 攻毒保护试验结果 |
3.5 ND-IBD二联灭活疫苗对商品蛋鸡法氏囊中CD4~+、CD8~+、IL-6、IFN-βmRNA表达量的影响 |
3.6 ND-IBD二联灭活疫苗对商品蛋鸡脾脏中CD4~+、CD8~+、IL-6、IFN-βmRNA表达量的影响 |
4 讨论 |
第三章 ND-IBD二联灭活疫苗与IBD活疫苗免疫7日龄商品蛋雏鸡的效果比较研究 |
1 材料 |
1.1 试验动物 |
1.2 毒株 |
1.3 试验用疫苗 |
1.4 试剂及试剂盒 |
1.5 主要试验仪器 |
1.6 试验用饲料 |
1.7 试验基地 |
1.8 试验数据分析相关软件 |
2 试验设计 |
2.1 动物分组 |
2.2 抗体检测 |
2.3 攻毒保护试验 |
2.4 引物设计与合成 |
2.5 组织RNA抽提 |
2.6 cDNA的合成 |
2.7 实时荧光定量PCR |
3 结果与分析 |
3.1 ND-IBD二联灭活疫苗与弱毒活苗对商品蛋鸡IBD抗体的影响 |
3.2 攻毒保护试验结果 |
3.3 ND-IBD二联灭活疫苗与弱毒活苗对商品蛋鸡法氏囊中CD4~+、CD8~+、IL-6、IFN-βmRNA表达量的影响 |
3.4 ND-IBD二联灭活疫苗与弱毒活苗对商品蛋鸡脾脏中CD4~+、CD8~+、IL-6、IFN-βmRNA表达量的影响 |
4 讨论 |
第四章 结论 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
(7)ND-IBD二联灭活苗对种母鸡的免疫效果及IBDV强弱毒株鉴别诊断研究(论文提纲范文)
缩略词表 |
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 文献综述 |
1 IBD研究进展 |
1.1 IBD流行病学特点 |
1.2 IBD病原学特征 |
1.3 IBDV基因组结构与VP2蛋白 |
1.4 IBDV毒株 |
1.5 IBDV的诊断 |
1.6 IBD的防治 |
2 ND研究进展 |
2.1 ND流行病学特点 |
2.2 ND病原学特征 |
2.3 ND的诊断 |
2.4 ND的防制 |
3 ND和IBD疫苗的研究进展 |
3.1 IBD疫苗研究进展 |
3.2 ND疫苗研究进展 |
3.3 疫苗的基本要求 |
3.4 免疫失败的原因 |
4 疫苗免疫监测方法 |
5 PCR-RFLP研究进展 |
5.1 PCR-RFLP的基本原理 |
5.2 PCR-RFLP技术的应用 |
6 本研究目的和意义 |
第二章 ND-IBD二联灭活苗对100日龄种母鸡的免疫效果研究 |
1 材料 |
1.1 试验材料 |
1.2 试验动物 |
1.3 主要试剂 |
1.4 主要仪器 |
2 试验方法 |
2.1 试验分组 |
2.2 免前抗体水平检测 |
2.2.1 HA试验(微量法) |
2.2.2 HI试验(微量法) |
2.2.3 TCVN(固定病毒稀释血清) |
2.3 免后抗体水平检测 |
2.4 种蛋的收集 |
2.5 子代雏鸡抗体水平检测 |
2.6 攻毒保护试验 |
2.7 数据处理 |
3 结果分析 |
3.1 ND-IBD二联灭活苗对种母鸡ND抗体水平的影响 |
3.2 ND-IBD二联灭活苗对种母鸡IBD抗体水平的影响 |
3.3 四批次孵化雏鸡ND抗体水平的分析 |
3.4 四批次孵化雏鸡IBD抗体水平的分析 |
3.5 攻毒保护结果 |
3.6 中和试验中DF-1细胞病变观察 |
4 讨论 |
第三章 ND和IBD卵黄抗体与子代血清抗体的相关性分析 |
1 材料 |
1.1 试验材料 |
1.2 主要试剂 |
1.3 主要仪器 |
2 试验方法 |
2.1 试验分组 |
2.2 氯仿法提取卵黄抗体 |
2.3 HI试验和ELISA试验 |
2.4 数据处理 |
2.5 结果的比对 |
3 结果分析 |
3.1 种蛋ND卵黄抗体与子代血清抗体水平几何均值 |
3.2 种蛋IBD卵黄抗体与子代血清抗体水平几何均值 |
3.3 免疫组种蛋ND卵黄抗体与子代血清ND抗体水平相关性分析 |
3.4 免疫组种蛋IBD卵黄抗体与子代血清抗体水平相关性分析 |
3.5 血清抗体水平与卵黄抗体水平比对结果 |
4 讨论 |
第四章 IBDV强弱毒株鉴别诊断方法的建立 |
1 材料 |
1.1 试验材料 |
1.2 主要试剂 |
1.3 主要仪器 |
2 试验方法 |
2.1 引物的设计与合成 |
2.2 病毒RNA提取 |
2.3 RT-PCR以及PCR扩增 |
2.4 PCR产物测序 |
2.5 琼脂糖凝胶回收目的基因 |
2.6 限制性内切酶BamHI和PstI进行酶切 |
2.7 特异性试验 |
2.8 敏感性试验 |
2.9 重复性试验 |
2.10 病料检测 |
3 结果分析 |
3.1 BC6-85和B87 VP2基因的RT-PCR扩增结果 |
3.2 BC6-85和B87酶切结果 |
3.3 特异性试验结果 |
3.4 敏感性试验结果 |
3.5 重复性试验结果 |
3.6 病料PCR-RFLP检测结果 |
4 讨论 |
第五章 结论 |
参考文献 |
附录 |
攻读学位期间的学术论文与研究成果 |
致谢 |
(8)胚胎免疫传染性法氏囊疫苗在肉鸡生产中的优化及应用(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 文献综述 |
1 鸡传染性法氏囊病的概述 |
2 胚胎免疫的研究进展 |
2.1 胚胎免疫概述 |
2.2 胚胎免疫的作用机理 |
2.3 鸡胚胎免疫研究进展 |
2.4 传染性法氏囊疫苗胚胎免疫的作用机理 |
3 胚胎免疫在生产应用中的现状 |
4 本研究的目的及其意义 |
第二章 胚胎免疫与传统免疫的比较 |
1 试验材料与方法 |
1.1 试验材料 |
1.2 试验动物及处理 |
1.3 试验方法 |
1.4 试验数据处理 |
2 |
2.2 试验结果与分析 |
2.2.1 胚胎免疫与传统免疫孵化率的比较 |
2.2.2 胚胎免疫与传统免疫后期死胚率(18. 5-21d未出雏的死胚)的比较 |
2.2.3 胚胎免疫与传统免疫白羽肉鸡抗体滴度的比较 |
2.2.4 胚胎免疫与传统免疫白羽肉鸡死亡淘汰率的比较 |
2.2.5 胚胎免疫与传统免疫白羽肉鸡体重的比较 |
2.3 讨论 |
第三章 胚胎免疫在生产中条件的优化 |
1 试验材料与方法 |
1.1 试验材料 |
1.2 试验动物及处理 |
1.3 试验方法 |
1.4 数据处理 |
2 结果与分析 |
2.1 注射器设备针头参数对胚胎免疫的影响 |
2.2 种蛋落盘(注射)d对胚胎免疫的影响 |
2.3 种蛋周期对胚胎免疫的影响 |
3 讨论 |
3.1 注射器设备针头参数对胚胎免疫的影响 |
3.2 种蛋落盘(注射)d对胚胎免疫的影响 |
3.3 种蛋周期对胚胎免疫的影响 |
第四章 胚胎免疫在生产应用中的研究 |
1 试验材料与方法 |
1.1 试验材料 |
1.2 试验动物及处理 |
1.3 试验方法 |
1.4 数据处理 |
2 试验结果与分析 |
2.1 胚胎免疫对白羽肉鸡孵化率的影响 |
2.2 胚胎免疫对白羽肉鸡后期死胚率的影响 |
2.3 胚胎免疫对白羽肉鸡抗体滴度的影响 |
2.4 胚胎免疫对白羽肉鸡抗体阳性率的影响 |
2.5 胚胎免疫对白羽肉鸡死亡淘汰率的影响 |
2.6 胚胎免疫对白羽肉鸡体重的影响 |
3 讨论 |
第五章 全文总结 |
参考文献 |
致谢 |
(9)鸡新城疫、传染性法氏囊病二联灭活疫苗免疫效果研究(论文提纲范文)
1 材料 |
1.1 疫苗及毒株 |
1.2 试验鸡 |
2 方法 |
2.1 试验分组 |
2.1.1 SPF鸡组 |
2.1.2 商品蛋鸡组 |
2.2 免疫方法 |
2.3 法氏囊抗体监测 |
2.4 攻毒保护试验 |
3 结果 |
3.1 法氏囊中和抗体监测结果 |
3.2 攻毒保护试验结果 |
4 讨论 |
(10)鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的可溶性表达及其免疫特性的研究(论文提纲范文)
致谢 |
中文摘要 |
1 文献综述 |
1.1 鸡传染性法氏囊病的概述 |
1.2 传染性法氏囊病病毒的生物学特性 |
1.3 IBDV的基因组 |
1.4 IBDV的编码蛋白 |
1.5 IBDV的毒力及致病性研究 |
1.6 IBDV VP2蛋白的B细胞表位研究进展 |
1.7 IBD的诊断 |
1.8 IBD疫苗的研究进展 |
1.9 目前存在的问题及本研究的目的意义 |
2 9种标签对IBDV VP2蛋白可溶性表达及纯化的影响 |
引言 |
2.1 材料 |
2.2 试验方法 |
2.3 结果与分析 |
2.4 讨论 |
2.5 本章小结 |
3 鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的原核表达与纯化 |
引言 |
3.1 材料 |
3.2 试验方法 |
3.3 结果与分析 |
3.4 讨论 |
3.5 本章小结 |
4 IBDV VP2 蛋白免疫原性的研究 |
引言 |
4.1 材料 |
4.2 试验方法 |
4.3 结果与分析 |
4.4 讨论 |
4.5 本章小结 |
5 全文总结 |
参考文献 |
ABSTRACT |
四、鸡新城疫、鸡传染性法氏囊病二联活疫苗的研究(论文参考文献)
- [1]“固元颗粒”免疫增强剂研制及其在鸡疫苗免疫中的应用[D]. 王申锋. 吉林大学, 2020(08)
- [2]鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病三联灭活疫苗对不同日龄雏鸡的免疫效力研究[J]. 沈佳,史爱华,章振华,李林,景小冬,张建伟,郑小兰,姜北宇. 中国畜牧兽医, 2019(03)
- [3]新城疫多联疫苗研究进展[J]. 汪宏才,温国元,罗青平. 湖北农业科学, 2018(24)
- [4]鸡新城疫-传染性法氏囊病-禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对雏鸡的免疫效力研究[J]. 章振华,李林,景小冬,张建伟,沈佳,史爱华,郑小兰,姜北宇. 动物医学进展, 2018(06)
- [5]禽用活疫苗外源病毒污染情况的调查研究[J]. 刘丹,侯力丹,李启红,黄小洁,李俊平,杨承槐. 中国兽药杂志, 2018(04)
- [6]ND-IBD二联灭活苗对商品蛋雏鸡免疫效果及机制研究[D]. 星东. 福建农林大学, 2017(01)
- [7]ND-IBD二联灭活苗对种母鸡的免疫效果及IBDV强弱毒株鉴别诊断研究[D]. 赖隆永. 福建农林大学, 2017(01)
- [8]胚胎免疫传染性法氏囊疫苗在肉鸡生产中的优化及应用[D]. 丁丽琼. 福建农林大学, 2017(01)
- [9]鸡新城疫、传染性法氏囊病二联灭活疫苗免疫效果研究[J]. 江兴华,林晓荣,星东,包松英,吴异健,王全溪. 黑龙江畜牧兽医, 2017(06)
- [10]鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的可溶性表达及其免疫特性的研究[D]. 蒋大伟. 河南农业大学, 2016(06)