一、E-选择素及其在炎症中的作用研究进展（论文文献综述）
王思佳[1]（2021）在《MiR-145-5p靶向KLFs调控人角膜成纤维细胞中炎性因子的表达》文中研究表明圆锥角膜是一种角膜扩张性疾病,在临床中是较为常见的致盲性疾病之一。角膜是一种典型的承载组织,在眼内压的作用下角膜主要承受拉伸和剪切载荷的作用。圆锥角膜局部组织变薄、结构破坏、材料性能降低,导致角膜内部应力发生重新分布。多种炎性因子在圆锥角膜患者角膜组织、细胞及泪液过度表达。miRNAs作为重要的基因表达调控因子,与角膜的生理病理过程密切相关,miRNAs还与转录因子KLFs相互作用参与炎症介质的表达调控,KLFs家族是重要的调控炎症介质表达的转录因子之一。miRNAs和KLFs是否参与力学刺激下角膜中炎性因子的表达调控尚不清楚。本研究通过对体外培养的人角膜成纤维细胞进行不同时间的周期性机械拉伸,研究了力学刺激对人的角膜成纤维细胞中KLFs、炎性因子及基质重塑相关基因表达的影响;通过siRNA技术研究了KLF4与KLF5对角膜成纤维细胞中炎性因子及基质重塑相关基因表达的影响;同时筛选了能够同时靶定KLF4与KLF5且与其表达呈负相关的miRNAs,探究了miRNA是否通过KLFs调控人角膜成纤维细胞中炎性因子的表达,进而参与角膜基质重塑相关蛋白的调控。本文的主要工作如下:（1）对体外培养的正常人角膜成纤维细胞进行0 h、3 h、6 h、12 h的周期性机械拉伸,采用实时荧光定量PCR检测细胞中转录因子KLFs、白细胞介素（ILs）、基质金属蛋白酶（MMPs）、赖氨酰氧化酶（LOX）、胶原蛋白（COL）的基因表达。结果发现,在周期性机械拉伸的刺激下人角膜成纤维细胞转录因子（KLF4、KLF5）、炎性因子（IL-1β、IL-6、IL-8、ICAM-1）、基质金属蛋白酶（MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13和MMP-14）的表达均显着上升,赖氨酰氧化酶样蛋白（LOX-1、LOX-2、LOX-4）和胶原蛋白（COL1A2、COL3A1）的表达显着下调。提示机械拉伸可以诱导人角膜成纤维细胞中转录因子KLFs、炎性因子及基质重塑相关基因的表达。（2）构建KLF4与KLF5基因的siRNA干扰片段并分别转染到人角膜成纤维细胞中,采用实时荧光定量PCR检测人角膜成纤维细胞中KLF4与KLF5对炎性因子及基质重塑相关基因表达的影响。结果显示在干扰KLF4与KLF5表达后,人角膜成纤维细胞中除IL-1β外,IL-6、IL-8、MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13和MMP-14的表达也随之下降,而COL1A2、COL3A1、LOX-1、LOX-2和LOX-4的表达显着上升。提示KLF4与KLF5可以通过调控人角膜成纤维细胞中炎性因子（除IL-1β外）的表达,进而参与基质重塑相关蛋白的调控。（3）通过miRBase和Target Scan网站预测能同时靶定KLF4与KLF5的miRNAs（miR-145-5p,miR-5195-3p）。对体外培养的人角膜成纤维细胞进行机械拉伸,通过实时荧光定量PCR检测KLF4、KLF5及上述miRNAs的表达。结果显示miR-145-5p与KLF4及KLF5的表达趋势相反,且在3 h时最明显,故选取miR-145-5p做后续实验研究。（4）分别将miR-145-5p的模拟物与抑制剂转染到体外培养的人角膜成纤维细胞中,检测转染后角膜成纤维细胞中KLFs、炎性因子及基质重塑相关基因的表达。结果显示miR-145-5p模拟物能够显着下调转录因子KLF4和KLF5的表达,同时使炎性因子IL-6、IL-8和基质金属蛋白酶MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13和MMP-14表达降低,COL1A2、COL3A1、LOX-1和LOX-2的表达升高。提示在机械拉伸刺激下miR-145-5p表达下降,引起KLF4与KLF5表达升高,促进炎性因子（除IL-1β外）和基质重塑相关蛋白（除LOX-4外）的表达。这可为圆锥角膜的发病机理和治疗提供了潜在靶点。
王娟,张健,毕少华,郑洪,刘光辉[2]（2020）在《败血症患儿血清E-selectin、sPECAM-1表达的相关性分析》文中研究表明【目的】探究E选择素（E-selectin）、可溶性血小板内皮细胞黏附分子-1（s PECAM-1）在新生儿败血症中的表达及其预后相关性。【方法】选取2018年8月至2019年2月明确诊断为新生儿败血症的47例符合标准的新生儿作为观察组,同时选取同一时期新生儿病房的50例无感染征象新生儿作为对照组。所有实验对象入院后及使用抗生素前抽取动脉血,采用酶联免疫法测定E-selectin、s PECAM-1的定量,记录并比较2组实验对象的一般资料;比较2组实验对象血清中E-selectin、s PECAM-1的表达量,同时根据患儿情况进行PCIS评分;采用Pearson相关性分析,分析败血症患儿血清中E-selectin、s PECAM-1的表达量与PCIS评分间的相关性;通过SPSS中ROC曲线方法推算出E-selectin、s PECAM-1的表达量对新生儿败血症的诊断价值。【结果】通过比较2组实验对象的一般资料发现,观察组和对照组的胎龄、性别、日龄无明显区别,差异无统计学意义（P>0.05）;通过比较2组实验对象的指标发现,观察组的E-selectin、s PECAM-1明显高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,同时观察组PCIS评分明显低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,Pearson相关性分析结果显示,E-selectin、s PECAM-1均与PCIS评分呈负相关,差异有统计学意义（P<0.05）;E-selectin的AUC为0.753,截断值为23.24μg/L,取最佳临界值时特异性为90.2%,敏感度为53.2%,s PECAM-1的AUC为0.815,截断值为529.67μg/L,取最佳临界值时特异性为84.3%,敏感度为68.1%,二者对新生儿败血症的诊断效果一般,而二者联合检测的AUC为86.1%,取最佳临界值时特异性为82.4%,敏感度为78.7%,对新生儿败血症的诊断效果很好。【结论】测定新生儿血清中E-selectin和s PECAM-1的定量对新生儿败血症具有一定诊断价值,对新生儿败血症的早期诊治具有重要意义,值得在临床推广。
胡欣培[3]（2019）在《E-选择素S128R基因多态性与复发性阿弗他溃疡相关性的研究》文中研究指明目的探讨E-selectin S128R基因多态性与复发性阿弗他溃疡之间的相关性。方法选择109例复发性阿弗他溃疡患者和135例正常对照组的外周静脉血,通过限制性片段长度多态性-聚合酶链式反应（RFLP-PCR）分析E-selectin S128R基因位点的基因多态性,使用优势比（OR）和95%置信区间（95%CI）估计相对风险度。结果1.在正常对照组中,E-选择素S128R位点基因型的结果有着广泛的代表性,与哈代-温伯格平衡定律一致。2.基因型频率与等位基因的频率在E-选择素S128R位点上的分布,病例组与正常对照组之间存在的差异较为显着（p<0.05）。E-选择素第四外显子S128R位点基因型SR（OR=4.902,95%CI=2.330-10.312）与RR（OR=6.740,95%CI=0.739-61.459）是高风险的基因型,R等位基因是高风险的等位基因（OR=4.443,95%CI=2.309-8.546）。结论E-选择蛋白第4外显子S128R位点基因多态性可能与复发性阿弗他溃疡有相关性。E-选择蛋白S128R位点是RAU患者的易感基因位点。带有R等位基因的E-选择蛋白S128R位点患有RAU的风险较携带S等位基因者高。
吴庆建[4]（2018）在《Hsp27MP对实验性脑梗死及罗氟司特对SAH后EBI保护作用机制研究》文中指出研究背景卒中被认为是世界各国主要的公共卫生问题之一,占据发达国家健康支出费用第三位,为成人常见的致死、致残原因,每16例死亡病人中就有1例死于中风。在所有卒中事件大部分为缺血性卒中,出血性卒中仅占15%左右。目前,我国流行病学统计数据表明,每年死于急性缺血性脑卒中的人数已经超过肿瘤和心血管疾病,跃居第1位,成为首位国民致死原因,且仍以每年9%的速率增长。即使存活下来,仍需要长期昂贵的康复治疗。脑卒中存活者约3/4丧失劳动能力,其中重度致残者约占40%,导致极大的社会和经济负担。目前,循证医学已证实早期溶栓及介入治疗的有效性,但由于其狭窄的治疗时间窗、昂贵的费用及较高技术水平,由于狭窄的治疗窗,仅一小部分患者从静脉溶栓后血运重建获益。迄今为止,临床尚缺乏有效的脑梗死后脑保护治疗策略。脑梗死病理生理机制复杂,脑梗死后多种因素导致细胞死亡信号通路启动,因此靶向脑缺血后细胞死亡通路的激活进行了多种研究,靶向信号转导通路,进行神经保护药物的研发,虽然动物实验取得了可喜的成绩,然而临床实验未取得成功。考虑到许多针对单一信号转导通路为靶点的候选药物研究的失败,对缺血性脑损伤神经保护的首选策略可能是同时阻断神经损伤的多个核心的关键途径,包括与脑缺血病理过程有关的多细胞复杂活动和事件。同时阻断脑损伤多个关键途径是缺血性脑卒中的首选治疗策略。细胞死亡信号和炎性反应在脑缺血损伤中起重要作用。热休克蛋白家族包含一组热敏细胞应激蛋白,它们最好的特征在于分子伴侣功能,尤其是伴随热应激。在过去的几十年的研究中,热休克蛋白一直是研究的焦点。根据热休克蛋白分子量、域保护和功能分为多个亚家族。小热休克蛋白（sHSP）,包括HSP27,广泛表达于多种物种,单体分子量在15-42kDa之间。最近的实验研究开始强调Hsp27在细胞应激压力中保护作用重要性。越来越多的证据表明Hsp27抑制细胞死亡信号,另外,Hsp27经过转录后修饰,导致不同的控制功能。HSP27差异表达表达于某些神经元的亚型,其中高组成型表达主要限于脊髓神经节中和脑干,基础表达在小脑浦肯野纤维细胞的亚型。无论是作为组成型表达还是被诱导应对细胞应激,Hsp27在神经元损伤时表达。已有充分的实验证据表明,Hsp27具有在多种神经疾病模型减少的神经元损伤的功效,在神经保护中扮演重要能动角色。虽然Hsp27在脑中的组成型表达水平较低,但在中枢神经系统若干应激,如包括热应激,局部缺血和癫痫发作可诱导Hsp27的表达。免疫组化表明,Hsp27在神经胶质细胞中表达量较多,仅在有限数量的神经元细胞中表达。有研究报道,Hsp27经单纯疱疹病毒载体递送到脑可以有效预防红藻氨酸盐诱导的海马神经元凋亡。过表达人类Hsp27可以有效降低红藻氨酸诱导转基因小鼠的海马神经元凋亡。脑缺血后,内源性Hsp27表达增加主要在胶质细胞。病毒转导或基因过表达Hsp27显着减少缺血性病变的面积。全长蛋白转导HSP27能够有效地降低沙鼠全脑缺血模型海马CA1区损伤。凋亡信号调节激酶1（ASK-1）是传导细胞死亡信号的关键分子且在小胶质细胞激活中起关键作用。许多研究发现Hsp27可直接抑制ASK1通过阻断死亡信号而对脑缺血发挥保护作用。由于血脑屏障的存在,大分子蛋白药物不易透过血脑屏障,且具有免疫原性,大大限制了其应用。多肽类药物近年来成为医药界研究的热点,已经多种肽类药物广泛应用于肿瘤、炎症、心血管疾病、中枢神经系统疾病和免疫性疾病等。由于多肽类药物具有整个蛋白的生物学功能,分子量小,易于人工合成,副作用低,因而更具有临床研发价值。多肽类药物研发的迅猛发展引起神经科学工作者的重视,积极研发靶向中枢缺血性神经损伤的保护多肽类药物,已经取得了一定的进展。依照国际药学界划分标准,蛋白质类药物:由大于100个氨基酸分子组成的药物,如临床常用药物胰岛素、干扰素等;多肽类药物:100个以下的氨基酸组成的药品,目前临床应用的多肽药物共有80余种,涉及内分泌、血管、肿瘤、泌尿、免疫等多个系统疾病的治疗。与全长蛋白及化学药物相比,短肽类药物具有以下优势:（1）短肽的免疫原性更弱,潜在的副作用也就更少;（2）短肽具有更高的生物活性和特异性;（3）易于容易合成和提纯;（4）在体内具有较好的亲和性,且药物相互作用比较少。关于Hsp27模拟肽（HSP27MP）对脑梗死的保护作用尚未见相关研究报导。研究目的1.观察HSP27MP静脉给药后,正常生理状态及实验性脑梗死,其在神经元,小胶质细胞,ASK1分子内的分布。2.探讨HSP27MP对实验性脑梗死的保护作用。3.研究HSP27MP对实验性脑梗死的保护作用机制。研究方法1.实验动物SPF级雄性昆明种小鼠,体重25-35g,购至山东省动物实验动物中心,动物许可证号:SCXK（京）2012-0001。实验动物操作遵照泰山医学院生命科学研究中心脑科研究所《实验动物使用和管理原则》。2.制作小鼠实验性脑梗死模型局灶性皮质缺血小鼠模型采用光化学法诱导皮质微血管栓塞。小鼠采取5%异氟烷诱导麻醉,并以2%异氟烷维持麻醉。在手术过程中用恒温毯保持直肠温度在（37±0.5）。℃。经股静脉注入2%玫瑰红（100mg/kg体重）,给药组注射玫瑰红的同时,给予HSP27MP（或HSP27MP-FITC）（10mg/kg体重）,注射过程不少于2分钟。注射完毕后,即刻将小鼠固定于立体定位仪,调整定位仪参数,前囱和后囱处于水平位置。常规手术区消毒备皮。经颅顶正中线切开皮肤,长约1cm,钝性分离皮下组织,彻底去除骨膜,充分暴露前囟、后囟、人字缝和矢状缝。根据小鼠立体定向坐标图谱,选取小鼠感觉运动皮层为光照区域,具体参数为:矢状缝左侧2mm、前囟2.4mm,冠状缝后2mm。光源被放置尽可能贴近头骨,使冷光源光导纤维探头垂直贴近颅骨约1.5mm,经完整露骨照射4分钟。3.HSP27MP-FITC 脑内示踪HSP27MP-FITC给药后24h,取材后冰冻切片,行NeuN、Iba-1和ASK-1免疫荧光染色,评估HSP27MP在脑内的分布。4.局部脑血流量（regional cerebral blood flow,rCBF）测定于术后Oh和24h,麻醉小鼠后,剪开头皮,充分暴露头骨,采用2D多普勒激光血流测量仪检测各组小鼠的rCBF。5.神经功能评分24h后,取各组小鼠行Zealonga评分、平衡木实验（beam balance test）、圆筒实验（cylindertest）和足失误实验（foot-faulttest）,评估神经功能。6.TTC染色测定脑梗死体积于术后24h过量麻醉处死小鼠,取新鲜脑组织切片,置于1%的TTC溶液中染色,扫描仪扫描后,应用ImageJ软件测量脑梗死体积。7.伊文思蓝（Evans Blue,EB）渗透法检测血脑屏障（blood brain barrier,BBB）通透性术后23h,经股静脉注射2%EB（5ml/kg weight）,循环1h后,经心脏灌注50ml PBS后断头取脑,定性、定量评估BBB的通透性。干湿重法评估脑水肿。8.免疫荧光染色评估缺血半暗带小胶质细胞和激活的小胶质细胞取材后,脑冰冻切片,行Iba-1和CD-68染色,评估小胶质细胞及激活的小胶质细胞的表达数量程度。9.免疫荧光染色评估神经元凋亡取材后,脑冰冻切片,行NeuN+TUNEL免疫荧光染色,评估缺血半暗带神经元细胞凋亡。10.Western blot检测脑梗死后缺血半暗带ASK1和p-ASK1表达水平。研究结果:1.HSP27MP脑内分布FITC标记的HSP27MP静脉给药24h后,采用激光共聚焦显微镜及荧光显微镜观察HSP27MP在脑内的分布。研究结果发现,在生理及实验性脑梗死状态下,HSP27MP均可穿过BBB,在脑内弥漫性分布,可进入神经元和小胶质细胞,并可与靶分子ASK1共定位,且在脑梗死侧聚集。2.HSP27MP对实验性脑梗死的保护作用我们研究结果发现,HSP27MP可以有效降低脑梗死体积,改善脑梗死后早期神经功能缺损,但未能改善rCBF。证实了 HSP27MP对实验性脑梗死的保护作用。3.HSP27MP对实验性脑梗死的保护作用机制我们采用EB渗透法检测定性、定量检测BBB的通透性,干湿重法评估脑水肿,研究结果发现,HSP27MP可以有效保护脑梗死导致的BBB的破坏,减轻脑水肿。免疫荧光检测结果表明,HSP27MP减少小胶质细胞的激活,降低缺血半暗带区神经元凋亡。结论:1.HSP27MP静脉给药可以透过BBB进入中枢神经系统。2.HSP27MP对实验性脑梗死起到保护作用。3.HSP27MP通过保护BBB,减轻脑水肿,抑制小胶质细胞的激活,减少神经元的凋亡对实验性脑梗死起到保护作用。研究背景蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）主要是由颅内动脉瘤破裂所致的急性脑血管事件,约占所有脑卒中的5%-10%,在所有SAH患者中,猝死率高达20%,约50%的幸存者遗留认知障碍和慢性神经功能衰退[1]。SAH及其并发症是世界范围内成人致死致残的主要原因之一[2]。尽管SAH的诊断和手术治疗技术不断进展,但有效的干预治疗措施仍然有限,难以取得满意的临床效果。发现在过去的几十年里,脑血管痉挛（cerebralvasospasm,CVS）和动脉瘤再出血被认为预后不良的主要决定因素,虽然众多动物实验研究发现许多药物可以灭活致痉挛物质或者阻断动脉平滑肌收缩,但没有发现任何一种药物可以极大改善SAH患者的临床结局[3]。Kusaka[4]等2004年报导SAH后早期脑损伤（early brain injury,EBI）,定义为出血即刻至CVS的开始这一阶段,指的是SAH后72h内整个脑的急性损伤,包括氧化应激,神经炎症,离子干扰和神经炎症等。其详细机制仍未阐明,潜在的病理生理机制主要包括早期颅内压的升高,脑血流减少,脑含氧量的降低,脑灌注压降低,神经元凋亡,血脑屏障的破坏和脑水肿等[5]。众多国内外神经科学者们研究发现是SAH后死亡和致残的主要原因[6],现在EBI被认为对SAH患者治疗改进具有巨大潜力,可减弱一些长期的SAH后二次致命性脑损伤。因此,寻求SAH后EBI的治疗新策略是神经科学界亟待解决的一个难题。新近的众多研究表明,许多炎症成分导致动脉瘤破裂后脑损伤的进展,而小胶质细胞是中枢神经系统具有免疫活性的原位吞噬细胞,在神经炎症中发挥着至关重要的作用[7]。与小胶质细胞类似,星形胶质细胞能合成和分泌炎症因子,如细胞因子和趋化因子。现有的文献表明,多种因素都与炎症病变的发展相关,SAH后,蛛网膜下腔的血红蛋白刺激白细胞和神经胶质细胞增殖,分泌的细胞因子导致脑损伤[8]。越来越多的研究证据表明神经炎症在EBI的发病机理中扮演重要角色,SAH后炎性因子的水平升高,参与了EBI的发生和发展[9,10],众多研究结果凸显了炎症反应是EBI的主要因素[11,12]。因此,寻求安全有效的抗炎药物是改善SAH患者预后的潜在治疗策略[13]。自19世纪70年代以来,磷酸二酯酶（phosphodiesterase,PDE）抑制剂一直是抗炎治疗药物的研究目标[14]。在许多免疫细胞中,PDE-4是第二信cAMP主要的降解酶,在大脑皮层和海马均有表达。抑制PDE-4在炎症扮演重要角色的神经系统疾病和损伤的动物模型中产生有益作用,如脊髓损伤[15]、创伤性脑损伤[16]、阿尔茨海默病[17]、重度抑郁症[18]、多发性硬化症[19]和缺血性脑卒中[20]。神经科学家通过实验研究发现,西洛地唑,选择性PDE3抑制剂,动物实验研究发现可以减轻SAH后CVS[21]。令人鼓舞的是,一项临床系统回顾和荟萃分析表明,西洛他唑可以显着减少动脉瘤性SAH患者的症状性脑血管痉挛,严重的脑血管痉挛,脑血管痉挛相关的脑梗死和不良后果的发生率,且无显着的不良反应,支持应用到动脉瘤性SAH[22]。体外实验研究证明,罗氟司特氮氧化物抑制多种细胞中的PDE-4,包括中性粒细胞,内皮细胞,单核细胞/巨噬细胞,Cd4+和CD8+T细胞,平滑肌细胞[23]。体内实验研究证明罗氟司特可以减轻烟草烟雾诱导的肺部炎症,肺血管重构和高血压[23]。罗氟司特具有脑渗透性,其在大脑中的浓度呈现剂量依赖性的方式增加[24,25],其非呕吐剂量可以有效改善高血压导致的啮齿类动物学习、记忆和认知功能损害。本研究测试的假设罗氟司特减少大鼠SAH后促炎细胞因子、血脑屏障通透性和神经细胞凋亡。研究目的1.研究罗氟司特对SAH后EBI是否有保护作用。2.研究罗氟司特对SAH后神经炎症的影响。3.探讨罗氟司特对SAH早期CVS的影响。研究方法1.实验动物12周龄雄性SPF级SD大鼠（体重250-350g）购自山东省实验动物中心,饲养于泰山医学院脑科研究所动物房,昼夜节律,自由饮食进水,符合山东省泰山医学院生命科学研究中心实验动物管理规定。饲养一周后进行实验,随机分为Sham组,SAH组和SAH+罗氟司特组。2.SAH模型制作和给药根据既往研究方法[26],采用改良的枕大池一次注射自体血法制作SAH大鼠模型。水合氯醛（400 mg/kg BW）经腹腔注射麻醉大鼠后,头低位30°固定于脑立体定位仪。剪开头部皮肤暴露环枕膜,采用微量注射泵向枕大池匀速注射自体非肝素化动脉血（0.1ml/100g BW）,3min内注射完毕。注血完毕后滞留10min,缝合包扎。手术过程中采用恒温毯维持大鼠肛温在37±1℃。3.神经功能评分SAH后48h、72h对三组大鼠神经行为学（食欲、运动和神经功能缺损）评分[26]。4.脑组织含水量测定和血脑屏障通透性变化SAH后48h、72h,采用干湿重法测定三组大鼠的脑组织含水量,伊文思蓝外渗法评估血脑屏障通透性变化。5.免疫荧光染色观察大脑皮层IL-1β、IL-6、TNF-α的表达SAH后48h、72h,取脑制作冰冻切片,免疫荧光染色,在荧光显微镜下观察大脑皮层炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的变化。6.ELISA检测脑组织及外周血液中IL-1β、IL-6、TNFα的含量SAH后48h、72h,取脑组织匀浆,外周血离心,应用ELISA试剂盒检测炎性因子IL-1β、IL-6、TNFα的变化。7.免疫荧光染色观察大脑皮层小胶质细胞的表达SAH后72h,取脑制作冰冻切片切片,免疫荧光染色,观察大脑皮层小胶质细胞的表达情况。8.皮层神经元凋亡SAH后48h、72h,取脑制作冰冻切片,行皮层神经元actived caspase3和TUNEL免疫荧光染色,观察神经元凋亡的情况。9.基底动脉HE染色SAH后72h,取脑制作石蜡切片,HE染色观察基底动脉形态,用图像分析仪测定管腔横截面积。10.统计学分析实验所获取的数据均采用均以均数±标准差（x±s）表示,Sham组、SAH组和SAH+罗氟司特组之间比较采取the GraphPad Software Prism6.0软件行双因素方差分析（two-way analysis of variance,ANOVA）,P<0.05 表征显着统计学差异。研究结果1.罗氟司特可以改善SAH后神经功能缺损SAH后48h、72h,采用三种行为学检测评估罗氟司特可能神经保护作用。评分结果统计分析表明,与Sham组相比,SAH组神经功能评分显着增加;与SAH组相比,罗氟司特治疗组的神经功能评分显着降低。2.罗氟司特抑制SAH后血脑屏障通透性和脑水肿SAH后48h、72h,检测罗氟司特对血脑屏障通透性和脑水肿的影响。SAH组的伊文思蓝染料外渗量和脑含水量在高于在Sham组。而罗氟司特治疗后,SAH诱导的血脑屏障通透性的增加和减少脑水肿显着降低。3.罗氟司特降低SAH后IL-1β、IL-6和TNFα表达水平SAH后48h、72h,评价罗氟司特对IL-1β、IL-6和TNFα表达水平的影响。使用荧光显微镜观察免疫荧光染色结果,统计结果显示与Sham组相比较,SAH组IL-1β、IL-6和TNFα阳性细胞数明显增加。与SAH组比较,罗氟司特给药后,IL-1β、IL-6和TNFα阳性细胞显着地减少。ELISA检测结果显示,与Sham组相比,SAH组血清或皮质中的IL-1β、IL-6和TNFα含量明显增加,罗氟司特治疗后显着降低了 IL-1β、IL-6和TNFα的含量。4.罗氟司特降低SAH后小胶质细胞表达SAH后72h,免疫荧光染色结果显示,与Sham组相比较,SAH组小胶质阳性细胞数明显增加。然而,罗氟司特治疗组小胶质细胞阳性细胞数显着降低。5.罗氟司特抑制SAH后神经元凋亡在SAH诱导后48h和72h,采用active caspase-3/NeuN免疫荧光染色和TUNEL/DAPI染色量化了神经元细胞凋亡。统计结果表明与sham组相比,SAH组active caspase-3阳性细胞明显增加。然而与SAH组相比,罗氟司特治疗组active caspase-3阳性细胞显着减少。与SAH组相比较,罗氟司特治疗组TUNEL阳性细胞明显减少。6.罗氟司特减弱SAH后早期CVSSAH后72h,HE染色结果显示,与Sham组相比较,SAH组基底动脉痉挛明显,管腔面积减少。然而,罗氟司特治疗组基底动脉痉挛得到明显改善。结论罗氟司特显着改善大鼠实验性SAH后神经缺损,降低血脑屏障的渗透性,减弱小胶质细胞以及促炎的细胞因子IL-1β、IL-6和TNFα的表达,抑制神经细胞凋亡,减轻了 SAH后早期CVS。
汪琴静,徐莉,包洁,季巾君,谢冠群,范永升[5]（2017）在《“上火”人群中Activin A、E-selectin的差异表达研究》文中研究指明目的:通过对"上火"人群中细胞因子激活素A（Activin A）及E选择素（E-selectin）血清含量的测定以及外周血单个核细胞基因表达水平检测,探讨激活素A及E选择素在"上火"人群发病机制的影响和作用。方法:采集临床患者血液样本并提取血清及外周血单个核细胞。应用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清中激活素A及E选择素的含量,应用RTPCR法检测激活素A及E选择素的基因表达水平。结果:"上火"患者血清中activin A、E-selectin的水平以及外周血单个核细胞activin A、E-selectin基因表达水平高于正常平和质人群;观察组外周血中activin A、E-selectin的基因表达水平高于阴虚"上火"人群。结论:"上火"是一种局部的炎性反应,机体内环境在多种因素的作用下激活素A水平升高,影响炎性反应介质的作用或者本身作为一种炎性反应介质活化血管内皮细胞刺激E选择素的分泌与合成,诱导炎性反应,这是"上火"机制之一。
刘珣[6]（2016）在《白藜芦醇对高糖环境下血管内皮细胞的效应和作用机制》文中提出目的：糖尿病所致的慢性并发症严重威胁人们的健康,而糖尿病血管病变是最常见的慢性并发症之一。糖尿病血管病变的发病原因为高血糖环境引起血管内皮细胞的损伤。由于糖尿病血管病变目前还没有理想的治疗方法,因而研究相关药物具有重要的意义。白藜芦醇（resveratrol, RSV）,是一种多酚类植物抗毒素,近年来发现主要有抗肿瘤、保护心血管、抗氧化、抗衰老作用、保护神经系统、抗菌、抗炎、抗糖尿病作用和调节雌激素样等作用,但白藜芦醇对高糖环境下血管内皮细胞的效应及作用机制尚未完全阐明。相关研究表明一氧化氮（nitric oxide, NO）为内皮依赖性舒张因子,被称为抗粥样硬化因子,E选择素（endothelial leukocyte adhesion molecule 1, E-selectin）为内皮特异性,为粥样硬化因子。本研究通过高糖环境下体外培养的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）探讨白藜芦醇对高糖环境下血管内皮细胞中的效应和作用机制,为其在在临床及科研领域的应用提供依据。方法：选取2013年在潍坊市人民医院妇产科取正常分娩的健康新生儿10-15cm的脐带置于无菌脐带保存液,磷酸盐缓冲液（phosphate buffered solution, PBS）洗净血液,应用0.25%胰蛋白酶室温消化分离脐血管内皮细胞,脐血管内皮细胞接种于含有20%浓度的胎牛血清（fetal bovine serum, FBS）的DMEM （dulbecco’s modified eagle medium）培养液瓶中,培养液每2-3天更换原培养液的一半以移除未粘附的细胞,并分离细胞、接种细胞,应用免疫组化法识别血管性假血友病因子（von Willebrand factor, vWF）以鉴定人脐静脉血管内皮细胞。细胞成长良好后弃培养液,PBS洗2次,0.25%胰蛋白酶和0.02%乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid, EDTA）消化并传代,保留第二代和第三代细胞。当覆盖率达到80%时具备实验条件,并作为实验对照组。实验分为对照组,高糖-脂培养组（32.8 mmol/L葡萄糖和0.45 mmol/L棕榈酸）,白藜芦醇治疗组（32.8mmol/l葡萄糖、0.45 mmol/L棕榈酸、0.2μmol/l白藜芦醇4小时预处理并在先前制备的含有20%浓度的的DMEM培养液中培养12小时）,Trizol法分离RNA,通过RT-PCR （reverse transcription polymerase chain reaction）以看家基因β-肌动蛋白基因（β-actin gene）作为内参检测E选择素mRNA表达水平。由100 nmol/1胰岛素所诱导30分钟后的培养细胞上清液,用硝酸还原酶法测定分析不同实验组的一氧化氮。通过检测对照组,高糖-高组、白藜芦醇治疗组的E选择素mRNA和NO水平来了解其对血管内皮细胞的作用。紫外分光光度计法测量细胞蛋白浓度。在不包含抗生素的培养基中接种对照组细胞（无高糖-脂处理）,细胞融合达60%时通过siRNA沉默E选择素表达,24小时后收集细胞。其中E选择素表达沉默的作为实验组,未沉默的作为对照组。用40 μmol/l、80μmol/l白藜芦醇孵育细胞,RT-PCR检测E选择素mRNA表达以了解沉默效果。HUVECs用含20%胎牛血清的DMEM培养液配成单细胞悬液,实验前饥饿处理。按设定的浓度将白藜芦醇（40μmol/l、80μmol/1）溶解于PBS溶液中,按照分组加入各孔,置于37℃培养箱中后迅速吸出药物溶液,并用4℃的PBS溶液洗3次,再加入1 m1水,将孔中细胞吹下来,液氮中反复冻融3次,高速离心20分钟破碎细胞。高效液相色谱仪测定细胞中白藜芦醇的含量,了解E选择素沉默对细胞白藜芦醇摄取的影响（40μmol/l、80μmol/l）.数据结果采用SPSS 17.0统计软件进行统计学检验,计量资料采用壮s表示,计量资料比较采用碧检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果：1.E选择素基因沉默效果良好。用40μmo/1白藜芦醇浓度处理E选择素基因沉默处理的,其白藜芦醇的细胞摄取量为2.62 nmol/106,低于E选择素基因未沉默处理的（7.61 nmol/106） （P<0.01）,用80μmo/l白藜芦醇浓度处理E选择素基因沉默处理的,其白藜芦醇的细胞摄取量5.35 nmol/106,低于E选择素基因未沉默处理的（9.12 nmol/106） （P<0.01）提示E选择素至少部分参与白藜芦醇的细胞摄取过程。2.高糖-脂组E选择素mRNA的表达为0.61,大于对照组的0.52,白藜芦醇治疗组E选择素mRNA表达为0.55,小于高糖-脂组E选择素mRNA表达（P<0.05）。高糖-脂环境下E选择素mRNA表达增高,而白藜芦醇治疗可以减少E选择素mRNA的表达。3.高糖-脂组N0的表达为68.25μmol/l,小于对照组的76.34μmol/l,白藜芦醇高糖治疗组N0的表达为110.27μmol/l,大于高糖-脂组N0的表达（P<0.05）。高糖-脂环境下N0的分泌减少,而白藜芦醇治疗可以增加NO的分泌。结论：白藜芦醇能增加血管内皮细胞NO的分泌,减少E选择素mRNA的表达,起到改善、保护高糖-脂培养的内皮细胞的作用,因此可能成为预防和治疗糖尿病血管病变方面的药物。
杨春悦[7]（2015）在《不同危险分层高血压家族史的健康青年血浆Es、CGRP和NO水平的研究》文中研究表明目的通过检测双亲均为高血压患者的健康青年血浆E-选择素（E-selectin,Es）、降钙素基因相关肽（Calcitonin gene related peptide,CGRP）、一氧化氮（Nitric oxide,NO）的含量,探讨它们在原发性高血压病进程中的作用和地位,以及与遗传的相关性,为筛检高血压病高危人群提供客观数据资料,为高血压病一级预防及高血压病治疗的新理念提供依据。方法随机选择父母均为高血压患者的26-40岁健康青年120例作为研究对象。根据父母心血管风险将研究对象分为低危组、中危组、高危组和极高危组,每组各30例。选择无高血压病家族史的健康青年30例为正常对照组。采集受试者清晨空腹肘静脉血,分别以酶联免疫吸附法、放射免疫法、硝酸还原比色法测定血浆中Es、CGRP和NO的含量,全自动生化分析仪测定空腹血糖（fasting Blood glucose,FBG）、总胆固醇（total cholesterin,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、尿酸（uric acid,UA）。结果4个不同级别危险组与正常对照组比较,血浆中Es、CGRP的水平均升高,NO水平降低。差异有统计学意义,P<0.010.05。不同级别危险组之间血浆Es、CGRP、NO含量差异有显着意义,Es、CGRP随双亲危险度增加而增高,NO水平随双亲危险度增加而降低,P<0.05。结论双亲均为高血压患者的健康青年,在尚未出现血压升高之前,其血浆中的Es、CGRP、NO水平已经发生明显变化,可为筛检高血压高危人群提供数据资料,且这些变化可能是高血压高危人群的血压能够维持在正常水平的部分因素,并与遗传、双亲危险分层有关。
郭婧[8]（2014）在《治疗奶牛乳房炎的抗炎免疫蒙兽药成分和成分复方的筛选及其作用机理研究》文中进行了进一步梳理奶牛乳房炎在奶牛的生产与饲养过程中一直是最严重最难防治的疾病之一,临床使用抗生素类药物治疗过程中导致药物残留,细菌耐药性等问题都亟待解决,而且易复发是目前最棘手的问题。蒙兽药复方因其具备的毒副作用、化学残留、耐药性极低等优点,是亟待发展的治疗新方法。试验采用正交法筛选治疗奶牛乳房炎蒙兽药复方“特润舒都乐”的抗炎免疫成分,并筛选出成分正交复方研究其对乳腺炎模型小鼠的抗炎免疫功能的影响。实验主要结果如下：1.以抗菌保护率为指标,采用正交法筛选出蒙兽药复方“特润舒都乐”的抗炎免疫成分的正交复方为A282C3D1E2F1G3,即A、B和E采用中剂量,C采用高剂量,D、F和G不用药。2.该成分正交复方的最大耐受量为5g/kg·b·w.根据《兽药试验技术规范编绘-新兽药-一般毒性试验技术要求》的规定,该成分正交复方A282C3D1E2F1G3无毒,安全可用。3.该成分正交复方治疗由三种致病菌混合感染的实验性小鼠乳腺炎模型的临床症状显示,’能够有效抵抗致病菌的入侵,减轻小鼠乳腺组织的充血、肿胀,能够促进乳腺的恢复。4.成功提取了栀子苷、姜黄素、大黄酸和川楝素四种有效成分,它们各自提取物中所占比例分别为73%、73%、79%、63%。5.该成分正交复方能显着提高小鼠的免疫功能：能显着提高正常小鼠的脾脏指数（P<0.05）;极显着提高正常小鼠的吞噬指数K和吞噬系数A（P<D01）；显着提高正常小、鼠的NK细胞活性（P<0.005）；对正常小鼠外周血CD3+T细胞百分率、CD4+T细胞百分率、CD8+T细胞百分率、CD19+B细胞百分率无显着影响（P>0.05）,但能显着提高正常小鼠外周血中CD4+T细胞百分率／CD8+T细胞百分率的比值和CD14+细胞百分率（P<0.05）；能极显着升高模型小鼠乳腺组织中IL-2水平（P<n001）,显着升高模型小鼠乳腺组织中IFN-γ水平显着（P<0.05）,显着抑制IL-6、IL-8、TNF-α和NAGase的升高(P<0.05,对IgG、IgA水平无显着影响（P>0.05）。由此表明,该成分正交复方能通过提高单核巨噬细胞的吞噬力、NK细胞的活性来提高小鼠的非特异性免疫功能,通过提高CD4+T细胞百分率／CD8+T细胞百分率比值和CD14+细胞百分率束提高小鼠的特异性免疫功能,通过调节IL-2等细胞因子和酶的分泌量提高免疫、降低炎症损伤。6.该成分正交复方的抗炎试验研究结果如下：能显着抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性的升高（P<0.05）;能够显着抑制致炎部位的肿胀（P<0.05）,并能显着抑制甲醛所致小鼠肿胀足中PGE2含量的升高（P<0.05）；能极显着抑制由脱脂棉导致的肉芽肿（P<0.01）；能极显着的降低小鼠血清中E-selectin和ICAM-1的含量（P<0.01）。由此表明,该成分正交复方能有效地调控炎症反应,将其控制在适当范围内。
孙鹂[9]（2011）在《炎症反应与白细胞迁移》文中研究指明人体自我防御中,白细胞定向迁移是先天性免疫必不可少的步骤。然而白细胞在创伤部位的募集也导致了炎症反应的发生。白细胞的移动和它周围微环境的变化精确地调控着一系列级联事件。趋化因子在白细胞迁移过程中起着重要的作用,对介导细胞黏附和迁移的趋化因子的深入研究将有助于对疾病病理状态的了解和控制。
彭小龙[10]（2010）在《青藤碱对大鼠急性肾缺血再灌注损伤保护作用的研究》文中进行了进一步梳理目的:探讨青藤碱（Sinomenine, SIN）预处理对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法:采用John D Hughes等的单动脉夹闭法建立大鼠急性肾缺血再灌注损伤（acute renal ischemia reperfusion injury,ARIRI）模型。选用健康雄性SD大鼠30只,随机分为5组:（1）对照组,6只,仅切除右肾;（2）缺血再灌注（IRI）组,12只,根据缺血再灌后检测时间点的不同又分为再灌0h组、再灌4h组,均行右肾切除并用无创动脉夹夹闭左肾动脉45分钟后解除夹闭;（3）青藤碱预处理（SIN）组,12只,手术过程同IRI组,且同样分为再灌0h组、再灌4h组。SIN预处理组于术前24小时及术前1小时用l0mg/ml青藤碱溶液按80mg/kg腹腔注射;对照组及IRI组术前腹腔注射等量的生理盐水。各组于相应的时间点采集下腔静脉血及左肾组织并处死实验动物,检测各组大鼠血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、β2-微球蛋白水平;血清、肾组织超氧化物岐化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量;切取左肾组织行肾小管损伤积分评定、用免疫组化法检测肾组织黏附分子-1（ICAM-1）表达量。结果:（1）与对照组相比,缺血再灌注组及青藤碱预处理组各时相血清Cr、BUN、β2-M水平均升高（P<0.05）;但青藤碱预处理组血清Cr、BUN、β2-M水平较同时相缺血再灌注组低,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）与对照组相比,缺血再灌注组及青藤碱预处理组各时相血清及肾组织SOD活性降低而MDA含量升高（P<0.05）;但青藤碱预处理组与同时相缺血再灌注组相比,血清SOD活性升高而MDA含量降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。（3）青藤碱预处理组肾小管损伤积分低于同时相缺血再灌注组,差异有统计学意义（P<0.05）。（4）青藤碱预处理组肾组织黏附分子-1表达量较同时相缺血再灌注组明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）,且肾组织黏附分子-1表达量与肾小管损伤积分值二者呈正相关（r=0.888,P=0.000）。结论:（1）青藤碱对大鼠急性肾缺血再灌注损伤有保护作用。（2）青藤碱可能是通过抗氧化作用;抑制黏附分子-1的表达,减轻炎症反应过程,从而对急性肾缺血再灌注损伤起保护作用的。
二、E-选择素及其在炎症中的作用研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、E-选择素及其在炎症中的作用研究进展（论文提纲范文）
（1）MiR-145-5p靶向KLFs调控人角膜成纤维细胞中炎性因子的表达（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 圆锥角膜 |
| 1.2 圆锥角膜发病中的生物力学问题 |
| 1.3 圆锥角膜与促炎因子 |
| 1.4 KLFs |
| 1.4.1 KLFs与圆锥角膜 |
| 1.4.2 KLFs参与促炎因子调控 |
| 1.5 MicroRNAs |
| 1.5.1 MiRNAs与眼部疾病 |
| 1.5.2 MiRNAs与炎症 |
| 1.5.3 MiRNAs与 KLFs |
| 1.6 本文研究内容 |
| 第2章 力学刺激对角膜成纤维细胞中转录因子KLF4与KLF5 和炎性因子表达的影响 |
| 2.1 实验方法 |
| 2.1.1 实验仪器及实验试剂 |
| 2.1.2 原代人角膜成纤维细胞的提取及培养 |
| 2.1.3 待测基因引物的设计与合成 |
| 2.1.4 力学加载 |
| 2.1.5 细胞转染 |
| 2.1.6 mRNA基因表达检测分析 |
| 2.1.7 数据分析 |
| 2.2 实验结果 |
| 2.2.1 机械拉伸刺激对人角膜成纤维细胞KLF4和KLF5 表达的影响 |
| 2.2.2 机械拉伸刺激对角膜成纤维细胞炎性因子表达的影响 |
| 2.2.3 机械拉伸刺激对角膜成纤维细胞MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13 和MMP-14 表达的影响 |
| 2.2.4 机械拉伸刺激对角膜成纤维细胞中COL1A2、COL3A1、LOX-1、LOX-2和LOX-4 表达的影响 |
| 2.2.5 KLF4与KLF5 在人角膜成纤维细胞中的干扰效率 |
| 2.2.6 人角膜成纤维细胞中KLF4与KLF5 对炎性因子表达的影响 |
| 2.2.7 人角膜成纤维细胞中KLF4与KLF5对MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13和MMP-14 的表达的影响 |
| 2.2.8 人角膜成纤维细胞中KLF4与KLF5对COL1A2、COL3A1、LOX-1、LOX-2和LOX-4 的表达的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 本章小结 |
| 第3章 MiR-145-5p通过调控KLF4、KLF5 的表达调控角膜成纤维细胞中炎性因子及基质重塑相关蛋白的表达 |
| 3.1 实验方法 |
| 3.1.1 实验仪器及实验试剂 |
| 3.1.2 原代角膜成纤维细胞的提取及培养 |
| 3.1.3 KLF4与KLF5 靶定miRNA的筛选 |
| 3.1.4 待测基因引物的设计与合成 |
| 3.1.5 力学加载 |
| 3.1.6 MiR-145-5p mimics和 inhibitor的转染 |
| 3.1.7 MiRNAs的基因表达检测分析 |
| 3.1.8 数据分析 |
| 3.2 实验结果 |
| 3.2.1 KLF4与KLF5 相关靶定miRNAs的筛选 |
| 3.2.2 机械拉伸条件下KLF4、KLF5 及相关miRNAs的表达 |
| 3.2.3 MiR-145-5p在人的角膜成纤维细胞中的干扰与过表达效率 |
| 3.2.4 MiR-145-5p对人角膜成纤维细胞中KLF4和KLF5 表达的影响 |
| 3.2.5 MiR-145-5p对人角膜成纤维细胞中IL-1β、IL-6、IL-8和ICAM-1 表达的影响 |
| 3.2.6 MiR-145-5p对人角膜成纤维细胞中MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13和MMP-14 表达的影响 |
| 3.2.7 MiR-145-5p对人角膜成纤维细胞中COL1A2、COL3A1、LOX-1、LOX-2和LOX-4 表达的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 总结与展望 |
| 4.1 结论 |
| 4.2 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
（3）E-选择素S128R基因多态性与复发性阿弗他溃疡相关性的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 符号说明表 |
| 前言 |
| 研究对象与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 附录一 |
| 附录二 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 个人简介 |
| 开题、中期及学位论文答辩委员组成 |
（4）Hsp27MP对实验性脑梗死及罗氟司特对SAH后EBI保护作用机制研究（论文提纲范文）
| 论文Ⅰ HSP27MP对实验性脑梗死的保护作用及机制研究 |
| 中文摘要Ⅰ |
| AbstractⅠ |
| 符号说明Ⅰ |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 一. 实验试剂 |
| 二. 实验仪器 |
| 三. HSP27-FITC MP及HSP27MP合成 |
| 四. 实验动物及分组 |
| 五. 模型制作及给药 |
| 六. rCBF测定 |
| 七. 神经行为学功能评分 |
| 八. 脑梗死体积 |
| 九. 血脑屏障通透性评估 |
| 十. 脑水肿程度检测 |
| 十一. 免疫荧光染色 |
| 十二. Western blot检测ASK1及p-ASK1的表达 |
| 十三. 统计学分析 |
| 结果 |
| 一. HSP27 MP-FITC在脑实质内的分布 |
| 二. HSP27-FITC MP与神经元、小胶质细胞和ASK1共定位 |
| 三. HSP27 MP减少脑梗死体积,保护BBB的完整性 |
| 四. HSP27 MP减轻脑梗死后脑水肿和神经功能缺损 |
| 五. HSP27 MP对小鼠实验性脑梗死后脑血流量的影响 |
| 六. HSP27 MP抑制脑梗死小胶质细胞的表达和激活 |
| 七. HSP27 MP抑制脑梗死后神经元凋亡 |
| 八. HSP27 MP抑制脑梗死后ASK1和p-ASK1的表达水平 |
| 讨论 |
| 一. 光化学法诱导脑梗死模型 |
| 二. Hsp27、ASK1与缺血性脑卒中 |
| 三. 多肽类药物的血脑屏障通透性 |
| 四. 脑梗死后炎性反应 |
| 结论 |
| 附图表 |
| 参考文献 |
| 论文Ⅱ 罗氟司特对大鼠SAH后EBI保护作用及机制研究 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 符号说明Ⅱ |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 一. 实验试剂 |
| 二. 实验仪器 |
| 三. 实验动物及分组 |
| 四. 模型制作及给药 |
| 五. 行为学功能评分 |
| 六. 基底动脉HE染色检测SAH后脑血管痉挛 |
| 七. 免疫荧光染色IL-1β、IL-6、TNFα |
| 八. ELISA检测脑组织及外周血液中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量 |
| 九. active caspase 3染色 |
| 十. TUNEL染色 |
| 十一. Iba-1免疫荧光染色 |
| 十二. 伊文思蓝外渗法检测血脑屏障通透性的变化 |
| 十三. 统计学分析 |
| 结果 |
| 一. 罗氟司特改善SAH后神经功能缺损 |
| 二. 罗氟司特抑制实验性SAH后血脑屏障通透性和脑水肿 |
| 三. 罗氟司特降低SAH后IL-1β,IL-6和TNF-α的水平 |
| 四. 罗氟司特抑制SAH后神经元凋亡 |
| 五. 罗氟司特抑制SAH后小胶质细胞 |
| 六. 罗氟司特有效减缓实验性SAH后早期CVS |
| 讨论 |
| 一. SAH后EBI的病理生理机制 |
| 二. SAH后神经炎症 |
| 三. 磷酸二酯酶-4抑制剂与神经炎症 |
| 结论 |
| 附图表 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 中文综述 |
| 参考文献 |
| 外文论文 |
| 附件 |
（5）“上火”人群中Activin A、E-selectin的差异表达研究（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 试剂与仪器 |
| 1.6 检测指标与方法 |
| 1.6.1 酶联免疫吸附法检测activin A、E-selectin的含量 |
| 1.6.2 RT-PCR实验检测activin A、E-selectin的基因表达量 |
| 1.7 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 血清activin A、E-selectin含量在上火人群中的表达 |
| 2.2 外周血activin A、E-selectin基因水平在上火人群中的表达 |
| 3 讨论 |
| 3.1 中医对“上火”的认识 |
| 3.2“上火”与炎性反应之间的关系 |
| 3.3 激活素A、E选择素与“上火”的关系 |
（6）白藜芦醇对高糖环境下血管内皮细胞的效应和作用机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 对象、方法、结果 |
| 1. 脐静脉内皮细胞的培养和鉴别 |
| 2. RT-PCR法检测白藜芦醇E选择素表达的影响 |
| 3. E选择素基因沉默 |
| 4. E选择素在内皮细胞摄取白藜芦醇的作用 |
| 5. 检测一氧化氮含量 |
| 6. 统计学分析 |
| 第三章 讨论 |
| 第四章 结论 |
| 附图表 |
| 参考文献 |
| 英文论文 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 论文发表情况 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
（7）不同危险分层高血压家族史的健康青年血浆Es、CGRP和NO水平的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 第二章 结果 |
| 第三章 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 E-选择素、降钙素基因相关肽、一氧化氮与原发性高血压的关系 |
| 综述参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
（8）治疗奶牛乳房炎的抗炎免疫蒙兽药成分和成分复方的筛选及其作用机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 插图和附表清单 |
| 缩略语表 |
| 1 引言 |
| 1.1 研究目的和意义 |
| 1.2 奶牛乳房炎 |
| 1.2.1 奶牛乳房炎的种类 |
| 1.2.2 奶牛乳房炎的发病原因 |
| 1.2.3 奶牛乳房炎的危害 |
| 1.2.4 奶牛乳房炎的防治 |
| 1.3 蒙兽药对奶牛乳房炎的研究现状 |
| 1.4 蒙兽药有效成分的研究现状 |
| 2 蒙兽药复方“特润舒都乐”抗炎免疫成分正交复方的筛选 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 奶牛乳房炎主要致病菌MLD(Minimum Lethal Dosage,MLD)的测定(100%BLD) |
| 2.2.2 奶牛乳房炎主要致病菌混合菌MLD的测定(80%MLD) |
| 2.2.3 蒙兽药单一抗炎免疫成分小鼠体内抗菌保护率测定 |
| 2.2.4 蒙兽药抗炎免疫成分正交复方小鼠体内保护率的测定 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 奶牛乳房炎主要致病菌MLD的测定(100%BLD) |
| 2.3.2 奶牛乳房炎主要致病菌混合菌MLD的测定结果(80%MLD) |
| 2.3.3 蒙兽药单一抗炎免疫成分小鼠体内抗菌保护率的测定结果 |
| 2.3.4 蒙兽药抗炎免疫成分正交复方小鼠体内保护率的测定结果 |
| 2.4 讨论 |
| 3 蒙兽药抗炎免疫成分复方最大耐受量的测定 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 方法 |
| 3.3 结果 |
| 4 蒙兽药抗炎免疫成分的提取 |
| 4.1 材料 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 栀子苷的提取及定性定量分析 |
| 4.2.2 姜黄素的提取及定性定量分析 |
| 4.2.3 大黄酸的提取及定性定量分析 |
| 4.2.4 川楝素的提取及定性定量分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 栀子苷的定性定量分析结果 |
| 4.3.2 姜黄素的定性定量分析结果 |
| 4.3.3 大黄酸的定性定量分析结果 |
| 4.3.4 川楝素的定性定量分析结果 |
| 5 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠免疫功能的影响 |
| 5.1 材料 |
| 5.2 方法 |
| 5.2.1 乳腺炎模型小鼠的制备 |
| 5.2.2 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠乳房炎模型的治疗作用 |
| 5.2.3 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠免疫脏器指数的影响 |
| 5.2.4 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响 |
| 5.2.5 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠脾脏自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)活性的影响 |
| 5.2.6 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠外周血淋巴细胞及其亚群的影响 |
| 5.2.7 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠乳腺组织中细胞因子和酶的影响 |
| 5.3 数据处理 |
| 5.4 结果 |
| 5.4.1 乳腺炎模型小鼠的制备 |
| 5.4.2 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠乳房炎模型的治疗效果 |
| 5.4.3 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠免疫脏器指数的影响 |
| 5.4.4 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响 |
| 5.4.5 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠NK细胞活性的影响 |
| 5.4.6 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠外周血淋巴细胞及其亚群的影响 |
| 5.4.7 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠乳腺组织中细胞因子和酶的影响结果 |
| 5.5 讨论 |
| 5.5.1 蒙兽药抗炎免疫成分复方对乳腺炎模型小鼠治疗作用的影响 |
| 5.5.2 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠免疫脏器指数的影响 |
| 5.5.3 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响 |
| 5.5.4 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠NK细胞活性的影响 |
| 5.5.5 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠外周血淋巴细胞及其亚群的影响 |
| 5.5.6 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠乳腺组织中细胞因子和酶的影响 |
| 6 蒙兽药抗炎免疫成分复方抗炎作用的研究 |
| 6.1 材料 |
| 6.2 方法 |
| 6.2.1 蒙兽药抗炎免疫成分复方对醋酸所致小鼠毛细血管通透性升高的影响 |
| 6.2.2 蒙兽药抗炎免疫成分复方对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀的影响 |
| 6.2.3 蒙药抗炎免疫成分复方对甲醛所致小鼠足趾肿胀的影响 |
| 6.2.4 蒙兽药抗炎免疫成分复方对甲醛致小鼠肿胀足中PGE_2含量的影响 |
| 6.2.5 蒙兽药抗炎免疫成分复方对棉球所致小鼠肉芽肿的影响 |
| 6.2.6 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠血清中E-selectin和ICAM-1含量的影响 |
| 6.3 数据分析 |
| 6.4 结果 |
| 6.4.1 蒙兽药抗炎免疫成分复方对醋酸所致小鼠毛细血管通透性升高的影响 |
| 6.4.2 蒙兽药抗炎免疫成分复方对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀的影响 |
| 6.4.3 蒙兽药抗炎免疫成分复方对甲醛所致小鼠足趾肿胀的影响 |
| 6.4.4 蒙兽药抗炎免疫成分复方对甲醛致小鼠肿胀足中PGE_2含量的影响 |
| 6.4.5 蒙兽药抗炎免疫成分复方对棉球所致小鼠肉芽肿的影响 |
| 6.4.6 蒙兽药抗炎免疫成分复方对小鼠血清中E-selectin和ICAM含量的影响 |
| 6.5 讨论 |
| 7 总体讨论 |
| 8 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（9）炎症反应与白细胞迁移（论文提纲范文）
| 1 黏附分子 |
| 1.1 整合素 |
| 1.2 选择素 |
| 1.3 免疫球蛋白类分子 |
| 1.4 钙调素 |
| 2 趋化因子 |
| 3 白细胞向组织的定向迁移 |
| 3.1 募集 |
| 3.2 着边 |
| 3.3 捕获 |
| 3.4 滚动 |
| 3.5 活化 |
| 3.6 紧密黏附 |
| 3.7 移行 |
| 4 展望 |
（10）青藤碱对大鼠急性肾缺血再灌注损伤保护作用的研究（论文提纲范文）
| 主要英文缩略词索引 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 正文 |
| 前言 |
| 材料与设备 |
| 实验方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 读研期间发表的论文 |
| 致谢 |
四、E-选择素及其在炎症中的作用研究进展（论文参考文献）
- [1]MiR-145-5p靶向KLFs调控人角膜成纤维细胞中炎性因子的表达[D]. 王思佳. 太原理工大学, 2021
- [2]败血症患儿血清E-selectin、sPECAM-1表达的相关性分析[J]. 王娟,张健,毕少华,郑洪,刘光辉. 武警后勤学院学报(医学版), 2020(05)
- [3]E-选择素S128R基因多态性与复发性阿弗他溃疡相关性的研究[D]. 胡欣培. 宁夏医科大学, 2019(08)
- [4]Hsp27MP对实验性脑梗死及罗氟司特对SAH后EBI保护作用机制研究[D]. 吴庆建. 山东大学, 2018(11)
- [5]“上火”人群中Activin A、E-selectin的差异表达研究[J]. 汪琴静,徐莉,包洁,季巾君,谢冠群,范永升. 世界中医药, 2017(12)
- [6]白藜芦醇对高糖环境下血管内皮细胞的效应和作用机制[D]. 刘珣. 山东大学, 2016(10)
- [7]不同危险分层高血压家族史的健康青年血浆Es、CGRP和NO水平的研究[D]. 杨春悦. 青岛大学, 2015(03)
- [8]治疗奶牛乳房炎的抗炎免疫蒙兽药成分和成分复方的筛选及其作用机理研究[D]. 郭婧. 内蒙古农业大学, 2014(01)
- [9]炎症反应与白细胞迁移[J]. 孙鹂. 安徽农业科学, 2011(21)
- [10]青藤碱对大鼠急性肾缺血再灌注损伤保护作用的研究[D]. 彭小龙. 南华大学, 2010(05)