一、宫内生长迟缓儿胰岛素样生长因子及其结合蛋白水平的变化（论文文献综述）
赵畅[1]（2021）在《能量负平衡奶牛产后乏情的关键蛋白筛选及作用机制研究》文中研究指明奶牛产后能量负平衡（NEB）会抑制卵泡发育,使得乏情率升高。尽管集约化牛场应用同期发情定时输精技术（TAI）来提高奶牛发情率,但仍有部分NEB奶牛产后经TAI处理后无优势卵泡供机体选择排卵,出现乏情表现。目前,高产奶牛产后NEB所致的乏情率升高已成为制约奶牛繁殖效率的一大瓶颈。为此,本研究针对这一问题,通过NEB乏情奶牛血清、卵泡液和卵巢皮质组织的蛋白质组学分析的体内实验,结合ADPN对低糖培养奶牛体外颗粒细胞（GCs）生长发育和类固醇激素合成的影响的体外实验,阐明NEB奶牛产后乏情蛋白质组学变化特征,明确所筛选的差异蛋白如脂联素（ADPN）与奶牛产后乏情的关系及其对奶牛乏情发生的风险预警作用,以及ADPN影响奶牛产后乏情和体外GCs生长发育的分子机制,为今后研究奶牛产后NEB导致乏情的机制提供理论依据。1.体内实验。为了明确奶牛产后乏情蛋白组学特征谱以及差异蛋白的作用,本实验在奶牛产后14-21 d根据血清中β-羟丁酸（BHBA）浓度高于1.20 mmol/L,同时葡萄糖（Glu）浓度低于2.80 mmol/L,被分成能量负平衡组（NEB,n=30）和能量平衡组（PEB,n=30）,跟踪至产后55-60 d;在产后50-55d根据是否发情及卵泡直径大小选择NEB组乏情奶牛（NEB-A,n=6,卵泡直径<8 mm）和PEB组发情奶牛（PEB-E,n=6,优势卵泡直径在15-20 mm之间）进行屠宰采集样品,开展了系列实验,结果如下:（1）应用TMT/LC-MS/MS蛋白组学技术筛选NEB-A和PEB-E奶牛血清、卵泡液和卵巢皮质组织的差异表达蛋白（DEP）,分析DEP功能和富集通路等。与PEB-E组相比,NEB-A组奶牛血清中DEP有82个下调,78个上调,主要富集通路包括:补体和凝血系统、P13K-AKT通路、胰高血糖素信号通路、MAPK通路等;NEB-A组奶牛卵泡液中DEP有135种下调,37种上调,主要富集通路包括:脂质代谢、IGF调节系统、免疫系统等;NEB-A组奶牛卵巢皮质组织中DEP有88个下调,70个上调,主要富集通路包括:类固醇激素代谢、脂肪酸代谢、免疫系统等。（2）应用Western blot验证筛选的5种DEP,即超氧化物歧化酶（SOD）、视黄醇结合蛋白4（RBP4）、胰岛素样生长因子2（IGF2）、ADPN、和C反应蛋白（CRP）在卵泡液和血液中的表达水平,与组学结果一致。同时,验证试验奶牛卵巢皮质组织中AKT和ERK1/2磷酸化水平,与PEB-E组相比,AKT和ERK1/2在NEB-A组奶牛卵巢皮质组织的磷酸化水平显着下调（p<0.05）。（3）应用免疫组化对ADPN在卵巢组织中进行定位,与PEB-E组相比,NEB-A组奶牛ADPN在卵巢髓质下调,与血液、卵泡液和脂肪组织中的下调一致（p<0.05）,证实ADPN主要分布于卵巢髓质。（4）NEB和PEB奶牛血清中肝功指标、胰岛素调控相关指标及血清和卵泡液中ADPN和Glu,经生化分析、聚类分析、二元逻辑回归分析、风险指数分析和受试者工作特征曲线（ROC）分析发现,血清中ADPN与胰岛素调控和肝功指标呈强相关,卵泡液中Glu与ADPN呈正相关。并且,奶牛产后14-21 d血清中ADPN<2.365μg/m L可以用于奶牛产后乏情发生的风险预警。体内实验结果表明,奶牛产后经历NEB后血液、卵泡液及卵巢皮质组织中DEP主要通过富集通路影响奶牛产后发情,其中AKT和ERK1/2在奶牛卵巢皮质组织的磷酸化水平下调,以及血液、卵泡液和卵巢组织中ADPN的下调在奶牛产后乏情发生中起了重要的作用。2.体外实验。为了阐明低糖/ADPN在奶牛卵泡发育或GCs生长发育的作用,本实验在建立低糖培养体外牛GCs模型基础上,开展了系列实验,结果如下:（1）用Western blot检测低糖培养和正常培养下牛GCs细胞周期蛋白（CCNA1、CCND1、CCNE2、CDK1）、类固醇激素合成蛋白（St AR、HSD3B1）、ADPN蛋白受体（Adipo R2）的表达水平,与正常培养相比,低糖培养GCs细胞周期蛋白、类固醇激素合成蛋白、Adipo R2的表达水平都显着下调（p<0.05）。（2）在低糖培养下,添加低（0.1μg/m L）、中（0.5μg/m L）和高剂量（1μg/m L）的牛重组ADPN蛋白,仅添加蛋白包被溶剂为对照组。在处理12 h、24 h、48 h后,用CCK8、Western blot检测细胞活性、ADPN受体R2、细胞周期蛋白、类固醇激素合成蛋白的蛋白表达水平,用放射免疫方法检测培养基中E2和P4含量。与其他组相比,高剂量组48 h后细胞活性最高;与对照组相比,高剂量组St AR蛋白水平极显着升高（p<0.05）,三组HSD3B1蛋白水平极显着升高（p<0.01）;低剂量组GCs分泌E2能力无显着变化,高浓度ADPN显着增加E2合成能力;与对照组相比,不同剂量ADPN对GCs分泌P4无明显影响。（3）在低糖培养下,外源性添加LY294002（PI3K/AKT抑制剂）和高剂量ADPN,在处理12 h、24 h、48 h后,用Western blot检测AKT磷酸化水平以及CDK2、St AR、HSD3B1、Adipo R2的蛋白水平,用q-PCR检测CYP19A1、3β-HSD的基因表达水平,用放免法检测不同组中E2、P4含量。与对照组相比,添加ADPN+PI3K抑制剂组细胞活性显着下降（p<0.01）,CDK2蛋白水平极显着下降（p<0.01）,St AR和HSD3B1蛋白水平极显着下降（p<0.01）,培养基中P4含量无明显变化,但E2含量显着下降（p<0.05）。体外实验结果表明,高剂量ADPN经Adipo R2激活PI3K-AKT-CDK2通路刺激低糖环境下GCs类固醇激素E2的分泌,增强细胞活性,促进细胞生长发育。综上所述,本研究获得了奶牛产后乏情蛋白组谱,发现NEB通过补体和凝血系统、P13K-AKT通路、胰高血糖素信号通路、MAPK通路、脂肪酸代谢、免疫系统调控以及IGF调节系统等主要富集通路影响奶牛产后卵泡发育,确立了ADPN对NEB奶牛产后乏情发生的风险预警作用,证实了ADPN可以经Adipo R2-PI3K-AKT通路影响低糖培养下牛GCs活性和类固醇激素合成,进而调控卵泡生长发育。
白瑾[2]（2021）在《PI3K/AKT信号通路在IGF1诱导HTR-8/SVneo细胞分泌HCG和Pg的作用研究》文中指出目的:以HTR-8/SVneo细胞为模式细胞,检测胰岛素样生长因子1（IGF1）对PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达、细胞凋亡以及人绒毛膜促性腺激素（HCG）和孕酮（Pg）分泌水平的影响,探讨PI3K/AKT信号通路在IGF1诱导HTR-8/SVneo细胞分泌HCG和Pg中的作用。方法:培养HTR-8/SVneo细胞,分别给予IGF1以及LY294002（PI3K抑制剂）处理。（1）CCK-8法被用于检测IGF1与LY294002作用后对细胞活力的影响,再根据Wes全自动蛋白表达定量分析系统明确促进或抑制PI3K的最小剂量,从而确定作用剂量分组:对照组、IGF1处理组（10 ng/m L）、LY294002处理组（10?M）、LY294002+IGF1联合处理组（10?M LY294002预处理30 min后加入10 ng/m L IGF1）。（2）q RT-PCR被用来检测PI3K/AKT通路基因PI3K、AKT以及细胞凋亡相关因子基因Bad、Cyt c和Caspase-3的m RNA表达量;（3）采用Wes测定PI3K、p-PI3K、AKT与p-AKT四个信号通路蛋白以及Bad、p-Bad、Cyt c与Caspase-3四个凋亡相关蛋白的表达水平;（4）通过FITC/PI双染法测定细胞的总体凋亡水平。（5）通过ELISA来测定细胞上清HCG及Pg的合成分泌量。结果:（1）IGF1与LY294002对细胞存活率的作用:10、50、100和200 ng/m L IGF1作用于HTR-8/SVneo细胞24 h和48 h后,细胞存活率均显着增强（P<0.05）,50 ng/m L IGF1促进细胞存活作用最强;5、10、20、40?M LY294002进行染毒,24 h和48 h后,显示该细胞的活力明显下降（P<0.05）,且表现出对时间与剂量的依赖性。（2）PI3K/AKT通路激活状况:（1）m RNA表达:对比对照组,IGF1与LY294002分别单独处理后PI3K、AKT m RNA表达水平无显着差异;相较于LY294002处理,LY294002+IGF1联合处理后PI3K、AKT m RNA相对表达量明显升高（P<0.05）。（2）蛋白表达:各组PI3K与AKT的蛋白表达量无明显变化。经IGF1处理后,p-PI3K和p-AKT的蛋白表达量明显增高,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT明显升高;LY294002降低了p-PI3K与p-AKT的表达量,p-PI3K/PI3K及p-AKT/AKT的比值也明显减低（P<0.05）;与LY294002处理组相比,LY294002+IGF1联合处理组p-PI3K、p-AKT、p-PI3K/PI3K以及p-AKT/AKT均明显增加。上述结果提示,IGF1明显激活了PI3K/AKT信号通路。（3）凋亡相关因子的表达:（1）m RNA表达:IGF1处理组Bad、Cyt c和Caspase-3 m RNA表达水平无显着变化,LY294002处理组Cyt c以及Caspase-3 m RNA的表达量明显增高（P<0.05）;LY294002+IGF1联合处理组较之于LY294002处理组Caspase-3 m RNA表达减少（P<0.05）。（2）蛋白表达:经IGF1处理后,Bad及Cyt c蛋白表达量不存在明显差异,p-Bad表达量显着增高,且p-Bad/Bad增大（P<0.05）;经LY294002处理后,Bad及Cyt c蛋白表达量均增加,p-Bad蛋白表达量与p-Bad/Bad比值均下降（P<0.05）;较之于LY294002处理组,LY294002+IGF1联合处理组Cyt c、Bad和p-Bad表达量以及p-Bad/Bad均升高（P<0.05）。pro-Caspase-3的蛋白表达在四组间未表现出显着差异。cleaved-Caspase-3蛋白表达在IGF1处理后略有降低趋势（P>0.05）,在LY294002处理后升高,LY294002+IGF1联合处理后对比LY294002处理其蛋白表达量明显降低（P<0.05）。以上结果表明,IGF1可通过促进抗凋亡因子和抑制部分促凋亡因子的蛋白表达而发挥抗凋亡作用。（4）细胞凋亡率:经IGF1处理后,较之对照组总凋亡率有降低趋势（P>0.05）,但经LY294002处理后,总凋亡率显着上升（P<0.05）;与LY294002处理组相比,联合处理组的总凋亡率降低（P<0.05）。结果提示,IGF1能够改善因PI3K抑制引发的细胞凋亡,而对正常细胞作用不明显。（5）HTR-8/SVneo细胞产生HCG和Pg的含量:10 ng/m L IGF1能够明显增加HCG的分泌水平,10?M LY294002抑制其分泌;与LY294002处理组相比,LY294002+IGF1联合处理组HCG分泌增加。与对照组相比,10 ng/m L IGF1促进Pg分泌,LY294002对Pg分泌未表现出抑制作用;与LY294002处理组相比,LY294002+IGF1联合处理组细胞Pg分泌量升高（P<0.05）。结论:IGF1通过明显活化PI3K/AKT信号通路,能够减少HTR-8/SVneo细胞的凋亡,促进了细胞的存活和增殖,进而促进HCG分泌。但IGF1促进Pg分泌则是通过调控其它信号通路实现的。
施英华[3]（2020）在《六味地黄膏摩对脑瘫幼鼠SS/GHRH表达影响的研究》文中进行了进一步梳理目的:通过前期研究发现,六味地黄膏摩具有促进脑瘫（cerebral Palsy,CP）患儿生长发育的功效,能够缩短康复疗程,但分子机制不清,本实验拟通过检测脑瘫幼鼠模型的外周与中枢生长抑素（SS）和生长激素释放激素（GHRH）蛋白表达情况,探索六味地黄膏摩促进CP幼鼠生长发育的分子机制,为六味地黄膏摩发明专利的临床推广奠定实验基础。方法:本实验按照研究标准从115只正常SD幼鼠中筛选出60只雄性幼鼠,随机分为模型组（n=40）空白对照组（n=10）和假手术组（n=10）,模型组于幼鼠出生第三日（P3）采用左侧颈总动脉结扎联合缺氧的方法制备脑瘫幼鼠模型,假手术对照组仅切开幼鼠颈部皮肤,分离左侧颈总动脉（幼鼠背侧观左侧动脉）后缝合皮肤伤口,不做其他处理,空白对照组不作任何处理,将造模成功的30只SD幼鼠随机分为三个亚组:六味地黄膏摩实验组（n=10）、润肤油对照组（n=10）、模型对照组（n=10）。六味地黄膏摩组采用六味地黄膏作为推拿介质进行推拿干预,润肤油对照组采用市售的强生婴儿润肤油作为推拿介质进行推拿干预。空白对照组、模型对照组及假手术对照组不予推拿治疗,仅在六味地黄膏摩组和润肤油推拿组推拿时与母鼠分笼饲养。各组在相同的时间点观测并记录幼鼠的体重、身长+尾长、睁眼时间,进行步态分析、负向趋地考试,取材检测外周血液、中枢下丘脑SS、GHRH的蛋白表达,采用SPSS统计软件单因素方差分析（One-Way ANOVA）、独立样本T检验（IndePendent SamPles T-Test）进行统计学比较分析,P<0.05时,差异具有统计学意义;P<0.01时,差异具有显着统计学意义。结果:1.造模后,进行翻正实验验证造模情况,模型组翻正时间为12.91±6.25s,与假手术对照组（1.42±0.34s）比较,P<0.01时,差异具有显着统计学意义。模型组与空白对照组（1.64±0.29s）比较,P<0.01时,差异具有显着统计学意义。2.经过4周推拿干预后,六味地黄膏摩组体重114.92±2.78g,与润肤油对照组（99.93±4.42g）比较,P<0.01,差异具有显着统计学差异。六味地黄膏摩组与模型对照组（87.79±3.26g）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义。六味地黄膏摩组与假手术对照组（111.87±3.17g）比较,P<0.05,差异具有统计学意义。六味地黄膏摩组与空白对照组（112.15±3.21g）比较,P<0.05,差异具有统计学意义。经过4周推拿干预后,六味地黄膏摩组身长+尾长为30.93±0.34cm,与润肤油对照组（28.80±0.54cm）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义。六味地黄膏摩组与模型对照组（26.54±0.80cm）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义。六味地黄膏摩组与假手术对照组（30.57±0.68cm）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组与空白对照组（30.54±0.72cm）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组睁眼时间为14.30±0.48d,与润肤油对照组（14.90±0.31d）比较,P<0.05,差异具有统计学意义。六味地黄膏摩组与模型对照组（16.30±0.48d）比较,P<0.05,差异具有统计学意义。六味地黄膏摩组与假手术对照组（11.80±0.42d）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义。六味地黄膏摩组与空白对照组（11.90±0.31d）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义。3.经过4周推拿干预后,通过步态分析评定幼鼠运动功能,六味地黄膏摩组离地速度（5.02±0.80s）,与润肤油对照组（3.77±0.56s）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义,六味地黄膏摩组与模型对照组（3.60±0.51s）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义。六味地黄膏摩组与假手术对照组（4.58±0.73s）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组与空白对照组（5.15±0.57s）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组步态分析足步幅长度（11.90±0.57mm）,与润肤油对照组（9.67±0.33mm）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义。六味地黄膏摩组与模型对照组（8.11±0.54mm）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义。六味地黄膏摩组与假手术（12.11±1.01mm）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组与空白对照组（11.41±1.17mm）比较,P>0.05,差异无统计学意义。经过4周推拿干预后,采用负向趋地检测幼鼠的运动反应能力,六味地黄膏摩组（1.35±0.27s）,与润肤油对照组（1.96s±0.18s）比较,P<0.05,差异具有统计学意义,六味地黄膏摩组与模型对照组（2.37±0.17s）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义。六味地黄膏摩组与假手术对照组（1.43±0.16s）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组与空白对照组（1.35±0.12s）比较,P>0.05,差异无统计学意义。4.通过4周推拿干预,六味地黄膏摩组外周SS分泌表达91.248±24.457ng/ml,与润肤油对照组（110.664±7.814ng/ml）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组与模型对照组（122.520±59.617ng/ml）比较,P<0.05,差异具有统计学意义。六味地黄膏摩组与假手术对照组为（90.188±28.466ng/ml）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组与空白对照组（88.314±22.27ng/ml）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组脑瘫幼鼠外周GHRH分泌表达为17.804±0.794ng/ml,与润肤油对照组（17.107±1.311ng/ml）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组与模型对照组（10.829±0.404ng/ml）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义。六味地黄膏摩与假手术对照组（18.328±0.897ng/ml）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组与空白对照组（18.453±1.281ng/ml）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组中枢SS表达与内参蛋白比值0.0245±0.008,与润肤油对照组（0.716±0.041）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组与模型对照组（0.967±0.127）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义。六味地黄膏摩组与假手术对照组（0.386±0.316）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义。六味地黄膏摩组空白对照组（0.390±0.008）比较,P<0.01,差异具有显着统计学意义。六味地黄膏摩组脑瘫幼鼠中枢GHRH与内参蛋白比值为1.005±0.101,与润肤油对照组（0.850±0.082）比较,P>0.05,差异无统计学意义。六味地黄膏摩组与模型对照组（0.420±0.070）比较,P<0.01,差异具有显着性统计学意义。六味地黄膏摩组与假手术对照组（0.601±0.956）比较,P<0.01,差异具有显着性统计学意义。六味地黄膏摩与空白对照组（0.612±0.226）比较,P<0.01,差异具有显着性统计学意义。结论:1.六味地黄膏摩可促进CP幼鼠的生长发育,实验结果与前期文献报道一致。2.六味地黄膏摩可以改善CP幼鼠的运动能力,实验结果与前期文献报道一致。3.六味地黄膏摩促进CP幼鼠生长发育、改善运动功能的作用可能通过下调外周及中枢SS蛋白以及上调外周及中枢GHRH蛋白表达,进而调控生长激素（Growth Hormone,GH）的释放。
黄秋生,张伟峰,孙振宏,彭维林,傅清流[4]（2019）在《早产儿血清IGF-1、IGFBP-3浓度与孕周、胎龄及体重相关性探讨》文中研究表明目的:检测早产儿血清中胰岛素样生长因子-1（IGF-1）和胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）水平,探讨其与孕周、胎龄及体重的相关性。方法:选取2017年5月—2018年10月期间在我院出生或住院的早产儿175例作为观察对象,并选取23例正常孕周、胎龄、体重的新生儿作为对照组。分别测定两组血清IGF-1和IGFBP-3水平,并进行统计分析。结果:（1）早产儿血清IGF-1和IGFBP-3水平男女差异无统计学意义（P>0.05）。（2）早产儿血清IGF-1及IGFBP-3水平跟孕周呈正相关,对照组与34+1～36+6周比较（P值<0.05）,与34+1～36+6周、32+1～34周、30+1～32周、28～30周比较（P值均<0.01）。（3）早产儿血清IGF-1与IGFBP-3水平跟胎龄成正相关,对照组>适于胎龄组>小于胎龄组,各组比较（P值均<0.01）。（4）早产儿血清IGF-1及IGFBP-3水平与体重成正相关,对照组>低体重儿>极低体重儿>超低体重儿,各组比较（P值均<0.01）。结论:早产儿血清IGF-1和IGFBP-3水平较正常孕周、胎龄、体重的新生儿低,且与孕周、胎龄及体重成正相关,结合早产儿血清IGF-1与IGFBP-3水平,评估胎儿在宫内时的生长发育情况,可能有助于早产儿的治疗与转归。
何进田[5]（2019）在《姜黄素对IUGR断奶仔猪肝脏功能的调节作用及相关机制研究》文中研究表明宫内发育迟缓（intra-uterinegrowthretardation,以下简称IUGR）通常指胎儿在母体子宫内未达到遗传学上的生长潜能,机体或其器官生长发育受阻,具体表现为低初生重、短体围或体长等。在动物生产上,IUGR有较高的发生率,低初生重新生动物约占到10%。引起IUGR的原因复杂而多样,甚至是由多种原因综合导致。IUGR对动物生产最直观的影响是低初生重、早期高死亡率和高发病率,断奶后饲料利用率较低、生长缓慢、易患病等,最终导致高死亡率和低饲料报酬。因此,对出生后的IUGR动物采取营养调控措施十分必要。姜黄素,是一种天然植物多酚,具有促进生长、提高抗氧化能力和缓解机体损伤与营养物质代谢异常的广泛作用。然而,迄今有关姜黄素在IUGR动物上的研究报道还较少,对其发挥生物学功能的机制研究更是缺乏。为此,本研究探讨了 IUGR对新生仔猪血液细胞因子和肝脏结构、抗氧化功能及糖脂代谢等的影响,并在IUGR断奶仔猪日粮中添加400 mg/kg姜黄素来探究其对IUGR生长发育、抗氧化功能和糖脂代谢的调节作用,进一步通过人工构建IUGR鼠模型来对姜黄素在IUGR上发挥作用的具体机制进行深入研究。1 IUGR对新生仔猪血液细胞因子和肝脏炎症、抗氧化及糖脂代谢的影响试验一各选取正常初生重（normal birth weight,NBW）和IUGR新生仔猪8头,所有新生仔猪均未采食初乳,在出生后1 h内屠宰取样,公母各半。测定血清细胞因子和免疫球蛋白水平以及肝脏组织形态、内部结构、抗氧化酶活性和糖脂代谢等指标。结果表明:与NBW组相比,（1）IUGR对新生仔猪肝脏造成一定程度的损伤,影响内部结构。（2）IUGR组血清TNF-α（P<0.05）和ALT水平（P<0.01）显着上升（P<0.05）。（3）IUGR组肝脏AST、ALT、MDA以及GSSG:GSH 比值均显着升高（P<0.05）,而IUGR组肝脏TAOC、GSH-Px和GR水平均显着下降（P<0.05）。（4）IUGR组血清胰岛素（P=0.05）、乳酸（P<0.01）和HOMA-IR（P<0.01）均显着升高,血清TC水平极显着下降（P<0.01）。（5）IUGR 组肝脏 TC、TG、NEFA、LDH、HK、LPL水平均显着升高（P<0.05）,肝脏丙酮酸含量则出现了显着下降（P<0.05）。由此可见,IUGR会对新生仔猪肝脏形态结构造成损伤,并且会影响机体免疫球蛋白和细胞因子的分泌。IUGR新生仔猪肝脏会出现抗氧化能力的下降和脂代谢调节异常,故对其出生后进行营养调控十分有必要。2 姜黄素对IUGR断奶仔猪生长发育和抗氧化功能的影响试验二各选取20头NBW和IUGR新生仔猪,26日龄时断奶,NBW仔猪分为NBW组（基础日粮）和NC组（基础日粮+400mg/kg姜黄素）,同样IUGR仔猪分为IUGR组（基础日粮）和IC组（基础日粮+400mg/kg姜黄素）。饲喂至50日龄,每组选择体重接近8头仔猪屠宰取样,公母各半,宰前空腹过夜。测定各组生长性能、器官指数、血清生化指标、血清和肝脏抗氧化指标、肝脏抗氧化基因mRNA表达。结果表明:与NBW组相比,（1）IUGR仔猪在哺乳期间体重均较低,其中在第1、14和26 d体重显着下降（P<0.05）。在7-14 d和0-26 dIUGR哺乳仔猪日均增重均显着低于NBW组（P<0.05）。（2）IUGR组断奶仔猪50日龄体重以及平均日增重均显着降低（P<0.01）,IUGR组日均采食量显着降低（P<0.05）,而姜黄素能显着提高IUGR断奶仔猪的日均采食量（P<0.05）。并且,姜黄素能显着降低NBW组断奶仔猪的料重比（P<0.05）。（3）IUGR组肝脏、肾脏和胰腺重量极显着降低（P<0.01）,且IUGR组脾脏指数和胰腺指数显着下降（P<0.05）。姜黄素显着提高了 IUGR断奶仔猪的肾脏重量和脾脏指数（P<0.05）,NC组肝脏重量、胰腺重量和肝脏指数显着降低（P<0.05）。（4）IUGR组血清尿素氮、肌酐、总蛋白和白蛋白水平均显着降低（P<0.05）,而IUGR组血清总胆红素水平显着上升（P<0.05）;NC组血清尿素氮、肌酐和总蛋白水平显着下降（P<0.05）,而总胆红素水平显着升高（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组血清尿素氮水平显着升高（P<0.05）。（5）IUGR组血清CAT、TAOC和GSH-Px水平均显着下降（P<0.05）,且IUGR组肝脏MDA、H2O2和CAT水平均显着上升（P<0.05）和GSH-Px活性显着下降（P<0.05）。日粮添加姜黄素能显着降低血清和肝脏MDA含量以及肝脏H2O2和CAT水平（P<0.05）;能显着升高（P<0.05）血清CAT、TAOC和GR水平以及肝脏TAOC和GSH-Px水平。（6）IUGR组肝脏Nfe2l2、Hmox1、Cat mRNA表达水平均出现了显着下降（P<0.05）,且他们在IC组均被显着上调（P<0.05）。（7）IUGR组Nrf2和Homx1蛋白表达水平均显着下降（P<0.05）。日粮添加姜黄素显着上调了 IUGR断奶仔猪肝脏Nrf2和Homx1蛋白表达水平（P<0.05）。由此可见,姜黄素对促进IUGR断奶仔猪生长发育具有一定的积极作用,能通过Nrf2/ARE通路关键蛋白和相关基因的表达来提高肝脏抗氧化能力。3 姜黄素对IUGR断奶仔猪肝脏损伤和糖脂代谢的影响试验三设计同试验二。测定血清细胞因子、肝脏结构与功能、血清激素、血清和肝脏糖脂代谢指标与其相关基因mRNA表达。结果表明:与NBW组相比,（1）IUGR组血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平显着升高（P<0.05）。日粮添加姜黄素显着降低了血清TNF-α和IL-1β水平（P<0.05）。（2）NBW、NC和IC组肝脏内部结构未见异常。而IUGR组肝脏线粒体有部分呈现椭圆形,线粒体存在部分空泡现象,内质网分布密度较低且存在轻度肿胀现象。（3）IUGR组血清和肝脏ALT活性均显着上升（P<0.05）以及肝脏AST活性显着下将（P<0.05）;NC组血清AST和ALT活性均显着上升（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组血清ALT和肝脏AST与ALT均有下将的趋势（P>0.05）,而IC组血清AST活性却显着上升（P<0.05）。（4）IUGR组血清胰岛素水平和HOMA-IR值显着升高（P<0.05）。日粮添加姜黄素能显着降低血清胰岛素、葡萄糖和HOMA-IR值（P<0.05）,显着提高IUGR断奶仔猪血清瘦素水平（P<0.05）。（5）IUGR组血清HDL-C水平显着上升（P<0.05）,而NEFA水平显着下降（P<0.05）;NC组血清HDL-C显着升高（P<0.05）而血清NEFA水平显着下降（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组血清NEFA水平显着升高（P<0.05）而血清HDL-C显着下降（P<0.05）。（6）IUGR组肝脏糖原含量显着下降（P<0.05）以及LDH、LPL、HL和TL活性显着降低（P<0.05）,IUGR组肝脏乳酸、TC、TG和NEFA含量显着上升（P<0.05）且PK活性显着升高（P<0.05）。IC组肝脏糖原含量以及HL、TL活性较IUGR组显着升高（P<0.05）,IC组肝脏丙酮酸、TC、TG、NEFA含量和PK活性显着下降（P<0.05）。NC组肝脏糖原和乳酸含量以及PK、LPL、TL活性显着上升（P<0.05）,NC组丙酮酸、TG、NEFA含量以及LDH、HL活性显着下降（P<0.05）。（7）IUGR组肝脏Irs1、Pik3c3、Gsk3a、Fabp1和Srebp mRNA表达水平显着上调（P<0.05）,IUGR组肝脏Gys2、Lxr和Ppara mRNA表达水平显着下调（P<0.05）;NC组肝脏Akt2、Fasn和Cd36 mRNA表达水平显着下调（P<0.05）,肝脏Gsk3a、Lxr和PparamRNA表达水平显着上调（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组肝脏Irs1、Pik3c3、Gsk3a、Fasn、Cd36、Scd1 和 Srebp mRNA 表达水平显着下调（P<0.05）,IC组肝脏Gys2、Lxr和para mRNA表达水平显着上调（P<0.05）。由此可见,姜黄素能通过调节基因的表达来促进IUGR断奶仔猪肝脏糖原的合成和脂肪酸氧化,并提高肝脏脂质分解酶活性来缓解糖脂代谢异常。4 基于大鼠模型研究姜黄素对IUGR肝脏损伤和抗氧化功能的调节作用试验四采用妊娠期日粮限饲的方法构建IUGR大鼠模型,在6周龄时按照初生重分别将NBW鼠分为NBW组（正常日粮）和NC组（正常日粮+400mg/kg姜黄素）,同样将IUGR鼠分为IUGR组（正常日粮）和IC组（正常日粮+400 mg/kg姜黄素）。饲喂至12周龄,屠宰取样,每组6只。测定各组血清细胞因子、肝脏脂质过氧化、蛋白质和DNA损伤水平、血清和肝脏抗氧化酶活性、肝脏细胞因子和抗氧化相关基因mRNA表达水平以及肝脏IκBα、NF-κB、JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平。结果表明:与NBW组相比,（1）IUGR新生鼠初生重极显着降低（P<0.01）。在3、4、5、6周龄时,IUGR鼠体重均低于NBW组（P>0.05;P>0.05;P>0.05;P<0.01）。与NBW和IUGR组对比,姜黄素能分别提高NC和IC组在第10周（P>0.05;P>0.05）和第11周（P>0.05;P>0.05）体重。（2）IUGR组心脏、肝脏、脾脏、肾脏和体重均显着降低（P<0.05）。日粮添加400 mg/kg姜黄素能显着降低肝脏重量及其指数（P<0.05）,显着提高脾脏重量及其指数（P<0.05）。（3）IUGR组血清TNF-α IL-1β和IL-6含量显着升高（P<0.05）。姜黄素能降低血清TNF-α（P>0.05）、IL-1β（P<0.05）和IL-6（P<0.05）含量。（4）IUGR组血清AST、ALT活性显着升高（P<0.05）。姜黄素能显着降低血清ALT活性（P<0.01）和IUGR组血清AST活性（P<0.05）。（5）IUGR组肝脏MDA、PC、8-OHDG含量均显着升高（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组肝脏MDA、PC、8-OHDG含量显着降低（P<0.05）。（6）IUGR组血清中GSH含量和GSH-Px活性（P<0.01）与肝脏SOD、GR、GSH-Px活性（P<0.05）均显着降低,而GSSG浓度（P<0.05）和GSSG:GSH值（P<0.01）均显着升高;NC组血清GSH含量和GSH-Px活性以及肝脏SOD、GR活性显着降低（P<0.05）,肝脏GSSG:GSH值显着升高（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组血清中GSH含量和GSH-Px活性与肝脏中GR活性和GSH含量均显着升高（P<0.05）,肝脏GSSG含量和GSSG:GSH值均显着降低（P<0.01）。（7）与NBW 比相比,IUGR组肝脏Il6 mRNA表达水平显着上调（P<0.05）,而 Gst（P<0.05）、Nfe2l2、Hmox1、Gpx1 以及 Sod1（P>0.05）mRNA表达水平下降。与IUGR组相比,IC组肝脏Il1b mRNA表达水平显着下降（P<0.05）,Nfe2l2、Nqo1、Gst和Gpx1 mRNA表达水平显着上升（P<0.05）。（8）IUGR组肝脏IκBα和细胞核NF-κB磷酸化水平显着升高（P<0.05）,细胞质NF-κB磷酸化水平显着下降（P<0.05）。此外,IUGR组肝脏JAK2（P>0.05）和STAT3（P=0.01）磷酸化水平均高于NBW组和NC组。与IUGR组对比,IC组肝脏IκBα磷酸化水平显着下降（P<0.05）,肝脏JAK2以及细胞核和细胞质NF-κB磷酸化水平有下降的趋势（P>0.05）。由此可见,姜黄素可以通过调节IκB/NF-κB、JAK/STAT通路,并激活Nfe2l2和下游基因的表达来缓解IUGR大鼠炎症和提高肝脏抗氧化能力。5 基于大鼠模型研究姜黄素对IUGR肝脏糖脂代谢的调节作用试验五设计同试验四。测定各组大鼠血清激素、血清和肝脏糖脂代谢指标、肝脏组织学形态、肝脏脂代谢相关基因mRNA表达以及肝脏IRS-1、GSK3α/β、Akt/PKB、PI3K蛋白磷酸化水平与SREBP1、PPARα蛋白表达水平。结果表明:与NBW组相比,（1）IUGR组血清胰岛素（P>0.05）、葡萄糖（P<0.05）水平和HOMA-IR（P<0.05）升高。姜黄素极显着降低了 IUGR大鼠血清胰岛素、葡萄糖水平和HOMA-IR（P<0.01）。（2）IUGR组血清TC和TG含量显着降低（P<0.05）,而肝脏TC、TG和NEFA含量显着升高（P<0.05）;姜黄素能显着降低（P<0.05）IUGR组血清HDL-C以及肝脏中TC、TG与NEFA含量和显着升高血清（P<0.05）LDL-C含量。且姜黄素还能显着降低NC组肝脏NEFA含量（P<0.05）。（3）IUGR组和NC组肝脏糖原含量显着降低（P<0.05）;IUGR组肝脏丙酮酸含量显着升高（P<0.05）;NC组肝脏PK活性显着降低（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组肝脏糖原含量显着升高（P<0.05）,丙酮酸含量和 PK 活性显着降低（P<0.05）。（4）IUGR 组肝脏 LPL（P<0.01）、HL（P<0.05）和TL（P<0.05）活性显着下降。日粮添加姜黄素后,能显着提高肝脏LPL（P<0.01）、HL（P<0.05）和TL（P<0.01）活性。（5）NBW和NC大鼠肝脏组织学结构正常。在IUGR大鼠的肝脏组织学切片中,肝脏内有细胞存在空泡化和水肿现象,脂肪细胞显示轻度变性的迹象。在IC组,细胞空泡化明显减少,没有观察到脂肪细胞。（6）IUGR组肝脏Cd36、Srebf1、FasnmRNA表达水平显着上调（P<0.05）,肝脏Ppara和HSL mRNA表达水平显着下调（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组肝脏Ppara和HSL mRNA表达水平显着上调（P<0.05）,肝脏Cd36、Srebf1、Fasn mRNA表达水平显着下调（P<0.05）。（7）IUGR 组肝脏 IRS-1（P>0.05）、AKT（P<0.05）和 GSK3β（P<0.05）磷酸化水平上升;且肝脏GSK3α和PI3K磷酸化水平下降（P>0.05）。与IUGR组相比,IC组组肝脏IRS-1、AKT和GSK3β磷酸化水平显着降低（P<0.05）,肝脏GSK3α和PI3K磷酸化水平有升高的趋势（P>0.05）。与NBW组相比,IUGR组肝脏中SREBP1的蛋白表达水平显着升高（P<0.05）,而PPARα蛋白表达水平显着低于NBW组（P<0.05）。与IUGR组相比,IC组肝脏中SREBP1蛋白表达水平显着降低（P<0.05）,而肝脏PPARα的蛋白表达水平显着升高（P<0.05）。由此可见,姜黄素能通过调节肝脏胰岛素信号通路来缓解IUGR大鼠的胰岛素抵抗。姜黄素还能通过调节肝脏SREBPs靶基因和脂质代谢相关基因,抑制脂质生成和促进脂质分解,来缓解IUGR大鼠肝脏脂质积聚。综上所述,通过以上五部分试验,发现IUGR会对新生仔猪造成诸多不利影响,如炎症损伤、肝脏抗氧化能力下降以及糖脂代谢紊乱等。通过在IUGR断奶仔猪日粮添加姜黄素的试验表明,姜黄素能改善IUGR断奶仔猪生长性能、缓解肝脏损伤、提高抗氧化能力,姜黄素对抗氧化能力的影响可能与其对Nrf2/Hmox1通路关键蛋白和基因mRNA表达的调控有关。姜黄素还能调节IUGR断奶仔猪糖脂代谢紊乱,这可能与对相关基因mRNA表达的调控有关。进一步通过IUGR鼠模型的研究表明,姜黄素能通过调节IκBα/NF-κB、JAK/STAT通路来缓解IUGR肝脏炎症损伤,对IUGR肝脏糖脂代谢的调节作用可能是通过调节胰岛素信号通路和SREBP及其靶基因来实现的。
王斐[6]（2019）在《姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道组织形态及功能的影响》文中认为宫内发育迟缓（Intrauterine growthretardation,IUGR）是指哺乳动物胚胎或胎儿的生长发育受损,表现为胎儿的生长率小于正常生长的胎儿。IUGR问题一直是备受关注的全球性人类健康和动物生产问题,全球大约有5%-7%的婴儿患有IUGR,10%-20%的新生仔猪患有IUGR。肠道是动物营养消化吸收和代谢的重要场所,同时也是最大的免疫器官,对动物的生长发育和免疫防御有重要的意义。姜黄素是一种天然的抗氧化物质,从姜黄中提取而来,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血脂和增强免疫机能等生理功能。由于姜黄素在IUGR断奶仔猪上少有研究,因此本研究以IUGR断奶仔猪为动物模型,探讨姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道组织形态及功能的影响,为改善IUGR后代肠道功能损伤提供新的营养策略。本研究分为以下三个部分:1.姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道生长、组织形态和养分消化的影响选取16头正常初生体重（NBW）仔猪和16头IUGR仔猪,公母各半。26日龄断奶,分别饲喂基础日粮或姜黄素日粮（基础日粮+400mg/kg姜黄素）,即N（NBW+基础日粮）、NC（NBW+姜黄素日粮）、Ⅰ（IUGR+基础日粮）和IC（IUGR+姜黄素日粮）,每组8头,饲养至50日龄屠宰取样。试验结束时,断奶仔猪采集血液后屠宰,取肠道样品进行各项指标的测定。结果表明:（1）与N组断奶仔猪相比,IUGR显着降低增重（WG）和采食量（FI）（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高断奶仔猪WG和FI（P<0.05）。（2）与N组相比,IUGR显着降低了十二指肠的绝对长度（P<0.05）、十二指肠和空肠的相对长度（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高十二指肠和空肠的绝对长度（P<0.05）,显着升高十二指肠的相对长度（P<0.05）。（3）与N组相比,IUGR显着降低了十二指肠绒毛高度（VH）、绒毛宽度（VW）和绒毛高度/隐窝深度（VCR）,空肠VH和VCR以及回肠VH、VW和VCR（P<0.05）,同时都显着提高了十二指肠、空肠和回肠隐窝深度（CD）（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高的十二指肠VH和VCR、空肠VH和VCR以及回肠VH、VW和VCR（P<0.05）,十二指肠、空肠和回肠的CD值显着降低（P<0.05）。（4）与N组相比,IUGR断奶仔猪小肠肠道绒毛容易受损、多断裂、较短且长短不一。与Ⅰ组相比,姜黄素明显提高了肠道绒毛长度和完整性,绒毛断裂数量有所减少。Ⅰ组小肠肠道微绒毛比N组仔猪的更短且参差不齐。与Ⅰ组相比,IC组显着提高了肠道微绒毛长度,空肠更明显。（5）与N组相比,IUGR显着降低断奶仔猪的有机物的表观消化率（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高了干物质、粗蛋白和粗脂肪的表观消化率（P<0.05）。（6）与N组相比,IUGR显着降低了空肠麦芽糖酶和乳糖酶、回肠麦芽糖酶和蔗糖酶的活性（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素可以显着增强回肠乳糖酶的活性（P<0.05）。（7）与N组相比,IUGR断奶仔猪有更低的血清胰岛素样生长因子1（IGF-I）水平和空肠黏膜IGF-I含量及空肠回肠黏膜中IGF-I的mRNA表达量（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高了回肠黏膜IGF-I含量及IGF-I的mRNA表达量（P<0.05）。综上所述,日粮添加姜黄素可以提高肠道二糖酶活性、回肠黏膜IGF-I的含量以及IGF-Ⅰ mRNA表达量,增加了肠道绒毛、微绒毛长度。因此,日粮添加姜黄素可以改善IUGR断奶仔猪的肠道消化吸收功能,促进生长发育。2.姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道抗氧化功能的影响试验设计同试验一。结果表明:（1）与N组相比,IUGR显着升高了断奶仔猪空肠回肠丙二醛（MDA）的含量（P<0.05）;与Ⅰ组相比,姜黄素显着降低空肠回肠蛋白质羰基（PC）、空肠8-羟化脱氧鸟苷（8-OHDG）以及回肠MDA的含量（P<0.05）。（2）与N组相比,IUGR显着降低空肠总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和谷胱甘肽（GSH）含量（P<0.05）;添加姜黄素后,IC组空肠的总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶（CAT）活性显着升高（P<0.05）。（3）与N组相比,IUGR显着降低回肠黏膜中T-SOD、CAT、GSH-Px活性和GSH含量（P<0.05）,显着升高过氧化氢（H2O2）含量（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高了 CAT、GSH-Px的活性（P<0.05）,显着降低了 H2O2含量（P<0.05）。（4）与N组相比,IUGR显着降低了空肠黏膜核因子E2相关因子2（Nrf2）、Kelch样Ech相关蛋白（KEAP）、SOD、GSH-Px1、谷胱甘肽S-转移酶（GST）、醌氧化还原酶（NQO1）、谷氨酸半胱氨酸连接酶（GCLM）、血红素加氧酶1（HO-1）、硫氧还蛋白还原酶（TXNRD1）的mRNA表达水平（P<0.05）。与I组相比,姜黄素显着升高了空肠黏膜Nrf2、CAT、SOD、GST、NQO1和TXNRD1 mRNA表达水平（P<0.05）。（5）与N组相比,IUGR显着降低回肠黏膜CAT的mRNA表达水平（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高回肠黏膜Nrf2、GST、SOD、GSH-Px1、NQO1、TXNRD1 mRNA表达量（P<0.05）。综上所述,IUGR会引起断奶仔猪肠道发生氧化应激,破坏抗氧化防御系统,而通过日粮添加姜黄素这一措施对缓解IUGR诱导的仔猪肠道氧化应激和提高肠道抗氧化功能有一定的帮助作用。3.姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道免疫功能的影响试验设计同试验一。结果表明:（1）与N组断奶仔猪相比,Ⅰ组的白细胞数目显着增加（P<0.05）,血小板数目显着减少（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着降低红细胞数目（P<0.05）,显着升高血小板数目（P<0.05）。（2）与N组相比,IUGR显着升高了血清白介素1β（IL-1β）、白介素2（IL-2）、白介素6（IL-6）、白介素10（IL-10）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量（P<0.05）,显着降低了血清免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）和免疫球蛋白M（IgM）的含量（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着降低血清IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α的含量（P<0.05）,显着升高IL-10、IgG、IgM和分泌型免疫球蛋白（sIgA）的含量（P<0.05）。（3）与N组相比,IUGR显着降低空肠IL-10的含量（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着降低空肠IL-1β、IL-2和TNF-α的含量（P<0.05）,显着降低回肠IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α的含量（P<0.05）。（4）与N组相比,IUGR显着降低了空肠IgA、IgG和sIgA的含量（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着升高了空肠IgG的含量（P<0.05）,显着降低了 IgM的含量（P<0.05）;姜黄素显着升高了回肠IgA、IgG、IgM和sIgA的含量（P<0.05）。（5）与N组相比,IUGR显着降低空肠和回肠IL-10、CD4和CD8的mRNA表达量（P<0.05）,显着增加回肠IL-1β和TNF-α的mRNA表达量（P<0.05）。与Ⅰ组相比,姜黄素显着降低了空肠IL-1β、TNF-α和主要组织相容性复合物Ⅱ（MHC-Ⅱ）的mRNA表达量（P<0.05）,显着增加IL-10、CD4和CD8的mRNA表达量（P<0.05）;与Ⅰ组相比,姜黄素显着降低了回肠IL-1β和 MHC-Ⅱ 的 mRNA 表达量（P<0.05）,显着增加 IL-10、CD4 和 CD8 的 mRNA表达量（P<0.05）。综上所述,IUGR导致断奶仔猪免疫炎症反应上调,细胞因子分泌紊乱以及血清IgA、IgG、IgM和空肠黏膜IgA、IgG和sIgA含量减少。日粮添加姜黄素在一定程度上缓解了 IUGR对断奶仔猪免疫功能的不良影响。综上所述,得出以下结论:（1）IUGR不仅显着降低断奶仔猪的生长性能,而且损伤肠道黏膜的形态结构、消化吸收功能、抗氧化功能和免疫功能。（2）日粮添加姜黄素可以提高肠道二糖酶活性、回肠黏膜IGF-Ⅰ的含量以及IGF-ⅠmRNA表达量,增加了肠道绒毛、微绒毛长度,改善IUGR断奶仔猪的肠道消化吸收功能,促进生长发育。（3）日粮添加姜黄素可以显着降低MDA、PC和8-OHDG的含量,提高抗氧化酶活性和非酶抗氧化物质含量及相关基因表达水平。（4）日粮添加姜黄素通过降低IL-1β等促炎因子水平及表达量、升高IgA等免疫球蛋白含量,可在一定程度上缓解IUGR对断奶仔猪免疫功能的不良影响。
蒋小萃[7]（2019）在《胎儿生长受限相关因素研究》文中认为【目的】探讨胎儿生长受限（Fetal growth restriction,FGR）的危险因素,进一步指导临床监测。【材料与方法】1.回顾性分析2017年1月至2018年10月期间在广州市花都区胡忠医院产科住院分娩单胎活产、胎儿无畸形孕妇的病历资料,共计18401例。2.分析妊娠期高血压、子痫前期、妊娠期肝内胆汁淤积症、羊水过少、贫血、胎盘异常、甲状腺机能减退、糖尿病、高龄妊娠等因素与胎儿生长受限的相关性。3.本研究中使用SPSS 23.0统计分析软件,用（x±s）表示正态分布的连续变量,用中位数（四分位间距）表示偏度分布的连续变量,分类变量采用率或组成比描述,采用卡方检验和多元logistic回归分析方法对影响FGR的因素进行分析。检验水准α=0.05,以P<0.05为有统计学意义。【结果】1.18401名孕妇中,493人合并甲状腺机能减退,370人合并妊娠期高血压,3647人合并妊娠期糖尿病,330人合并妊娠肝内胆汁淤积,795人合并羊水过少,5512人合并贫血症,30人合并脐带异常,63人合并胎盘异常,331人合并子痫前期,354人合并胎儿生长受限。2.将所有研究对象根据是否合并胎儿生长受限分为病例组354例与对照组18047例。病例组与对照组平均年龄、平均孕次、平均产次以及产妇类型之间比较均差异不明显,不具有统计学意义（P>0.05）;病例组平均新生儿体重明显低于对照组（P<0.05）。3.病例组空腹血糖、孕早期PAPP-A、孕早期PLGF均分别明显低于对照组;病例组红细胞压积明显高于对照组,具有统计学意义（P<0.05）。4.病例组与对照组孕早期、孕中期、孕晚期总血浆蛋白S（TPS）水平之间比较均无明显差异,不具有统计学意义（P>0.05）;病例组与对照组孕早期、孕中期血浆游离蛋白S（FPS）水平之间比较均无明显差异,不具有统计学意义（P>0.05）,而病例组孕晚期FPS水平明显低于对照组（t=4.639,P=0.014）;病例组与对照组孕早期PS活性之间比较无明显差异,不具有统计学意义（P>0.05）,而病例组孕中期、孕晚期PS活性均分别明显低于对照组（t=8.137、6.268,P=0.000、0.013）。5.合并妊娠期高血压、子痫前期、妊娠肝内胆汁淤积症、羊水过少、贫血、胎盘异常与胎儿生长受限显着相关（P<0.05）;而甲状腺机能减退、糖尿病、高龄妊娠与胎儿生长受限无相关性（P>0.05）。6.妊娠肝内胆汁淤积症、羊水过少、贫血、胎盘异常是影响胎儿生长受限的独立因素,有妊娠期肝内胆汁淤积症者患胎儿生长受限的风险是无妊娠期肝内胆汁淤积症者的1.948倍（95%CI:1.090 3.483）;羊水过少者患胎儿生长受限的风险是无羊水过少者的4.046倍（95%CI:3.001 5.455）;有胎盘异常者患胎儿生长受限的风险是无胎盘异常者的11.581倍（95%CI:6.27621.368）;贫血者患胎儿生长受限的风险是无贫血者的0.286倍（95%CI:0.2020.405）。7.病例组胎儿窘迫、新生儿窒息、围生儿死亡发生率45.76%（162/354）、19.77%（70/354）、3.11%（11/354）均分别明显高于对照组9.77%（1764/18047）、3.27%（591/18047）、0.05%（10/18047）,均具有统计学意义（P<0.05）。8.根据分娩方式将胎儿生长受限孕妇分为<2kg组82例、2.0-2.4kg组127例、2.4-2.5kg组45例,<2kg组新生儿Apgar评分0-3分比例与4-7分比例、新生儿窒息率、新生儿死亡率均分别明显高于2.0-2.4kg组、2.4-2.5kg组,具有统计学意义（P<0.05）;但2.0-2.4kg组、2.4-2.5kg组新生儿Apgar评分0-3分比例与4-7分比例、新生儿窒息率、新生儿死亡率之间比较均无明显差异,无统计学意义（P>0.05）。【结论】妊娠期高血压、子痫前期、妊娠期肝内胆汁淤积症、羊水过少、贫血、胎盘异常与胎儿生长受限有关;而妊娠期肝内胆汁淤积症、羊水过少、贫血、胎盘异常是胎儿生长受限的独立风险因素;应尽早发现这些高危因素,及时有效的预防和控制措施,降低围产期的发病率和死亡率。
汤琦[8]（2019）在《妊娠期能量限饲对子代成年大鼠胰岛β细胞的影响》文中进行了进一步梳理在农业生产上,由于母畜在妊娠期间饲料供给不足或者饲料短缺,容易造成母畜能量摄入不足,从而导致胎儿宫内生长发育迟缓（Intrauterine growthretardation,IUGR）。IUGR仔畜的出生体重降低,胰腺重量降低,并在后天的生长发育过程中,容易造成家畜瘦肉品质下降并产生相关代谢性疾病。目前,多种IUGR动物模型表明母体妊娠期能量摄入不足能够导致IUGR子代胰岛β细胞的生长发育受损和胰岛素分泌功能紊乱,主要表现为β细胞面积减小、β细胞质量和数量降低、胰岛素分泌降低以及PDX-1（胰腺十二指肠同源框因子-1）的表达量降低。然而,大多数IUGR限饲模型的研究主要在母体妊娠期和哺乳期,并且集中在胎儿和新生儿的胰岛β细胞。所以,胎儿先天能量限饲所造成的胰岛损伤是否能通过后天正常饮食的弥补而有一定程度的恢复还不清楚,也就是说,IUGR子代在哺乳期和后天恢复正常能量摄入对胰岛β细胞是否有持续性的影响以及相关调控机制还有待研究。因此,本试验采用Sprague Dawley（SD）大鼠为试验材料,探究IUGR子代出生后恢复正常能量摄入对其成年胰岛β细胞形态和胰岛素分泌功能的影响。本试验旨在为探索IUGR子代在出生后恢复正常能量摄入对成年子代相关代谢疾病的影响及相关调控机制提供理论依据。试验内容主要分为了三部分:1、通过在母鼠妊娠第10天至分娩期间限制饲料50%摄入的方法建立IUGR仔鼠模型,而IUGR仔鼠在母鼠哺乳期至12周龄饲喂正常能量（IUGR组）;对照组是子代在母鼠妊娠期至12周龄一直饲喂正常能量（Control组）。2、通过腹腔注射葡萄糖耐量试验（IPGTT）,在整体水平上检测12周龄大鼠葡萄糖耐受和胰岛素分泌应答功能;并提取12周龄大鼠的原代胰岛细胞,通过RT-qPCR分析葡萄糖转运、KATP通道、Ca2+通道和胰岛素基因等胰岛素分泌相关调控因子的mRNA表达变化。3、通过免疫组化对12周龄大鼠的胰岛β细胞进行形态学分析;并通过RT-qPCR分析12周龄大鼠原代胰岛细胞的PDX-1、IGFs、FGFs、EGF和VEGFa等胰岛生长发育相关调控因子的表达变化。本试验结果:1、IUGR组子代大鼠的出生体重（0周）比Control组降低12.7%（P<0.01）,而12周龄前的每周体重在IUGR组和Control组之间无差异;而且12周龄子代大鼠的组织（如:胰腺、肝脏、脾、心脏和肺）重量变化无差异。2、IPGTT试验结果发现,12周龄子代大鼠的血糖浓度变化在180min内没有差异,而IUGR组的血浆胰岛素浓度在60min和120min时降低（P<0.05）。RT-qPCR结果显示胰岛素分泌相关调控因子（GLUT2、Kir6.2、CACNA1C、MICU1、PPARα、PPARγ、UCP2、Insulin1、Insulin2和IR）的mRNA表达均无显着差异。3、免疫荧光染色结果发现,胰岛β细胞弥散性的分布在胰腺外分泌腺泡组织之间;经统计分析,胰岛β细胞面积及其与胰腺组织面积的比例均无显着差异。RT-RCR结果显示除了IUGR组的PDX-1的表达水平上调（P<0.05）,其他胰岛细胞生长发育相关调控因子（IGFs、FGF10、FGF21、FGFR1、FGFR2、EGF、EGFR和VEGFa）的mRNA表达均无显着差异。根据以上结果推测:1、在妊娠期间采用限饲50%的方法能够成功构建IUGR仔鼠模型。此外,IUGR仔鼠在出生后通过恢复正常能量摄入能够使体重出现追赶性生长,并且使成年子代大鼠的体重和胰腺重量恢复到正常水平。2、通过胰岛素分泌应答试验发现,IUGR组大鼠的血糖浓度无变化而血浆胰岛素浓度却降低,说明IUGR仔鼠在成年后有潜在的胰岛素敏感性增强的可能性。3、子代成年大鼠的胰岛β细胞面积及其与胰腺面积的比例无显着性差异,说明IUGR仔鼠在后天的正常能量摄入能使胰岛β细胞的生长发育恢复到正常水平,而上调的PDX-1的表达量能为这种补偿机制作出解释。综上所述:母体妊娠期能量限饲会产生低出生体重的IUGR仔鼠,但IUGR子代出生后恢复正常能量摄入能使成年子代大鼠的体重、胰腺重量、胰岛β细胞面积和胰岛素分泌应答功能恢复到正常水平。虽然胰岛β细胞中上调的PDX-1信号作为潜在的补偿机制能够恢复先天能量限饲所造成的胰岛损伤,但是持续性的PDX-1上调并伴随着外周组织的胰岛素敏感性增强也会更容易导致后天胰岛β细胞的过度增殖及其肥胖等代谢性疾病的发生。
田红燕,滕飚,周长飞[9]（2017）在《宫内发育迟缓儿生长相关激素水平的变化及临床意义》文中研究说明目的分析宫内发育迟缓儿生长相关激素水平的变化特点,并对其临床意义进行总结。方法将宫内发育迟缓儿共计50例作为研究对象,根据身长/头围比进行分组。对匀称组、非匀称组患儿生长相关激素水平进行对比,并就其与体质量的相关性进行的分析。结果出生时,两组患儿生长相关激素水平对比无明显差异,P>0.05,不具有统计学意义。出生3个月后,匀称组患儿生长相关激素水平均明显低于非匀称组,P>0.05,具有统计学意义。匀称组患儿出生3个月后体质量与生长相关激素水平有正相关关系,P<0.05,非匀称组患儿出生时、出生3个月后体质量与生长相关激素水平无相关性,P>0.05。结论宫内发育迟缓患儿主要有匀称性、非匀称性两类,需采取不同对策进行临床干预,以得到较好的预期生长效果。
吴蒙蒙,杨凡,屈艺,母得志[10]（2017）在《孕鼠叶酸缺乏对子鼠胰岛素样生长因子系统甲基化的影响》文中研究表明目的观察孕期叶酸缺乏对胎鼠生长发育及胰岛素样生长因子（IGF）系统甲基化的影响。方法将22只Sprague-Dawley雌鼠随机分为叶酸缺乏组（n=12）和正常对照组（n=10）,分别喂养叶酸缺乏饲料和普通饲料,2周后与雄鼠交配,两组各8只雌鼠成功受孕,于怀孕第20天对孕鼠剖腹取胎,每组取32只胎鼠测量其头尾长、体重。两组分别另取8只胎鼠,采用ELISA法对其脑、肝脏组织中的叶酸、IGF-1、胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP）-3水平进行检测。两组分别另取3只胎鼠,使用全基因组甲基化测序方法检测其脑、肝脏组织IGF系统的甲基化情况。同时采用ELISA法对两组孕鼠血清IGF-1、IGFBP-3水平进行检测。结果叶酸缺乏组胎鼠头尾长、体重较正常对照组降低（P<0.05）;叶酸缺乏组孕鼠血清IGF-1、IGFBP-3与胎鼠脑、肝脏组织中的叶酸、IGFBP-3水平均低于正常对照组（P<0.05）;叶酸缺乏组胎鼠脑组织中IGF-1R、IGF-2R、IGFBP-2、IGFBP-5、IGFBP-6、IGFBP-7的甲基化水平均高于正常对照组（P<0.05）;而在肝脏组织中,相比于正常对照组,叶酸缺乏组胎鼠IGF-1R、IGF-2R、IGFBP-3、IGFBP-5甲基化水平增加,IGF-2甲基化水平则下降（P<0.05）。结论孕鼠叶酸缺乏会影响胎鼠宫内的生长发育,其机制可能与胰岛素生长因子系统的甲基化异常有关。
二、宫内生长迟缓儿胰岛素样生长因子及其结合蛋白水平的变化（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、宫内生长迟缓儿胰岛素样生长因子及其结合蛋白水平的变化（论文提纲范文）
（1）能量负平衡奶牛产后乏情的关键蛋白筛选及作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 奶牛能量负平衡与繁殖的关系 |
| 1.1.1 奶牛能量负平衡的概述 |
| 1.1.2 能量负平衡对奶牛发情周期和繁殖的影响 |
| 1.2 奶牛卵泡生长发育的研究进展 |
| 1.2.1 卵泡发育的生理过程 |
| 1.2.2 奶牛产后腔前卵泡发育 |
| 1.2.3 排卵前卵泡的发育 |
| 1.3 能量负平衡对奶牛卵泡发育的影响 |
| 1.3.1 卵泡液中能量代谢对卵泡发育的影响 |
| 1.3.2 卵泡内细胞对葡萄糖的摄取 |
| 1.3.3 卵泡内细胞对脂肪酸的摄取 |
| 1.3.4 葡萄糖和脂肪酸代谢之间的稳态对卵泡内细胞的影响 |
| 1.3.5 能量负平衡对奶牛产后发情的影响 |
| 1.4 奶牛蛋白质组学的研究进展 |
| 1.4.1 蛋白组学技术在奶牛临床上的作用 |
| 1.4.2 奶牛血液蛋白质组学 |
| 1.4.3 奶牛组织蛋白质组学 |
| 1.5 奶牛脂联素的研究进展 |
| 1.5.1 脂联素与能量代谢的关系 |
| 1.5.2 脂联素与生殖机能的关系 |
| 1.5.3 脂联素在奶牛繁殖中的作用 |
| 1.6 PI3K-AKT信号通路与奶牛卵泡生长发育的关系 |
| 1.6.1 PI3K-AKT信号通路 |
| 1.6.2 PI3K-AKT信号通路在卵泡发育中的作用 |
| 1.7 研究目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要试验仪器 |
| 2.1.3 实验耗材和试剂 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 试验动物分组 |
| 2.2.2 试验样品采集 |
| 2.2.3 样品处理 |
| 2.2.4 生化指标的检测 |
| 2.2.5 Western blot 检测方法 |
| 2.2.6 免疫组化检测方法 |
| 2.2.7 ELISA 检测方法 |
| 2.2.8 统计学分析方法 |
| 2.2.9 血清、卵泡液和卵巢皮质组织的蛋白组学分析 |
| 2.2.10 差异表达蛋白 ADPN 与 NEB 奶牛乏情的关系及其风险预警作用 |
| 2.2.11 ADPN 对低糖环境下奶牛体外 GCs 增殖和类固醇激素合成的影响 |
| 2.2.12 ADPN 经 PI3K-AKT 信号通路对低糖环境下 GCs 增殖和类固醇激素合成的影响 |
| 3 结果 |
| 3.1 两组试验奶牛临床病理学变化 |
| 3.1.1 试验奶牛临床信息的比较 |
| 3.1.2 试验奶牛血液生化指标水平的比较 |
| 3.2 两组试验奶牛蛋白组学分析结果的比较 |
| 3.2.1 试验奶牛血清、卵泡液和卵泡腔组织匀浆液中蛋白浓度 |
| 3.2.2 蛋白质鉴定结果和质谱总体分析 |
| 3.2.3 血清差异蛋白及其生物信息学分析结果 |
| 3.2.4 卵泡液差异蛋白及其生物信息学分析结果 |
| 3.2.5 卵巢组织差异蛋白及其生物信息学分析结果 |
| 3.3 两组试验奶牛DEP的免疫印迹验证结果 |
| 3.3.1 血清中DEP疫印迹验证 |
| 3.3.2 卵泡液中DEP疫印迹验证 |
| 3.3.3 卵巢皮质组织差异蛋白免疫印迹验证 |
| 3.4 能量负平衡所致的乏情奶牛DEP的韦恩分析结果 |
| 3.5 ADPN与NEB奶牛乏情的关系及其风险预警作用 |
| 3.5.1 试验牛产后生化指标的水平 |
| 3.5.2 试验奶牛产后血液和卵泡液生化指标相关性分析 |
| 3.5.3 试验奶牛卵巢组织中ADPN及其受体的基因表达水平 |
| 3.5.4 试验奶牛组织中ADPN及其受体的蛋白表达水平 |
| 3.5.5 奶牛产后NEB与血清ADPN的关系 |
| 3.5.6 奶牛产后14-21d血清ADPN对产后55-60d卵泡发育的风险预警作用 |
| 3.6 ADPN对低糖环境下奶牛颗粒细胞增殖和激素分泌的影响 |
| 3.6.1 奶牛体外培养的颗粒细胞(GCs)模型的鉴定 |
| 3.6.2 低糖培养对GCs类固醇激素分泌的影响 |
| 3.6.3 低糖培养对GCs增殖的影响 |
| 3.6.4 低糖培养GCs对ADPN受体的影响 |
| 3.6.5 低糖培养模型中ADPN最佳添加剂量和时间 |
| 3.6.6 低糖培养模型下不同浓度ADPN对GCs激素分泌的影响 |
| 3.6.7 低糖培养模型中添加不同浓度ADPN对GCs增殖的影响 |
| 3.7 ADPN经PI3K-AKT信号通路对低糖环境下GCs增殖和激素分泌的影响 |
| 3.7.1 ADPN对低糖培养GCs模型中AKT磷酸化的影响 |
| 3.7.2 ADPN 经 PI3K/AKT 通路对低糖培养 GCs 模型细胞活性的影响 |
| 3.7.3 ADPN 通过 PI3K-AKT-CDK2 对低糖培养 GCs 模型 CDK2 的影响 |
| 3.7.4 ADPN 经 PI3K/AKT 对低糖培养 GCs 模型类固醇激素合成的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 能量负平衡奶牛产后乏情蛋白组学分析及其差异蛋白的潜在作用 |
| 4.2 ADPN与NEB奶牛卵泡发育的关系及其风险预警作用 |
| 4.3 ADPN对低糖环境下奶牛颗粒细胞增殖和类固醇激素合成的影响 |
| 4.4 ADPN 经 PI3K-AKT 对低糖环境下 GCs 增殖和类固醇激素合成的影响 |
| 5 结论 |
| 6 附表 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（2）PI3K/AKT信号通路在IGF1诱导HTR-8/SVneo细胞分泌HCG和Pg的作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 胚胎停育概述 |
| 1.2 IGF1/IGF1R的功能及其对胚胎发育的影响 |
| 1.3 PI3K/AKT信号通路与细胞凋亡 |
| 1.4 HCG和孕酮在妊娠早期的重要意义 |
| 1.5 本研究的目的及意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 研究设计及技术路线图 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 细胞株 |
| 2.2.2 实验试剂与仪器 |
| 2.2.3 主要试剂配置 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 细胞培养 |
| 2.3.2 细胞计数法绘制生长曲线 |
| 2.3.3 CCK-8 实验 |
| 2.3.4 实验分组和细胞处理 |
| 2.3.5 实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)测定基因表达水平 |
| 2.3.6 Wes全自动蛋白表达分析系统检测蛋白表达水平 |
| 2.3.7 流式细胞术测定细胞总凋亡水平 |
| 2.3.8 ELISA测定细胞上清中HCG和 Pg的分泌水平 |
| 2.4 统计分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 细胞基本情况 |
| 3.2 细胞存活率 |
| 3.3 HTR-8/SVneo细胞PI3K/AKT信号通路的基因和蛋白表达情况 |
| 3.3.1 PI3K和 AKT m RNA表达量 |
| 3.3.2 PI3K/AKT信号通路蛋白表达量 |
| 3.4 HTR-8/SVneo细胞中凋亡相关因子的基因以及蛋白表达情况 |
| 3.4.1 凋亡相关因子的m RNA表达量 |
| 3.4.2 细胞凋亡相关因子的蛋白表达量 |
| 3.5 细胞凋亡率 |
| 3.6 IGF1-PI3K/AKT信号通路在HCG和 Pg分泌中的作用 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 IGF1具有促HTR-8/SVneo细胞增殖的活性 |
| 4.2 IGF1 对细胞PI3K/AKT信号通路的激活作用 |
| 4.3 IGF1对HTR-8/SVneo细胞的抗凋亡作用 |
| 4.4 PI3K/AKT信号通路参与IGF1 诱导细胞分泌HCG |
| 第五章 结论与展望 |
| 5.1 主要结论 |
| 5.2 不足之处与展望 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
（3）六味地黄膏摩对脑瘫幼鼠SS/GHRH表达影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词对照表 |
| 引言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 试剂与药品 |
| 1.1.3 仪器 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 六味地黄膏制备 |
| 1.2.2 脑瘫幼鼠模型的制备 |
| 1.2.3 实验动物分组情况 |
| 1.2.4 干预方法 |
| 1.2.5 观测指标 |
| 1.2.6 检测方法 |
| 1.2.7 统计学分析方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 动物模型验证翻正行为学分析 |
| 2.2 五组幼鼠生长发育情况 |
| 2.2.1 体质量结果 |
| 2.2.2 身长+尾长结果 |
| 2.2.3 睁眼时间结果 |
| 2.3 五组幼鼠运动能力情况比较 |
| 2.3.1 步态分析比较 |
| 2.3.2 负向趋地情况 |
| 2.4 五组幼鼠外周蛋白表达情况 |
| 2.4.1 外周SS蛋白表达情况 |
| 2.4.2 外周GHRH蛋白表达情况 |
| 2.5 下丘脑蛋白表达结果 |
| 2.5.1 下丘脑SS蛋白表达情况 |
| 2.5.2 下丘脑GHRH蛋白表达情况 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 5 问题和展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 生长激素在脑瘫患儿中的作用机制及研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 攻读学位期间参加科研课题情况 |
| 致谢 |
（4）早产儿血清IGF-1、IGFBP-3浓度与孕周、胎龄及体重相关性探讨（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 观察指标 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 不同性别早产儿IGF-1和IGFBP-3水平比较 |
| 2.2 不同孕周早产儿的IGF-1及IGFBP-3水平比较 |
| 2.3 不同胎龄早产儿的IGF-1与IGFBP-3水平比较 |
| 2.4 不同体重早产儿的IGF-1与IGFBP-3水平比较 |
| 3 讨论 |
（5）姜黄素对IUGR断奶仔猪肝脏功能的调节作用及相关机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 本文部分缩略词的中英文对照 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 IUGR的概述 |
| 1 IUGR的发生与定义 |
| 2 引起IUGR的原因 |
| 3 IUGR对人类健康造成的影响 |
| 4 IUGR对猪生产造成的影响 |
| 5 在猪生产上IUGR的预防与营养调控 |
| 第二节 姜黄素的概述及其在畜禽生产上的应用 |
| 1 姜黄素 |
| 2 姜黄素的生物学功能 |
| 3 姜黄素在畜禽生产上的应用 |
| 第二章 IUGR对新生仔猪血液细胞因子和肝脏炎症、抗氧化及糖脂代谢的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第三章 姜黄素对IUGR断奶仔猪生长发育和抗氧化功能的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第四章 姜黄素对IUGR断奶仔猪肝脏损伤和糖脂代谢的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第五章 基于大鼠模型研究姜黄素对IUGR肝脏损伤和抗氧化功能的调节作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 第六章 基于大鼠模型研究姜黄素对IUGR肝脏糖脂代谢的调节作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 本文创新点与有待进一步研究的问题 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间论文发表情况 |
（6）姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道组织形态及功能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 本文部分缩略词的中英文对照表 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 猪宫内发育迟缓的研究进展 |
| 1 宫内发育迟缓的发生机制 |
| 2 宫内发育迟缓动物模型的构建 |
| 2.1 手术结扎构建IUGR模型 |
| 2.2 限制母体营养构建IUGR模型 |
| 2.3 自选择构建IUGR模型 |
| 3 宫内发育迟缓对断奶仔猪肠道生长发育及功能的影响 |
| 3.1 IUGR对动物存活率的影响 |
| 3.2 IUGR对动物肠道生长发育和组织形态的影响 |
| 3.3 IUGR对动物肠道内消化酶活性的影响 |
| 3.4 IUGR对动物肠道抗氧化功能的影响 |
| 3.5 IUGR对肠道免疫功能的影响 |
| 4 宫内发育迟缓断奶仔猪肠道生长发育及功能的营养调控 |
| 第二节 姜黄素的研究进展 |
| 1 姜黄素的理化性质与体内代谢 |
| 2 姜黄素的生理功能 |
| 2.1 抗氧化 |
| 2.2 抗炎 |
| 2.3 抗肿瘤 |
| 2.4 降血脂 |
| 3 姜黄素在畜禽生产中的应用 |
| 3.1 姜黄素在猪生产中的应用 |
| 3.2 姜黄素在家禽生产中的应用 |
| 第二章 姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道生长、组织形态和养分消化的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物与设计 |
| 1.2 样品采集与制备 |
| 1.3 测定指标与方法 |
| 1.4 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 姜黄素对IUGR断奶仔猪生长性能的影响 |
| 2.2 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道指数的影响 |
| 2.3 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜组织形态的影响 |
| 2.4 姜黄素对IUGR断奶仔猪养分表观消化率的影响 |
| 2.5 姜黄素对IUGR断奶仔猪二糖酶活性的影响 |
| 2.6 姜黄素对IUGR断奶仔猪血清和肠道黏膜激素含量的影响 |
| 2.7 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜IGF-I基因mRNA表达量的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道生长性能的影响 |
| 3.2 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道指数的影响 |
| 3.3 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道组织形态的影响 |
| 3.4 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪表观消化率的影响 |
| 3.5 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道二糖酶活性的影响 |
| 3.6 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪血清和肠道IGF-I含量的影响 |
| 3.7 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道IGF-I mRNA表达量的影响 |
| 4 本章小结 |
| 第三章 姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道氧化还原状态的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物与设计 |
| 1.2 样品采集 |
| 1.3 测定指标与方法 |
| 1.4 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜MDA、PC和8-OHDG含量的影响 |
| 2.2 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜抗氧化酶活性、GSH含量和H2O2含量的影响 |
| 2.3 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜抗氧化功能相关基因mRNA表达量的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜MDA、PC和8-OHDG含量的影响 |
| 3.2 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道抗氧化酶活性、GSH含量和H_2O_2含量的影响 |
| 3.3 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜抗氧化功能相关基因mRNA表达量的影响 |
| 4 本章小结 |
| 第四章 姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道免疫功能的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物与设计 |
| 1.2 样品采集 |
| 1.3 测定指标与方法 |
| 1.4 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 姜黄素对IUGR断奶仔猪血常规指标的影响 |
| 2.2 姜黄素对IUGR断奶仔猪血清细胞因子和免疫球蛋白含量的影响 |
| 2.3 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜细胞因子含量的影响 |
| 2.4 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜免疫球蛋白含量的影响 |
| 2.5 姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜免疫功能相关基因mRNA表达量的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪血常规指标的影响 |
| 3.2 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪血清和肠道黏膜细胞因子含量的影响 |
| 3.3 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪血清和肠道黏膜免疫球蛋白含量的影响 |
| 3.4 日粮添加姜黄素对IUGR断奶仔猪肠道黏膜免疫相关基因mRNA表达量的影响 |
| 4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 |
（7）胎儿生长受限相关因素研究（论文提纲范文）
| 缩略语简表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 在读期间研究成果 |
| 致谢 |
（8）妊娠期能量限饲对子代成年大鼠胰岛β细胞的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 宫内发育迟缓(IUGR)概述 |
| 1.1.1 IUGR产生原因 |
| 1.1.2 IUGR动物模型 |
| 1.2 IUGR对后代健康及组织器官的影响 |
| 1.3 胰岛β细胞生长发育相关调控因子 |
| 1.3.1 胰腺十二指肠同源框因子-1(PDX-1) |
| 1.3.2 胰岛素样生长因子(IGF) |
| 1.3.3 成纤维细胞生长因子(FGF) |
| 1.3.4 表皮生长因子(EGF) |
| 1.3.5 血管内皮生长因子A(VEGFa) |
| 1.4 胰岛素分泌相关调控因子 |
| 1.4.1 葡萄糖转运 |
| 1.4.2 ATP/ADP比值 |
| 1.4.3 KATP通道 |
| 1.4.4 Ca~(2+)通道 |
| 1.4.5 胰岛素基因 |
| 1.5 研究现状 |
| 第2章 引言 |
| 第3章 宫内发育迟缓子代大鼠模型建立 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 试验动物 |
| 3.1.2 主要仪器 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.3 数据处理与分析 |
| 3.4 结果 |
| 3.4.1 0~12周的每周大鼠体重 |
| 3.4.2 12周龄大鼠的组织重量 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 小结 |
| 第4章 IUGR对成年子代大鼠胰岛素分泌的影响及相关调控机制 |
| 4.1 试验材料 |
| 4.1.1 试验动物 |
| 4.1.2 主要试剂及耗材 |
| 4.1.3 主要仪器 |
| 4.1.4 溶液配制 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.2.1 腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT) |
| 4.2.2 大鼠血浆胰岛素酶联免疫分析(ELISA) |
| 4.2.3 大鼠原代胰岛细胞的分离和纯化 |
| 4.2.4 提取胰岛细胞总RNA |
| 4.2.5 引物序列及合成 |
| 4.2.6 逆转录合成cDNA |
| 4.2.7 PCR扩增反应 |
| 4.2.8 琼脂糖凝胶电泳 |
| 4.2.9 实时荧光定量PCR反应(RT-qPCR) |
| 4.3 数据处理与分析 |
| 4.4 结果 |
| 4.4.1 12周龄大鼠血糖和血浆胰岛素浓度变化 |
| 4.4.2 胰岛素分泌相关调控因子的表达变化 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 小结 |
| 第5章 IUGR对成年子代大鼠胰岛β细胞形态的影响及相关调控机制 |
| 5.1 试验材料 |
| 5.1.1 试验动物 |
| 5.1.2 主要试剂 |
| 5.1.3 主要仪器 |
| 5.1.4 溶液配制 |
| 5.2 试验方法 |
| 5.2.1 胰腺组织的冷冻切片制作 |
| 5.2.2 胰岛β细胞的免疫荧光染色 |
| 5.2.3 大鼠原代胰岛细胞的分离和纯化 |
| 5.2.4 提取胰岛细胞总RNA |
| 5.2.5 引物序列及合成 |
| 5.2.6 逆转录合成cDNA |
| 5.2.7 PCR扩增反应 |
| 5.2.8 琼脂糖凝胶电泳 |
| 5.2.9 实时荧光定量PCR反应 |
| 5.3 数据处理与分析 |
| 5.4 结果 |
| 5.4.1 β细胞形态学观察 |
| 5.4.2 胰岛β细胞面积比例变化 |
| 5.4.3 胰岛生长发育相关调控因子的表达变化 |
| 5.5 讨论 |
| 5.6 小结 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（9）宫内发育迟缓儿生长相关激素水平的变化及临床意义（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料: |
| 1.2 方法: |
| 1.3 观察指标: |
| 1.4 统计学处理: |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
（10）孕鼠叶酸缺乏对子鼠胰岛素样生长因子系统甲基化的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试剂与材料 |
| 1.2 动物模型的制备 |
| 1.3 标本采集及实验记录 |
| 1.4 ELISA法检测叶酸、IGF-1及IGFBP-3水平 |
| 1.5 Me DIP-seq行全基因组DNA甲基化测序 |
| 1.6 差异甲基化基因筛选 |
| 1.7 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 两组雌鼠受孕情况及胚胎情况 |
| 2.2 两组孕鼠及胎鼠体格生长指标 |
| 2.3 两组孕鼠血清IGF-1、IGFBP-3水平及两组胎鼠脑、肝脏组织中叶酸、IGF-1、IGFBP-3水平的比较 |
| 2.4 两组胎鼠脑、肝脏组织中IGFs基因的甲基化水平比较 |
| 3 讨论 |
四、宫内生长迟缓儿胰岛素样生长因子及其结合蛋白水平的变化（论文参考文献）
- [1]能量负平衡奶牛产后乏情的关键蛋白筛选及作用机制研究[D]. 赵畅. 黑龙江八一农垦大学, 2021(01)
- [2]PI3K/AKT信号通路在IGF1诱导HTR-8/SVneo细胞分泌HCG和Pg的作用研究[D]. 白瑾. 兰州大学, 2021(09)
- [3]六味地黄膏摩对脑瘫幼鼠SS/GHRH表达影响的研究[D]. 施英华. 云南中医药大学, 2020(02)
- [4]早产儿血清IGF-1、IGFBP-3浓度与孕周、胎龄及体重相关性探讨[J]. 黄秋生,张伟峰,孙振宏,彭维林,傅清流. 医学理论与实践, 2019(18)
- [5]姜黄素对IUGR断奶仔猪肝脏功能的调节作用及相关机制研究[D]. 何进田. 南京农业大学, 2019(08)
- [6]姜黄素对宫内发育迟缓断奶仔猪肠道组织形态及功能的影响[D]. 王斐. 南京农业大学, 2019(08)
- [7]胎儿生长受限相关因素研究[D]. 蒋小萃. 广州医科大学, 2019(01)
- [8]妊娠期能量限饲对子代成年大鼠胰岛β细胞的影响[D]. 汤琦. 西南大学, 2019(01)
- [9]宫内发育迟缓儿生长相关激素水平的变化及临床意义[J]. 田红燕,滕飚,周长飞. 中国医药指南, 2017(18)
- [10]孕鼠叶酸缺乏对子鼠胰岛素样生长因子系统甲基化的影响[J]. 吴蒙蒙,杨凡,屈艺,母得志. 中国当代儿科杂志, 2017(04)