一、“新城疫、禽流感病毒快速检测技术研究”取得重大突破(论文文献综述)
张芬芳[1](2021)在《2017-2020年眉县5种动物疫病免疫抗体检测与分析》文中进行了进一步梳理口蹄疫(Foot and Mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的以偶蹄动物为主的急性、热性、高度传染性疫病。世界大部分地区口蹄疫都时有发生,是全球最重要的动物健康问题之一。新城疫(Newcastle Disease,ND),是由副粘病毒科副粘病毒亚科腮腺炎病毒属的禽副粘病毒I型引起的高度接触性禽类烈性传染病。在我国北方冬春季节交替时易爆发疫情,对蛋鸡会影响产蛋量。高致病性禽流感(Highly Pathogenic Avian Influenza,HPAI)在禽类中传播快、危害大、病死率高。近年来,随着眉县畜牧业蓬勃发展,全县畜禽存栏量逐年增加,畜禽跨区域引种运输日益频繁,由此所引起的猪、牛、羊、鸡等动物疫病传播风险日益加剧,使得眉县各养殖场(户)面临动物疫病的威胁日益严重。因此,通过对相关畜禽疫病抗体进行检测,可以及时掌握该地畜禽主要疫病的抗体水平,科学评估免疫效果,以便查补缺漏,指导抗体水平低下的畜禽或地区及时补免,对有效防范该地区发生重大动物疫病以及推动该县畜牧业高质量发展具有重大指导意义。本研究根据宝鸡市动物疫病监测部署和要求、动物疫病诊断技术执行规程,2017~2020年对眉县地区11个镇街共抽检血清样品5343份,采用正向间接血凝抗体试验、酶联免疫吸附试验、血凝与血凝抑制试验分别对猪O型口蹄疫、牛O型口蹄疫、羊O型口蹄疫、鸡新城疫、鸡高致病性禽流感的免疫抗体进行检测,分析不同年份、不同季节、不同区域的免疫抗体合格率,获得如下研究结果。1.眉县地区不同年份中,2017~2020年猪、牛、羊O型口蹄疫、新城疫、高致病性禽流感5种疫病免疫抗体合格率分别为:84.34%、97.88%、90.69%、93.94%和96.13%,均高于国家免疫抗体合格率70%的要求,相对于其他4个病种,猪O型口蹄疫还有待进一步加强。2.2017~2020年眉县地区不同季节中,春季猪、牛、羊O型口蹄疫、新城疫、高致病性禽流感5种疫病免疫抗体合格率分别为:94.75%、99.06%、88.96%、92.73%、93.73%,秋季猪、牛、羊O型口蹄疫、新城疫、高致病性禽流感5种疫病免疫抗体合格率分别为:88.99%、100%、100%、95.67%、95.82%。秋季5种疫病免疫抗体合格率高于春季的,但差异不显着。3.2017~2020年眉县地区不同区域中,连续4年5种疫病免疫抗体全部合格的镇街有5个:青化、横渠、首善、常兴、金渠,4个病种免疫抗体合格的镇街2个:齐镇、马家,3个病种免疫抗体合格的镇街有3个:小法仪、汤峪、槐芽(均无牛),1个病种免疫抗体合格的有1个镇街:营头。对于不达标的镇街,涉及相关不达标的疫病,要及时进行补免,筑牢县域动物疫病防控屏障。
闫梦杨[2](2020)在《野生动物园野禽禽流感、新城疫抗体水平检测及初步分析》文中研究说明目前,国内外研究人员对于野生动物疫病展开的研究较少。野鸟是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、禽流感病毒(Avian Influenza virus,AIV)的自然宿主。也是潜在的NDV和AIV病原携带者和传染源。为做好野生动物园鸟类的疫病防控,了解目前野生动物园鸟类的免疫状况,开展了本次研究。应用血凝和血凝抑制试验对合肥野生动物园和郑州市动物园的鸟类在疫苗免疫前后抗体水平进行了检测。选取合肥野生动物园和郑州市动物园25种野生禽类共207只。其中有孔雀35只、白鹇20只、马鸡8只、白腹锦鸡5只、红腹锦鸡9只、珠鸡2只、火鸡3只、环颈雉6只、白冠长尾雉9只、红腹角雉2只、白鹤17只、白枕鹤13只、丹顶鹤10只、灰冠鹤14只、白鹳17只、火烈鸟23只、赤麻鸭2只、鸿雁2只、天鹅4只、鸳鸯4只、斑头雁2只。2019年秋防期间对所有野禽进行两种疾病的疫苗接种。用血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验方法分别在免疫接种前、免疫接种后30d、60d对试验动物进行H5、H7和H9亚型禽流感和新城疫抗体检测。免疫前野生禽类H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为6.4log2、5.9log2、6.6log2和5.6log2。雉科野禽免疫前H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为6.2log2、6.0log2、5.9log2和4.8log2,鹤科野禽免疫前H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为7.5log2、5.8log2、7.8log2和7.1log2,鹳形目野禽免疫前H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为5.6log2、6.0log2、6.7log2和5.9log2,鸭科野禽免疫前H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为6.2log2、5.7log2、6.6log2和4.9log2。10只野禽H5亚型禽流感抗体滴度(27)4log2,4只野禽H7亚型禽流感抗体滴度(27)4log2,5只野禽H9亚型禽流感抗体滴度(27)4log2,33只野禽新城疫抗体滴度(27)4log2。免疫接种后30天野生禽类H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为10.1log2、10.0log2、10.0log2和9.6log2,雉科野禽免疫接种后30天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为10.0log2、10.0log2、9.9log2和9.6log2,鹤科野禽免疫接种后30天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为10.3log2、10.2log2、10.3log2和9.9log2。鹳形目野禽免疫接种后30天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为10.0log2、9.8log2、10.1log2和9.1log2。鸭科野禽免疫接种后30天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为9.7log2、9.7log2、9.9log2和9.4log2。免疫接种后60天野生禽类H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为8.9log2、9.0log2、9.1log2和7.7log2,雉科野禽免疫接种后60天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为8.7log2、9.0log、8.9log2和7.4log2,鹤科野禽免疫接种后60天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为9.3log2、9.3log、9.6log2和8.7log2,鹳形目野禽免疫接种后60天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为8.7log2、8.5log2、9.0log2和6.8log2,鸭科野禽免疫接种后60天H5、H7、H9亚型禽流感和新城疫抗体滴度分别为9.1log2、8.9log2、9.3log2和7.8log2。结果表明免疫前不同种野禽间禽流感、新城疫抗体水平差异较大,同种野禽个体间抗体水平差异较大。免疫接种后30d和60d抗体滴度高,没有出现应激反应。野禽使用家禽疫苗进行免疫是安全、有效的。相同疫苗和免疫程序对不同野禽的免疫效果不同,需要针对野禽的免疫抗体情况制定切实可行且安全有效的免疫程序。
李慧昕,刘胜旺[3](2019)在《新中国成立70周年兽医科学研究进展》文中研究说明本文从兽医学发展历史沿革,各时期国家对兽医事业的规划,国家对兽医科学研究的支持,兽医科研人员在基础研究,基础应用和应用研究方面的进展,取得的重大成果以及在党中央的领导下对动物疾病的综合防控效果等方面,对我国兽医事业取得的研究进展进行简要总结和回顾,并对未来兽医工作进行了展望,以期对兽医领域从业人员提供借鉴和参考.
贝松涛[4](2018)在《2014-2017年东莞市茶山镇禽流感和新城疫抗体抗原监测及分析》文中进行了进一步梳理东莞市茶山镇的家禽养殖产业发达,地处珠三角特大城市群核心地理位置的缘故,在改革开放后,茶山镇的家禽养殖产业开始蓬勃发展,并逐步发展成为珠三角内周边城市肉源性食品的供应基地之一。尤其是本镇特色白鸽养殖产业,在顶峰时期,茶山镇的种鸽总存栏量一度超过200万羽。近年,因为环保政策等原因,茶山镇家禽养殖总量有所下降,尤其是肉鸡养殖比例已大幅减少。截至2016年底,茶山镇种鸽存栏量依然超过80万羽,每年出栏销往珠三角城市群的乳鸽接700万羽,另茶山镇12家农贸市场每年还从外地调入100多万羽肉鸡等家禽用于当地内销。由此可见,茶山镇每年的家禽进出流动数量比较庞大。禽流感和新城疫是影响家禽业危害最严重的两个疾病,均被世界动物卫生组织(OIE)定义成A类动物传染病。目前在世界上的许多国家和地区均有发生,给养殖户带来严重的济损失。近年来时常报道禽流感感染人的情况,严重威胁着人类的公共卫生安全。因此,开展禽流感、新城疫的监测和流行病学调查,摸清两个病在广东省东莞市茶山镇的流行动态,对指导当地的疫病防控具有重要的意义。本研究通过采样监测2014年至2017年茶山镇三个监测点(茶山农贸市场、茶山养殖场、茶山散养户)活禽中H5亚型禽流感、新城疫免疫后抗体合格率以及抗原阳性率情况,综合性评估茶山镇禽流感、新城疫防控情况。在茶山农贸市场采集了1437份血清进行H5亚型禽流感抗体检测,984份血清用于新城疫抗体检测,1128份拭子用于检测禽流感病毒,444份拭子用于检测新城疫病毒。在茶山规模养殖场采集了1074份血清用于H5亚型禽流感抗体检测,1140份血清用于新城疫抗体检测,1674份拭子用于禽流感病毒检测,834份拭子用于新城疫病毒检测。散养户中采集了420份血清用于H5亚型禽流感抗体检测,459份血清用于新城疫抗体检测,816份拭子用于检测禽流感病原,207份拭子用于检测新城疫病原。结果显示茶山农贸市场中禽流感抗体平均合格率为53.35%,H9亚型禽流感病毒平均阳性率为69.94%,通用型引物检测禽流感病毒平均阳性率为65.69%,新城疫抗体平均合格率53.66%。茶山养殖场中禽流感抗体平均合格率为43.22%,H9禽流感病毒平均阳性率为19.85%,通用型引物检测禽流感病毒平均阳性率为33.09%,新城疫抗体平均合格率平均合格率维持在76.84%。茶山散养户中禽流感抗体平均合格率维持在58.57%,H9禽流感病毒平均阳性率为19.85%,通用型引物检测禽流感病毒平均阳性率为33.09%,新城疫抗体平均合格率维持在63.40%。新城疫病原只在2017茶山散养户中检测到15例,阳性率为9.26%。2014-2017年茶山镇农贸市场禽流感、新城疫抗体合格率均低于70%的保护标准,且禽流感的阳性率除2017年以外一直居高不下。茶山镇规模养殖场新城疫和禽流感病毒阳性率都不高,但是禽流感抗体水平逐年下降的情况要引起足够的重视。散养户中禽流感和新城疫抗体合格率呈升高趋势,禽流感阳性率除2016年外都较低。通过对2017年广东省东莞市茶山镇分离到的4株H9N2禽流感病毒进行基因遗传进化分析,结果表明2017年在广东地区分离到的4株H9N2亚型禽流感病毒中E46毒株HA基因属于G1分支,而其余3株H9N2毒株(F110、E55、16344)属于Y280分支,并且E46 HA基因与2016年-2017年在数据库上传的H9N2毒株序列高度同源。F110、E55、16344毒株HA基因均与2015-2017年我国流行的毒株在同一进化分支。E46毒株的NA基因属于G1来源的进化分支,其余毒株均属于Y280来源的进化分支。
吴宇颖[5](2018)在《中山市三角镇畜禽疫病防疫情况调查分析》文中认为广东省有良好的地理位置和环境,适合养殖业的发展,再加上其制造业发达,吸引了很多外来务工人员,肉蛋奶的市场需求量很大。2016年,广东省畜牧业生产总值达到了1221.80亿元,肉类和蛋类总产量分别在全国第8位和第18位(国家统计局,2016)。三角镇的畜禽养殖历史悠久,是中山市重要的养殖重镇,但是目前在农村基层多数以农户为单位,养殖形式分散,统一管理难度较大,各类畜禽疫病情还是时有发生,鸡禽流感疫情更是有多次严重发生,肉鸡养殖业损失惨重,严重影响了畜禽养殖业的健康发展,影响了畜牧业经济的增长和农民增收,降低了动物来源食品的安全性。面对当前形势,笔者以中山市三角镇为研究范围,通过查阅图书馆文献、书籍等相关资料,并调查走访了三角镇兽医站和村级防疫站等部门,分别收集中山市三角镇近五年来(2013~2017年)生猪和肉鸡的主要养殖品种、出栏数量、存栏数量、养殖场数量、疫病发生种类、发病数量、死亡数量、免疫注射种类和数量等一系列数据,了解该镇近五年来畜禽养殖业发展和疫病防控工作进展情况。另外,通过调查统计兽医站近年来的人员配备、防疫人员的年龄学历、防疫防控投入资金,以及防控疫苗和药品的采购、运输、储存、使用等基本情况,运用文献分析法、调查研究法、综合分析法等得出研究结论。调查发现,2013~2017年三角镇的畜禽养殖品种为高端大花白猪、麻黄鸡和沙栏鸡,重点防控疫情为猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪链球菌病、鸡新城疫、禽流感、马立克病、传染性法氏囊病等,各类疫病免疫率在65%~100%,五年间主要发生的疫情为2014年发生的禽流感。而三角镇防疫工作在各方面还存在很多问题亟待改进,包括防疫人员少、专业型人才极度缺乏、防疫体制不健全、疫病追溯困难、疫苗储存不规范、病死畜无害化处理设施不全等。针对所发现的问题,结合三角镇实际情况,建议应从加大对养殖户的宣传培训、提高防疫人员的整体素质、加大基层防疫资金投入、加大畜禽养殖监管和行政处罚力度、建立健全重大疫情监控体系、建立动物疫病可追体系、建立健全重大动物疫病应急处理机制等几方面着手,构建完整的基层畜禽疫病防控网络,以促进三角镇及整个中山市的畜禽养殖业健康发展。
向华[6](2018)在《可视化同步共检六种禽传染病基因芯片检测技术研究》文中进行了进一步梳理禽白血病病毒(Avian leucosis virus,ALV)、马立克病病毒(Marerk’s disease virus,MDV)、传染性法氏囊病病毒(Infectious butsal disease virus,IBDV)是引发家禽免疫抑制病的主要病毒性病原。新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)、传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)是引发家禽呼吸道疾病的重要病毒性病原。由于传统的诊断检测方法难以进行多病原或多病原型的联合检测,使生产上发生的同类型疫病短时间内难以鉴别。考虑到家禽疫病防控急需,基于上述六种病原的高通量同步检测和部分病原同步分型检测方法尚未见报道。本研究结合金标银染显色技术,构建ALV-MDV-IBDV-NDV-AIV-ILTV六种禽病毒病同步共检基因芯片和H5-H7-H9-N1-N9-N2六种禽流感病毒亚型的同步共检可视化基因芯片,对芯片的制备及检测过程进行条件优化,并对临床初步应用进行评价。研究主要结果如下:一、ALV-MDV-IBDV-NDV-AIV-ILTV共检基因芯片构建、检测条件优化和质量评价1.ALV-MDV-IBDV-NDV-AIV-ILTV共检基因芯片构建与检测条件优化。以ALV、MDV、IBDV的全基因组为模板,克隆得到ALV-ENV、MDV-MEQ及IBDV-VP2基因序列,设计寡核苷酸探针,成功制备ALV-MDV-IBDV-AIV-NDV-ILTV共检基因芯片(简称共检芯片Ⅰ)。对基因芯片的制备过程和检测条件进行优化,发现寡核苷酸探针最优使用浓度为50μmol/L,40℃条件下杂交2h,Nanogold-Streptavidin链霉亲和素溶液的使用浓度为4μg/mL,染色时间为5min,对阳性标本最终银染显色可见明显检测信号。2.对构建的此基因芯片进行质量评价。芯片检测特异性试验显示,ALV、MDV、IBDV、NDV、AIV、ILTV之间无交叉反应,特异性好,且以IBV为模板制备的PCR扩增标记不与共检芯片Ⅰ杂交;敏感性试验显示,芯片的最低检测浓度是1pg/μl。稳定性试验发现,基因芯片能在常温条件下进行有效保存不少于60 d,4℃条件下保存不少于75 d。二、禽流感H5-H7-H9-N1-N9-N2六种亚型联合共检可视化基因芯片的构建、检测条件优化和质量评价1.H5-H7-H9-N1-N9-N2共检基因芯片构建与检测条件优化。以H5N6、H7N9和H9N2禽流感病毒毒株的全基因组,以及合成制备的H5N1毒株的NA保守序列片段,克隆得到H5-HA、H7-HA、H9-HA、N1-NA、N9-NA和N2-NA共6个靶基因,并成功制备出H5-H7-H9-N1-N9-N2共检基因芯片(简称共检芯片Ⅱ);对基因芯片的制备过程和检测条件进行优化,发现使用浓度为50μmol/L的寡核苷酸探针与含有生物素标记的靶基因PCR产物45℃条件下杂交2h,Nanogold-Streptavidin链霉亲和素溶液的最佳使用浓度为4μg/mL,银染7min,阳性标本银染显色可见明显的检测信号。2.对构建的此基因芯片进行质量评价。基因芯片的特异性试验显示芯片特异性高,无交叉反应,且以ALV、MDV、IBDV、NDV、IBV、ILTV为模板制备的PCR扩增标记不与共检芯片Ⅱ杂交;敏感性试验显示芯片的敏感性好,H5和N1亚型芯片的最低检测浓度是1×10-10ngul,H7亚型芯片的最低检测浓度是1×10-8ngul,N9亚型检测芯片的最低检测浓度是1×10-7ngul,H9和N2亚型芯片的最低检测浓度是1×10-8ngul,均不同程度的高于RT-PCR检测技术;稳定性试验显示,本研究建立的可视化芯片4℃条件下可保存不少于90d。三、共检芯片Ⅰ和共检芯片Ⅱ的初步临床应用将本研究构建的两套基因芯片对四川安岳、彭州、泸州、广元、自贡、乐山、广汉、温江、重庆、山东等地区疑似患禽白血病、马立克病、传染性法氏囊病、禽流感、新城疫和传染性喉气管炎的155份临床送检样品进行检测,其中,六类禽病毒病基因芯片的检测结果为ALV、MDV、IBDV、NDV、AIV、ILTV的阳性检出率分别为7%、1.2%、0.6%、5.8%、14.8%、0%,其中混合感染ALV和AIV为4.5%,NDV和AIV为2.5%,ALV、MDV和IBDV为0.6%,ALV、AIV和NDV为1.2%,该检测方法的敏感性略高于PCR/RT-PCR检测方法,二者方法的符合率高于98%;H5-H7-H9-N1-N9-N2六种禽流感病毒亚型的同步共检芯片的检测结果为H5、H7、H9、N1、N9、N2的阳性检出率分别为4.3%、0%、43.4%、0%、34.7%、4.3%,其中H9N9亚型检出率为21.7%,H9N2亚型检出率为4.3%,H5和H9亚型共同感染检出率为4.3%,该检测方法与RT-PCR方法相比,敏感性为100%,特异性高于92.8%,符合率高于95.6%,对二者结果进行差方检验的Kappa值均>0.80,表明两种检测方法具有很好的一致性。综上,本研究成功构建ALV-MDV-IBDV-NDV-AIV-ILTV六种禽病毒病同步共检基因芯片和H5-H7-H9-N1-N9-N2六种禽流感病毒亚型同步共检基因芯片,两种基因芯片具备较好的特异性、灵敏性和稳定性,能有效应用于上述禽类疫病的临床样本检测,为此类禽疫病的快速鉴别诊检提供了新的先进手段。
吴永桃[7](2017)在《广州市增城区高致病性禽流感、新城疫血清学调查及分析》文中研究指明高致病性禽流感(Highly Pathogenic Avian Influenza,HPAI)是由A型流感病毒引起的一种禽类烈性传染病。病禽常表现为精神十分沉郁,鸡冠发绀呈紫黑色,头部和眼睑部水肿浮胀,出现神经絮乱症状,脚鳞出血等;水禽患病后会出现显着的神经症状,病禽眼角膜发炎乃至失明,以及出现腹泻等症状,常有突发死亡的现象。HPAI呈全球蔓延之势,感染率和致死率高,给养禽业带来的损失巨大,是世界动物卫生组织(World Organization for Animal Health,OIE)公认的A类传染病,也是国际武器公约动物类传染病。新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的一种急性、高度接触性传染病,主要呈急性败血症过程,病死率高,即使已进行广泛的疫苗接种来预防该病,但新城疫(ND)仍是我国最主要和最危险的禽病之一,被OIE列为A类烈性传染病。近年来,国内外学者对高致病性禽流感、新城疫的流行病学和分子生物学做了大量研究,但针对广东省广州市地区的高致病性禽流感、新城疫相关文献依然较少。本研究对广州市增城区近5年来采集的家禽血清样品进行高致病性禽流感、新城疫血清学检测及分析研究,旨在掌握广州市增城区近5年来高致病性禽流感、新城疫的抗体水平、监测现状及规律特点,为增城区HPAIV、NDV的分子水平研究提供依据,为增城区的禽病预防和控制工作提供借鉴。本研究自2011年3月至2015年12月从广州市增城区11个镇街的规模养殖场及散养户的健康家禽中采集到血清样品12 543份,其中用于H5检测的鸡血清6488份,蛋鸭血清300份,肉鸭血清821份,鹅血清96份,鸽血清107份,共7824份;用于ND检测的鸡血清4719份。将血清样品进行血凝抑制试验(HI)检测,结果显示6274份血清H5亚型抗体HI效价≥4log2,809份血清H5亚型抗体HI效价<4log2,样品血清H5亚型抗体总合格率为80.19%,其中鸡血清样品H5亚型抗体合格率为79.45%,鸭血清样品H5亚型抗体合格率为88.22%,鹅血清样品H5亚型抗体合格率为94.79%,鸽血清样品H5亚型抗体合格率为28.04%,家鸽H5亚型抗体水平处于低位,暴露感染风险。而ND抗体合格率为78.22%,其中3691份血清ND抗体HI效价≥5log2,570份血清ND抗体HI效价<5log2,总合格率大于75%的抗体水平对辖区内家禽抵抗NDV侵袭具有较强保护作用。
赵广武[8](2017)在《六种家禽免疫抑制相关病液相芯片检测试剂盒的研制》文中研究表明本研究以家禽免疫抑制性疾病为研究对象,以建立快速、灵敏、准确、简便、实用、高通量的检测方法为目标,建立了家禽免疫抑制性疾病多重通用扩增鉴别诊断(General multiplex RT-PCR integrated with luminex,GMPLex)检测方法。本论文主要研究内容如下:按照国家标准采用HA(Hemagglutination)、HI(Hemagglutination ingibition)和real time RT-PCR(real time reversetranscriptionpolymerase chain reaction)三种方法对10株深圳出入境检验检疫局保存的不同年代的家禽免疫抑制性病毒毒株进行了确证。通过HA和HI试验确定A/Chicken/Hongkong/SZ-HI/1997(H5N1)毒株和NDV-F48E9毒株对鸡胚的特异性死亡数量,根据Reed-Muench算法计算出A/C hicken/Hongkong/SZ-HI/1997(H5N1)毒株的鸡胚半数致死量ELD50为10-7.75/0.2mL,NDV-F48E9毒株的鸡胚半数致死量ELD50为10-8.5/0.2mL。设计了针对禽流感病毒的M基因(AIV-M)、新城疫病毒的F基因(NDV-F)、传染性法氏囊病毒的VP2基因(IBDV-VP2)、马立克氏病毒1型的PP38基因(MDV-PP38)、J型禽白血病病毒的ENV基因(ALV-J-ENV)、鸡传染性贫血病毒的VP2(CAV-VP2)的特异性鉴别诊断引物和探针,引入通用超级引物,创建了一个全新的通用多重RT-PCR检测方法,实现了对家禽免疫抑制性病毒多个亚型的目标片段一次多重RT-PCR扩增目的,解决芯片检测过程中需要多次PCR扩增的瓶颈。将通用多重RT-PCR检测方法与液相芯片高通量检测方法结合,建立起家禽免疫抑制性疾病多重通用扩增鉴别诊断GMPLex检测方法。所建GMPLex检测方法检测通量高,可一次对六种家禽免疫抑制性病毒的六个目的基因进行鉴别诊断;方法快速,家禽免疫抑制性病毒鉴别诊断检测可在6h内完成;特异性强,通过两套套式引物和一个特异性探针来确保每个亚型的特异性,病毒各个亚型毒株相互之间没有发现交叉反应,与其他病原体之间也无非特异性反应;灵敏度高,GMPLex法检测出H5病毒的检测灵敏度为病毒尿囊液稀释至10-5(相当于280 ELD50),检测出新城疫毒株的检测灵敏度为病毒尿囊液稀释至10-5(相当于280 ELD50)。GMPLex快速高通量检测方法检测三个RNA毒株检测灵敏度为病毒尿囊液稀释至10-4(相当于2800 ELD50)。采用所建立的家禽免疫抑制性疾病多重通用扩增鉴别诊断GMPLex检测方法对实验室保存的160株禽病病毒株进行小样本检测,检测结果与经典检测方法结果一致。证明所建立的GMPLex快速高通量鉴别诊断检测方法能够满足口岸家禽免疫抑制性病毒检测快速高通量的要求,为搭建家禽免疫抑制性病毒快速高通量的检测平台打下良好基础。
黄毅[9](2017)在《东莞市常平镇禽流感和新城疫的血清学与病原学监测研究》文中指出禽流感、新城疫疫情在我国乃至全世界都时有发生,不仅给养殖户带来严重的经济损失,禽流感疫情还严重威胁人们的健康安全,危害公共卫生安全,可见,禽类疫病防控形势非常严峻,新城疫可以和禽流感伴随爆发,因此调查常平镇禽流感、新城疫疫情至关重要。本研究通过监测2011年至2015年常平镇不同监测点(三鸟批发市场、规模养殖场、散养户)活禽禽流感、新城疫的免疫抗体合格率以及病原阳性率情况,评估去过几年常平镇禽流感、新城疫的免疫防控工作情况,分别从三鸟批发市场采集了1492份血清、规模养殖场采集了3438份血清、散养户采集了556份血清用于禽流感抗体检测,分别抽取了三鸟批发市场1203份血清、规模养殖场3298份血清、散养户556份血清用于新城疫抗体检测,同时还采取了三鸟批发市场2590份拭子、规模养殖场1440份拭子、散养户499份拭子用于检测禽流感和新城疫病原。调查结果显示三鸟批发市场禽流感抗体检测平均合格率为53.55%,H9禽流感病原阳性率为22.77%和不分型禽流感病原为27.87%,而规模养殖场平均合格率97.73%,H9禽流感病原阳性率为0(和不分型禽流感均为0),散养户禽流感病毒抗体平均合格率为83.27%,而H9禽流感病原阳性率为8.81%和不分型禽流感病原为11.22%。同时检测新城疫抗体合格率发现,三鸟批发市场平均合格率为67.74%,规模养殖场平均合格率为96.24%,散养户平均合格率为81.47%,三个监测点的病原平均阳性率分别为12.93%、0.00%、0.80%。可见三鸟批发市场的两种疫病抗体合格率都是最低的,对应病原阳性率最高,规模养殖场抗体合格率接近100%,对应其阳性率为0.00%,散养户抗体阳性率和病原阳性率均居中。本研究通过监测2011年至2015年常平镇三个监测点的禽流感、新城疫抗体合格率以及病原阳性率变化趋势,为科学防控禽类疫病提供重要依据。
陈慧婧[10](2017)在《鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗(LaSota株+HP株)制备技术的研究》文中研究指明本研究以鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗(LaSota株+HP株)生产过程中的关键环节,如病毒繁殖、抗原浓缩、灭活、乳化等为研究对象,探讨上述生产过程中的质量控制要点,为完善该二联苗生产提供数据借鉴和科学依据。1、病毒繁殖:新城疫病毒(La Sota株)及禽流感病毒(H9亚型HP株)分别接毒鸡胚后,检测不同培养时间段病毒的的效价。结果表明新城疫的最佳培养时间为96h,-15℃保存不宜超过3个月,流感的最佳培养时间为96h,-15℃保存不宜超过2个月。2、超滤浓缩:新城疫、禽流感两种抗原浓缩不同倍数后,对比病毒含量、血凝价以及免疫效果,根据试验数据并结合生产实际,筛选出了新城疫、禽流感最适的浓缩倍数均为2倍3、灭活剂浓度与灭活时间:对比了不同浓度甲醛、不同灭活时间对新城疫和禽流感病毒灭活效果,结果表明上述两种抗原用甲醛溶液最适灭活浓度均为0.1%,最佳灭活时间分别为16h和18h。4、乳化试验:通过乳化时间、乳化速度进行对比,筛选出稳定性最好的条件是3000r/min乳化45~75min。对新城疫抗原、禽流感抗原以及油相不同比例乳化的样品进行免疫效果对比试验,筛选出水相油相最佳比例为1:3。
二、“新城疫、禽流感病毒快速检测技术研究”取得重大突破(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、“新城疫、禽流感病毒快速检测技术研究”取得重大突破(论文提纲范文)
(1)2017-2020年眉县5种动物疫病免疫抗体检测与分析(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
主要符号对照表 |
文献综述 |
第一章 口蹄疫、新城疫以及高致病性禽流感研究进展 |
1.1 口蹄疫 |
1.1.1 概述 |
1.1.2 流行病学 |
1.1.3 临床症状 |
1.1.4 病理变化 |
1.1.5 诊断技术 |
1.1.6 免疫方法 |
1.2 鸡新城疫 |
1.2.1 概述 |
1.2.2 流行病学 |
1.2.3 临床症状 |
1.2.4 病理变化 |
1.2.5 诊断技术 |
1.2.6 免疫方法 |
1.3 高致病性禽流感 |
1.3.1 概述 |
1.3.2 流行病学 |
1.3.3 临床症状 |
1.3.4 病理变化 |
1.3.5 诊断技术 |
1.3.6 免疫方法 |
1.4 研究的目的及意义 |
试验研究 |
第二章 2017~2020 年眉县地区O型口蹄疫免疫抗体水平检测与分析 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 试验材料 |
2.1.2 试验方法 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 不同年份猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体抽样检测结果 |
2.2.2 2017 年~2020 年不同季节猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体抽样检测结果 |
2.2.3 不同区域以及不同年份猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体抽样检测分析 |
2.3 讨论 |
2.3.1 眉县不同年份猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体抽样检测结果的讨论 |
2.3.2 2017~2020 年眉县不同季节猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体抽样检测结果的讨论 |
2.3.3 2017~2020 年眉县不同区域猪、牛、羊O型口蹄疫免疫抗体抽样检测结果的讨论 |
2.4 小结 |
第三章 2017~2020 年眉县地区新城疫及高致病性禽流感免疫抗体水平监测与分析 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 试验材料 |
3.1.2 试验方法 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 不同年份新城疫、高致病性禽流感免疫抗体抽样检测结果 |
3.2.2 不同季节新城疫、高致病性禽流感免疫抗体抽样检测分析 |
3.2.3 不同区域以及不同年份鸡新城疫、高致病性禽流感免疫抗体抽样检测分析 |
3.3 讨论 |
3.3.1 眉县不同年份新城疫、高致病性禽流感免疫抗体抽样检测结果的讨论 |
3.3.2 2017~2020 年眉县不同季节新城疫、高致病性禽流感免疫抗体抽样检测结果的讨论 |
3.3.3 2017~2020 年眉县不同区域新城疫、高致病性禽流感免疫抗体抽样检测结果的讨论 |
3.4 小结 |
结论 |
参考文献 |
致谢 |
个人简介 |
附件 |
(2)野生动物园野禽禽流感、新城疫抗体水平检测及初步分析(论文提纲范文)
致谢 |
摘要 |
ABSTRACT |
文献综述 |
1 野生动物保护现状 |
2 野生动物禽流感流行与研究现状 |
3 野生动物新城疫流行与研究现状 |
4 本研究的目的意义 |
1 引言 |
2 材料与方法 |
2.1 材料 |
2.1.1 疫苗与检测试剂 |
2.1.2 主要仪器 |
2.2 方法 |
2.2.1 样品采集 |
2.2.2 抗体试验依据及检测方法 |
3 结果与分析 |
3.1 免疫接种前抗体水平 |
3.1.1 雉科野禽免疫前抗体水平 |
3.1.2 鹤科野禽免疫前抗体水平 |
3.1.3 鹳形目野禽免疫前抗体水平 |
3.1.4 鸭科野禽免疫前抗体水平 |
3.2 免疫接种后30d抗体水平 |
3.2.1 雉科野禽免疫后30d抗体水平 |
3.2.2 鹤科野禽免疫后30d抗体水平 |
3.2.3 鹳形目野禽免疫后30d抗体水平 |
3.2.4 鸭科野禽免疫后30d抗体水平 |
3.3 免疫接种后60d抗体水平 |
3.3.1 雉科野禽免疫后60d抗体水平 |
3.3.2 鹤科野禽免疫后60d抗体水平 |
3.3.3 鹳形目野禽免疫后60d抗体水平 |
3.3.4 鸭科野禽免疫后60d抗体水平 |
3.4 各类动物免疫抗体消长情况 |
3.4.1 各类野禽H5亚型禽流感抗体消长情况 |
3.4.2 各类野禽H7亚型禽流感抗体消长情况 |
3.4.3 各类野禽H9亚型禽流感抗体消长情况 |
3.4.4 各类野禽ND抗体消长情况 |
4 讨论 |
5 结论 |
参考文献 |
作者简介 |
(3)新中国成立70周年兽医科学研究进展(论文提纲范文)
1 各时期国家对兽医事业的规划 |
2 新中国成立以来国家对兽医科学研究项目的支持 |
2.1 国家自然科学基金对兽医科学的项目资助 |
2.2 其他重要国家科技计划对兽医科学的项目资助 |
3 新中国成立以来重大动物疫病防控进展 |
4 我国新发和再发动物传染病 |
4.1影响中国养猪业的重要新发和再发传染病 |
4.2 影响中国养禽业的重要新发和再发传染病 |
5 兽医科学基础研究 |
5.1 兽医科学在国际顶级杂志发表研究论文 |
5.2 在兽医学领域代表性主流国际杂志发表研究论文 |
6 兽医科学应用研究进展 |
6.1 动物用生物制品的研制 |
6.2 兽医领域制定国家标准、农业行业标准 |
6.3 兽医领域获得国家发明专利 |
6.4 新中国成立以来我国兽医科技平台的建设 |
7 新中国成立以来兽医科学取得的重大科技成果 |
7.1 兽医科学领域20世纪“四大科技成就” |
7.2 新中国成立以来兽医科学获得的其他重要成果 |
8 我国兽医科学研究的国际地位 |
9 未来兽医工作重点及展望 |
(4)2014-2017年东莞市茶山镇禽流感和新城疫抗体抗原监测及分析(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
1 前言 |
1.1 禽流感概述 |
1.2 H5亚型禽流感 |
1.3 H9亚型禽流感 |
1.4 新城疫 |
1.5 东莞市茶山镇禽类疫病防控现状 |
2 东莞市茶山镇禽流感和新城疫抗体水平调查与监测分析 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 采样 |
2.1.2 样品的处理 |
2.1.3 主要仪器和试剂 |
2.1.4 试验方法 |
2.2 实验结果 |
2.2.1 各监测点禽流感抗体合格率分析 |
2.2.2 各监测点新城疫抗体合格率分析 |
2.2.3 茶山镇禽流感、新城疫抗体合格率比较 |
2.2.4 结果讨论 |
3 东莞市茶山镇禽流感和新城疫病原检测 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 主要试剂 |
3.1.2 主要仪器 |
3.1.3 检测方法 |
3.2 实验结果 |
3.2.1 禽流感病毒阳性率 |
3.2.2 新城疫病毒阳性率 |
3.2.3 结果分析 |
4 H9N2亚型禽流感病毒的进化分析 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 相关试剂 |
4.1.2 鸡胚 |
4.1.3 毒株 |
4.1.4 引物 |
4.2 主要仪器设备 |
4.3 相关生物学软件 |
4.4 病毒的扩增及生物学特性的分析 |
4.4.1 病毒的纯化与增殖 |
4.4.2 病毒RNA的抽提 |
4.4.3 病毒 RNA 的反转录 |
4.4.4 病毒基因片段的 PCR 扩增 |
4.4.5 目的基因片段的纯化和回收 |
4.5 H9N2亚型流感病毒全基因序列分子特性分析和遗传进化分析 |
4.6 结果 |
4.6.1 H9N2亚型流感病毒遗传演化分析 |
4.6.2 H9N2亚型流感病毒全基因序列分析 |
4.6.3 讨论 |
5 讨论 |
6 全文总结 |
致谢 |
参考文献 |
(5)中山市三角镇畜禽疫病防疫情况调查分析(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
英文缩略词或符号表 |
1 引言 |
1.1 猪常见的几种疫病及其防控措施 |
1.1.1 猪繁殖与呼吸综合征 |
1.1.2 经典猪瘟 |
1.2 肉鸡主要疫病概述及防控措施 |
1.2.1 鸡新城疫 |
1.2.2 鸡球虫病 |
1.3 我国畜禽养殖业存在的问题 |
1.3.1 养殖户的观念问题 |
1.3.2 防疫机构及人员的问题 |
1.3.3 疫苗的问题 |
1.3.4 养殖环境问题 |
1.3.5 相关部门的管理及监督问题 |
2 材料与方法 |
2.1 相关材料 |
2.1.1 图书馆书籍和相关资料 |
2.1.2 数据库及媒体资料 |
2.1.3 相关管理部门资料 |
2.1.4 实地调研资料 |
2.2 研究方法 |
2.2.1 文献归纳法 |
2.2.2 调查研究法 |
2.2.3 综合分析法 |
3 调查结果及分析 |
3.1 广东省中山市三角镇基本情况 |
3.2 中山市三角镇近五年(2013年~2017年)生猪养殖及疫病防控情况 |
3.2.1 主要养殖品种及生猪出栏情况 |
3.2.2 生猪免疫情况及疫病发生情况 |
3.3 中山市三角镇近五年(2013年~2017年)肉鸡养殖和疫病防控情况 |
3.3.1 主要养殖品种及养殖数量 |
3.3.2 肉鸡免疫情况及疫病发生情况 |
3.4 中山市三角镇防疫机构基本情况 |
3.4.1 防疫人员构成情况 |
3.4.2 防疫人员薪资情况 |
3.4.3 2013年~2017年三角镇防疫投入资金情况 |
3.4.4 疫苗使用情况 |
4 结论与建议 |
4.1 三角镇畜禽养殖及防疫现状调查结论 |
4.2 关于基层防疫体系建设的建议 |
4.2.1 加大对养殖户的宣传培训力度 |
4.2.2 提高防疫员的整体素质 |
4.2.3 加大对基层防疫的资金投入 |
4.2.4 加大畜禽养殖监管和行政处罚力度 |
4.2.5 建立健全重大疫情监控体系 |
4.2.6 建立动物疫病可追溯体系 |
4.2.7 建立健全重大动物疫病应急处理机制 |
致谢 |
参考文献 |
(6)可视化同步共检六种禽传染病基因芯片检测技术研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
主要缩写说明 |
第一章 文献综述 |
1.1 六种禽类疫病及其病原学特征 |
1.1.1 禽白血病概述及病原靶基因特征 |
1.1.2 禽白血病的发病机理、临床症状及危害 |
1.1.3 马立克病概述及病原靶基因特征 |
1.1.4 马立克病的发病机理、临床症状及危害 |
1.1.5 传染性法氏囊病概述及病原靶基因特征 |
1.1.6 鸡传染性法氏囊病的发病机理、临床症状及危害 |
1.1.7 新城疫概述及病原靶基因特征 |
1.1.8 新城疫的发病机理、临床症状及危害 |
1.1.9 禽流感概述及病原靶基因特征 |
1.1.10 禽流感的发病机理、临床症状及危害 |
1.1.11 传染性喉气管炎概述及病原靶基因特征 |
1.1.12 传染性喉气管炎的发病机理、临床症状及危害 |
1.2 禽类病毒病诊断方法 |
1.3 基因芯片检测技术在禽类病原检测方面的研究进展 |
1.3.1 基因芯片检测技术的概述 |
1.3.2 基因芯片技术在禽类病原检测方面的应用 |
1.3.3 可视化基因芯片技术的起源及分类 |
1.3.4 可视化基因芯片技术在目前疾病诊断中的应用及展望 |
1.4 研究目的及意义 |
第二章 ALV-MDV-IBDV-NDV-AIV-ILTV共检基因芯片构建、检测条件优化和质量评价 |
2.1 材料 |
2.1.1 生物材料 |
2.1.2 主要试剂 |
2.1.3 主要仪器 |
2.2 方法 |
2.2.1 引物的设计与合成 |
2.2.2 ALV-ENV、MDV-MEQ、IBDV-VP2靶基因的扩增及鉴定 |
2.2.3 靶基因的复苏及鉴定 |
2.2.4 寡核苷酸探针设计 |
2.2.5 可视化基因芯片的制备 |
2.2.6 可视化基因芯片的检测步骤 |
2.2.7 可视化基因芯片的条件优化 |
2.2.8 可视化基因芯片的质量评价 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 靶基因的扩增、克隆及重组质粒菌复苏鉴定结果 |
2.3.2 基因芯片制备的初检 |
2.3.3 可视化基因芯片的条件优化结果 |
2.3.4 可视化基因芯片的质量评价结果 |
2.4 讨论 |
2.5 小结 |
第三章 禽流感H5-H7-H9-N1-N9-N2六种亚型联合共检可视化基因芯片的构建、检测条件优化和质量评价 |
3.1 材料 |
3.1.1 生物材料 |
3.1.2 主要试剂 |
3.1.3 主要仪器 |
3.2 方法 |
3.2.1 H5-HA、H7-HA、H9-HA、N1-NA、N9-NA、N2-NA基因的克隆鉴定 |
3.2.2 H5-H7-H9-N1-N9-N2亚型靶基因特异性的检测 |
3.2.3 寡核苷酸探针设计与芯片制备 |
3.2.4 H5-H7-H9-N1-N9-N2亚型可视化基因芯片的检测 |
3.2.5 H5-H7-H9-N1-N9-N2亚型可视化基因芯片的质量评价 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 靶基因的扩增、克隆及重组质粒菌复苏鉴定结果 |
3.3.2 H5-H7-H9-N1-N9-N2亚型靶基因特异性的检测结果 |
3.3.3 H5-H7-H9-N1-N9-N2亚型基因芯片制备的初检 |
3.3.4 H5-H7-H9-N1-N9-N2亚型基因芯片的质量评价结果 |
3.4 讨论 |
3.5 小结 |
第四章 六种禽病毒病及禽流感分型的可视化共检基因芯片检测技术的临床应用 |
4.1 材料 |
4.1.1 生物材料 |
4.1.2 主要试剂和仪器 |
4.2 方法 |
4.2.1 临床样本核酸的提取及PCR扩增标记 |
4.2.2 阳性质粒的提取 |
4.2.3 可视化基因芯片的制备 |
4.2.4 PCR/RT-PCR和可视化基因芯片检测临床样本的比较 |
4.2.5 RT-PCR和可视化基因芯片检测禽流感病毒亚型的比较 |
4.3 结果与分析 |
4.3.1 PCR/RT-PCR检测六种禽病毒病结果 |
4.3.2 可视化基因芯片检测六种禽病毒病结果 |
4.3.3 两种检测六种禽病毒病方法的符合率 |
4.3.4 RT-PCR检测禽流感H5、H7、H9、N1、N9、N2亚型结果 |
4.3.5 可视化芯片检测禽流感H5、H7、H9、N1、N9、N2亚型结果 |
4.3.6 两种检测禽流感六种亚型方法的符合率 |
4.4 讨论 |
4.5 小结 |
结论 |
全文创新点 |
参考文献 |
致谢 |
作者简历 |
附录 |
(7)广州市增城区高致病性禽流感、新城疫血清学调查及分析(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
英文缩略词表 |
1 引言 |
1.1 禽流感 |
1.1.1 流感病毒的研究进展 |
1.1.2 流感的历史概述 |
1.1.2.1 西班牙流感(1918 年) |
1.1.2.2 亚洲流感(1957 年) |
1.1.2.3 香港流感(1968 年) |
1.1.2.4 俄罗斯流感(1977 年) |
1.1.2.5 香港流感(1997 年) |
1.1.2.6 墨西哥流感(2009 年) |
1.1.2.7 中国H7N9流感(2014 年) |
1.1.3 禽流感的历史 |
1.1.3.1 禽流感病毒 |
1.1.3.2 高致病性禽流感病毒(HPAI) |
1.1.4 禽流感病毒的结构特点 |
1.1.5 高致病性禽流感的防制 |
1.1.6 禽流感流行病学特征 |
1.1.6.1 易感动物 |
1.1.6.2 AIV传染源 |
1.1.6.3 AIV传播方式 |
1.1.6.4 禽流感流行季节 |
1.1.6.5 AIV的理化特性 |
1.1.7 我国高致病性禽流感流行状况 |
1.1.8 影响高致病性禽流感病毒的因素 |
1.1.9 影响高致病性禽流感发生的其他因素 |
1.1.10 现有禽流感系列疫苗 |
1.2 新城疫 |
1.2.1 新城疫的历史 |
1.2.2 新城疫病毒的结构特点 |
1.2.3 新城疫的防制 |
1.2.4 新城疫流行病学特征 |
1.2.4.1 易感动物 |
1.2.4.2 NDV传染源 |
1.2.4.3 NDV传播方式 |
1.2.4.4 ND流行季节 |
1.2.4.5 NDV的理化特性 |
1.2.5 我国新城疫流行状况 |
1.2.6 影响新城疫流行的因素 |
1.2.7 现有新城疫系列疫苗 |
1.3 广州市增城区概况 |
1.4 本研究的目的意义 |
2 实验材料 |
2.1 样品 |
2.2 H5、ND参考抗原 |
2.3 常用一般试剂 |
2.4 主要仪器 |
3 实验方法 |
3.1 样品的采集 |
3.2 抗体监测 |
3.2.1 血清的灭活处理 |
3.2.2 血凝试验(HA) |
3.2.3 血凝抑制试验(HI) |
3.2.4 质量控制 |
4 结果与分析 |
4.1 血凝试验 |
4.2 血凝抑制试验 |
4.2.1 H5抗体监测结果 |
4.2.1.1 2011 年H5抗体监测结果 |
4.2.1.2 2012 年H5抗体监测结果 |
4.2.1.3 2013 年H5抗体监测结果 |
4.2.1.4 2014 年H5抗体监测结果 |
4.2.1.5 2015 年H5抗体监测结果 |
4.2.1.6 近5年H5抗体检测结果 |
4.2.2 ND抗体监测结果 |
5 讨论 |
5.1 H5抗体监测结果分析 |
5.2 ND抗体监测结果分析 |
6 总结 |
致谢 |
参考文献 |
(8)六种家禽免疫抑制相关病液相芯片检测试剂盒的研制(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
英文缩略词表 |
第一章 引言 |
1.1 家禽免疫抑制病概述 |
1.2 常见检测方法 |
1.3 本研究的目的和意义 |
第二章 家禽免疫抑制性病毒毒株初步鉴定 |
2.1 供试材料与主要仪器 |
2.1.1 试验材料 |
2.1.2 仪器 |
2.1.3 耗材 |
2.2 方法 |
2.2.1 毒株的复苏与培养 |
2.2.2 微量血球凝集(HA)试验 |
2.2.3 微量血球凝集抑制(HI)试验 |
2.2.4 real time RT-PCR检测 |
2.2.5 禽流感病毒H5参考毒株和新城疫F48E9参考毒株半数致死量的测定 |
2.3 结果 |
2.3.1 各个毒株的real time RT-PCR检测结果 |
2.3.2 禽流感病毒H5参考毒株和新城疫F48E9参考毒株半数致死量的测定结果 |
2.4 讨论 |
2.4.1 各个病毒的培养与效价测定 |
2.4.2 禽流感病毒H5参考毒株和新城疫F48E9参考毒株半数致死量的确定 |
2.5 结论 |
第三章 GMPLex快速高通量鉴别诊断检测方法的建立 |
3.1 供试材料与主要仪器 |
3.1.1 试验材料 |
3.1.2 主要仪器设备 |
3.2 方法 |
3.2.1 引物与探针的设计与合成 |
3.2.2 家禽免疫抑制性病毒GM RT-PCR扩增体系的建立 |
3.2.3 家禽免疫抑制性病毒GMPLex检测体系的建立 |
3.2.4 GMPLex快速高通量检测方法灵敏性试验 |
3.2.5 GMPLex快速高通量检测方法特异性试验 |
3.3 结果 |
3.3.1 引物与探针的设计与合成结果 |
3.3.2 家禽免疫抑制性病毒GM RT-PCR检测方法的建立结果 |
3.3.3 家禽免疫抑制性病毒GMPLex检测体系的建立结果 |
3.3.4 GMPLex快速高通量检测方法灵敏性试验结果 |
3.3.5 GMPLex快速高通量检测方法特异性试验结果 |
3.4 讨论 |
3.4.1 GMPLex检测技术 |
3.4.2 GM RT-PCR引物与探针的设计 |
3.4.3 GM RT-PCR扩增体系的建立 |
3.4.4 LiquiC hip检测体系的建立 |
3.4.5 GMPLex快速高通量检测方法灵敏性试验 |
3.4.6 GMPLex快速高通量检测方法特异性试验 |
3.5 结论 |
全文小结 |
致谢 |
参考文献 |
(9)东莞市常平镇禽流感和新城疫的血清学与病原学监测研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
英文缩略词表 |
第一章 文献综述 |
1.1 禽流感的概述 |
1.1.2 病原学特点 |
1.1.3 流行病学特征 |
1.1.4 临床症状和病理变化 |
1.1.5 禽流感的流行动态 |
1.1.6 禽流感防控及疫苗研究进展 |
1.2 新城疫的概述 |
1.2.1 新城疫病原学 |
1.2.2 新城疫流行病学 |
1.2.3 临床症状和病理变化 |
1.2.4 新城疫近年流行动态 |
1.2.5 新城疫防控及疫苗研究进展 |
1.3 东莞市常平镇禽类疫病防控现状 |
1.4 本研究目的与意义 |
第二章 东莞市常平镇禽流感和新城疫病流行病学调查与监测数据分析 |
2.1 材料 |
2.1.1 采样 |
2.1.2 样品的处理 |
2.1.3 主要仪器和试剂 |
2.2 检测方法 |
2.2.1 禽流感抗体检测 |
2.2.2 新城疫抗体检测 |
2.3 实验结果 |
2.3.1 各监测点禽流感抗体合格率分析 |
2.3.2 各监测点新城疫抗体合格率分析 |
2.4 讨论 |
第三章 东莞市常平镇禽流感和新城疫病原检测 |
3.1 材料 |
3.1.1 采样 |
3.1.2 样品的处理 |
3.1.3 主要试剂 |
3.2 检测方法 |
3.2.1 主要仪器 |
3.2.2 实验操作步骤 |
3.2.3 Mix的配制 |
3.2.4 质量控制标准及结果判断 |
3.2.5 注意事项 |
3.3 实验结果 |
3.4 讨论 |
3.5 展望 |
全文总结 |
致谢 |
参考文献 |
(10)鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗(LaSota株+HP株)制备技术的研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
第一章 文献综述 |
1 鸡新城疫病毒、H9N2亚型禽流感病毒病原学概况 |
1.1 鸡新城疫病毒病原学概况 |
1.2 H9N2亚型禽流感病毒病原学概况 |
2 鸡新城疫病毒、H9N2亚型禽流感流行病学概况 |
2.1 鸡新城疫的流行病学 |
2.2 H9N2亚型禽流感的流行病学 |
3 国内外鸡新城疫病毒、H9N2亚型禽流感疫苗研究现状 |
3.1 鸡新城疫疫苗的研究现状 |
3.2 H9N2亚型禽流感疫苗的研究现状 |
4 本研究的目的与意义 |
第二章 病毒繁殖及保存期试验 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 试验方法 |
2 结果与分析 |
2.1 病毒繁殖 |
2.2 保存期试验 |
3 讨论 |
4 小结 |
第三章 超滤浓缩效果评价 |
1 材料和方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
2 结果与分析 |
2.1 病毒含量的测定 |
2.2 红细胞凝集价的测定 |
2.3 浓缩免疫效果评定 |
3 讨论 |
4 小结 |
第四章 灭活试验 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 试验方法 |
2 结果与分析 |
2.1 灭活检验 |
2.2 不同浓度甲醛对血凝活性影响 |
3 讨论 |
4 小结 |
第五章 乳化试验 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
2 结果 |
2.1 选择佐剂 |
2.2 剪切速度和乳化时间对疫苗稳定性和黏度的影响 |
2.3 水相油相不同比例的乳化试验结果 |
3 讨论 |
3.1 佐剂的选择 |
3.2 剪切速度和时间对疫苗稳定性和黏度的影响 |
3.3 不同比例的乳化试验效果评定 |
4 小结 |
结论 |
参考文献 |
致谢 |
四、“新城疫、禽流感病毒快速检测技术研究”取得重大突破(论文参考文献)
- [1]2017-2020年眉县5种动物疫病免疫抗体检测与分析[D]. 张芬芳. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [2]野生动物园野禽禽流感、新城疫抗体水平检测及初步分析[D]. 闫梦杨. 安徽农业大学, 2020(04)
- [3]新中国成立70周年兽医科学研究进展[J]. 李慧昕,刘胜旺. 中国科学:生命科学, 2019(11)
- [4]2014-2017年东莞市茶山镇禽流感和新城疫抗体抗原监测及分析[D]. 贝松涛. 华南农业大学, 2018(02)
- [5]中山市三角镇畜禽疫病防疫情况调查分析[D]. 吴宇颖. 华南农业大学, 2018(02)
- [6]可视化同步共检六种禽传染病基因芯片检测技术研究[D]. 向华. 四川农业大学, 2018(02)
- [7]广州市增城区高致病性禽流感、新城疫血清学调查及分析[D]. 吴永桃. 华南农业大学, 2017(08)
- [8]六种家禽免疫抑制相关病液相芯片检测试剂盒的研制[D]. 赵广武. 华南农业大学, 2017(08)
- [9]东莞市常平镇禽流感和新城疫的血清学与病原学监测研究[D]. 黄毅. 华南农业大学, 2017(08)
- [10]鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗(LaSota株+HP株)制备技术的研究[D]. 陈慧婧. 福建农林大学, 2017(01)